王艷艷，許爍(.江蘇聯(lián)合職業(yè)技術(shù)學院連云港中醫(yī)藥分院，江蘇 連云港 007； .沈陽藥科大學藥學院，遼寧 沈陽 006)

0 引言

尼麥角林是一種具有強的腎上腺素作用的酯類麥角生物堿，廣泛應用于臨床，能有效促進腦梗塞后、神經(jīng)外科手術(shù)后神經(jīng)功能的恢復；治療由腦血管疾病引起的腦血管性癡呆、多發(fā)性腦梗死癡呆有較好的療效[1]。尼麥角林原型藥物本身的半衰期較短，患者需要多次服藥，因此將其制備成控制釋放12 h左右的滲透泵可以很好地緩慢恒速控制釋放藥物，一天服藥一次，使得臨床療效達約24 h，提高患者服藥的順應性。

1 儀器與試藥

UV-9100型紫外可見分光光度計(北京瑞利分析儀器公司)； TDP型單沖壓片機(上海第一制藥機械廠)；尼麥角林原料藥(北京嘉瑞時代科技有限公司，批號：20100321)；聚氧乙烯(美國陶氏化學公司)；聚乙二醇(上?；瘜W試劑采購供應站)；醋酸纖維素(上海醋酸纖維素廠)；甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 尼麥角林雙層滲透泵型控釋片的制備

含藥層：將藥物、混懸劑等輔料分別過80目篩，稱取處方量的各組分，以等量遞加法共同過60目篩混勻，加無水乙醇制軟材，以20目篩制粒，40 ℃下干燥6 h，以18目篩整粒，加入適量硬脂酸鎂，混勻，備用。

助推層：助推劑、滲透壓促進劑和氧化鐵紅分別過80目篩，稱取處方量的各組分，以等量遞加法共同過60目篩混勻，加無水乙醇制軟材，以20目篩制粒，40 ℃下干燥6 h，以18目篩整粒，加入硬脂酸鎂，混勻，備用。

包衣：將制好的片芯置于包衣鍋中，包衣，包衣后于40 ℃干燥24 h，在含藥層一側(cè)表面打孔即得。

2.2 尼麥角林滲透泵片Beagle犬體內(nèi)藥動學研究[2-4]

由于尼麥角林藥物進入到體內(nèi)后迅速被酶解為MMDL(1,6-二甲基-8β-羥甲基-10α-甲氧