潘貴珍，李召斌，凍楊美，周德剛

摘要：目的：本研究旨在觀察苦參功勞顆粒對雞大腸桿菌病的治療效果。方法：患大腸桿菌病肉雞，2棟，每棟16，000只，分為苦參功勞顆粒組（1g/L）和鹽酸多西環(huán)素可溶性粉組（3g/L），于給藥前和試驗(yàn)期間觀察并記錄雞只采食量、糞便狀況和死亡情況。結(jié)果：肉雞給藥后采食量和糞便基本恢復(fù)，可極顯著降低動物的死亡率（P<0.01），表明苦參功勞顆粒對雞的大腸桿菌病有效。結(jié)論：苦參功勞顆粒，1g/L，連用3d，對雞大腸桿菌病有較好的治療作用。

關(guān)鍵詞：苦參功勞顆粒;大腸桿菌;蛋雞腹瀉;死亡率;耐藥

雞大腸桿菌病是一種由致病性大腸桿菌引起的急性或慢性傳染病，具有發(fā)病率高、發(fā)病快、死亡率高的特點(diǎn)，給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1，2]。目前，在飲水或飼料中添加抗生素是預(yù)防和治療雞大腸桿菌病的主要手段，然而由于抗菌藥的長期不合理使用，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性日益嚴(yán)重，臨床上分離多重耐藥菌的報(bào)道日益增多[3]。此外，由于長期在飼料中添加抗菌藥物導(dǎo)致的動物源性食品藥物殘留威脅公眾的生命健康安全，我國開始實(shí)施藥物飼料添加劑退出計(jì)劃，給大腸桿菌病防控帶來新的挑戰(zhàn)?？鄥⒐陬w粒是按傳統(tǒng)中獸醫(yī)理論開發(fā)的中獸藥復(fù)方制劑，由十大功勞、苦參、木香3味藥物組成，有清熱解毒，燥濕止痢的功效，藥效學(xué)研究表明苦參功勞顆粒對人工感染大腸桿菌的小鼠具有治療作用[4]。為了考察苦參功勞顆粒對雞大腸桿菌病的臨床治療效果，筆者采用自然感染病例進(jìn)行臨床效果評價(jià)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 藥品

苦參功勞顆粒，批號：20171101，洛陽惠中獸藥有限公司，每1L水，雞1g，規(guī)格為每1g相當(dāng)于原生藥3g。

鹽酸多西環(huán)素可溶性粉，批號：2017030501，青島康地恩動物藥業(yè)有限公司，混飲，每1L水，雞3g。

1.2 培養(yǎng)基及主要試劑

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、革蘭氏染液，均購于青島海博生物技術(shù)有限公司。葡萄糖生化管、乳糖生化管、麥芽糖生化管、蔗糖生化管、甘露醇生化管、硫化氫生化管、葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水、枸櫞酸鹽生化管，購于杭州微生物試劑有限公司。靛基質(zhì)試劑、甲基紅（MR）試驗(yàn)試劑、VP試驗(yàn)用試劑甲/乙液，杭州微生物試劑有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)動物及試驗(yàn)地點(diǎn)

洛陽伊川縣白沙鎮(zhèn)肉雞，16，000只/棟，共兩棟，8日齡時免疫新流二聯(lián)滅活疫苗后發(fā)病，前期使用過恩諾沙星溶液、硫酸新霉素可溶性粉、雙黃連口服液。

2 試驗(yàn)方法

2.1 臨床癥狀與解剖學(xué)觀察

肉雞臨床癥狀表現(xiàn)為精神沉郁、腹瀉、采食量下降，死亡率為0.5%;剖檢主要癥狀為心包炎、肝周炎和氣囊炎，次癥為腎臟表現(xiàn)為花斑腎。因此，初步診斷為大腸桿菌病，腎臟損傷推測可能是由于使用較多藥物所導(dǎo)致。

2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查

無菌采集病雞心臟和肝臟于自封袋中標(biāo)記，采用無菌操作程序，用刀片灼燒心臟和肝臟表面，暴露干凈切面并涂麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板，進(jìn)行細(xì)菌鑒定，37℃恒溫培養(yǎng)24h。判定標(biāo)準(zhǔn)：麥康凱瓊脂平板上出現(xiàn)桃紅色菌落為大腸桿菌陽性。參考大腸埃希菌檢查方法進(jìn)行IMVIC試驗(yàn)，進(jìn)行確診。

2.3 藥物敏感試驗(yàn)

對于高死亡率肉雞場，采集組織進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。分別取心臟和肝臟，置于超凈工作臺中無菌平皿內(nèi)，用熱的刀片在肝臟和心臟表面灼燒，用無菌刀片切一面，鑷子夾住組織后用切面涂布營養(yǎng)瓊脂平皿，然后貼藥敏片，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。

2.4 動物的分組處理與給藥

2棟雞舍共分為2組，一棟按照1g/L劑量給予苦參功勞顆粒，另一棟按照3g/L劑量給予鹽酸多西環(huán)素可溶性粉，集中飲水，連用3d。

2.5 觀察指標(biāo)

1） 精神狀況觀察 觀察雞群精神狀況并記錄雞只給藥前后采食量。

2） 糞便狀況觀察 觀察雞只糞便，糞便觀察方法：選5個區(qū)域（每個區(qū)域約0.64m2）進(jìn)行糞便觀察，記錄糞便狀況（黃白色、黃綠色稀便）。糞便評分情況見表1。

3） 死亡率 給藥前和試驗(yàn)期間統(tǒng)計(jì)雞群的死亡率。死亡率=死亡動物數(shù)/試驗(yàn)雞只總數(shù)×100%

3 統(tǒng)計(jì)分析

死亡率用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析，各組之間顯著性用P值表示，其中P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

4 試驗(yàn)結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果

肉雞場剖檢癥狀為心包炎、肝周炎，見圖1。鑒別診斷在麥康凱瓊脂平板上生長的菌落為粉紅色，見圖2;IMVIC結(jié)果顯示，分離到的細(xì)菌可分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖、甘露醇，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，VP試驗(yàn)陰性，MR試驗(yàn)陽性，不利用枸櫞酸鹽，可初步確診為大腸桿菌。

4.2 肉雞場藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果

藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明粘菌素屬于高敏，多西環(huán)素屬于中敏，本試驗(yàn)中根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇多西環(huán)素作為陽性對照藥物。

4.3 苦參功勞顆粒對雞群糞便和采食量影響

肉雞5個區(qū)域糞便，給藥前每個區(qū)域中個別幾堆黃白色或黃綠色稀便，給藥3d后稀便恢復(fù)正常。肉雞采食量逐步上升，給藥結(jié)束時采食量基本恢復(fù)正常。

4.4 苦參功勞顆粒對肉雞死亡率的影響

苦參功勞顆粒對肉雞死亡率的影響見表2、圖3。

由表2可知，不同給藥組在給藥2d、給藥3d、給藥結(jié)束后1d分別與給藥前相比死亡率極顯著降低（P<0.01），同一時間點(diǎn)兩組相比，差異不顯著。

5 分析與討論

臨床上由于飼養(yǎng)管理不當(dāng)和疫苗免疫失敗，造成雞大腸桿菌病的暴發(fā)，以及抗菌藥物的不合理使用導(dǎo)致細(xì)菌耐藥菌株增加、治療失去效果，因此探索替代抗菌藥物治療雞大腸桿菌病的復(fù)方中藥，將為獸醫(yī)臨床找到有效替代抗菌藥物防治雞大腸桿菌病具有重要指導(dǎo)意義。由肉雞藥敏試驗(yàn)可知，目前大腸桿菌類疾病難以控制的根本原因?yàn)槠鋵λ幬镆呀?jīng)產(chǎn)生了耐藥性。宋海霞等[5]對河南致雞腹瀉病原的藥敏試驗(yàn)表明，病原菌對14種藥物耐藥性很嚴(yán)重，以耐10～13種藥居多，且有嚴(yán)重的交叉耐藥現(xiàn)象，因此迫切需要根據(jù)中獸藥對其進(jìn)行治療，苦參功勞顆粒對耐藥大腸桿菌所造成的雞只死亡，有極顯著的降低作用，且苦參功勞顆粒與多西環(huán)素可溶性粉藥物對照組相比，差異不顯著。

國家對食品安全的監(jiān)管越來越嚴(yán)格，肉雞出售前用于治療大腸桿菌病引起的腹瀉類的抗生素均不能使用，臨床上可用于治療的中獸藥并不多，本研究結(jié)果證明苦參功勞顆粒對肉雞的大腸桿菌病具有較好治療效果，為解決該類問題提供一種新的方案。腹瀉具有極強(qiáng)傳染性的疾病，索朗扎西、王亞芳、張耀東等[6-8]報(bào)道大腸桿菌多表現(xiàn)為熱證或以熱為主兼濕，或以濕為主兼熱，治則主要以清熱解毒為主?？鄥⒐陬w粒中含有木香，木香具有行氣止痛、健脾和胃，可用于治療脾胃氣滯等諸癥。晏磊等[9]把苦參功勞顆粒按0.1、0.2和0.4g/kg體重的劑量灌胃給藥，連續(xù)5d，治愈率分別為67.5%、77.5%和80.0%，體重增重率分別為56.91%、63.56%和61.36%。

本試驗(yàn)中黃色稀便是熱為主兼濕，因此治則以清熱解毒為主，本試驗(yàn)報(bào)告中苦參功勞顆粒主要功能為清熱解毒、兼具有行氣作用，因此符合癥狀，死亡率由0.49%降至0.01%，能極顯著的降低肉雞的死亡率，并且與多西環(huán)素藥物對照組效果相當(dāng);給藥結(jié)束時肉雞采食量恢復(fù)正常水平，雞的糞便恢復(fù)正常狀態(tài)。采食量、糞便、雞只死亡率是評價(jià)藥物效果重要指標(biāo)，因此從這三個方面進(jìn)行評價(jià)，苦參功勞顆粒對治療雞的大腸桿菌病有較好的治療作用。

6 小結(jié)

苦參功勞顆粒，1g/L，連用3d，對雞大腸桿菌病有較好的治療作用。

參考文獻(xiàn)：

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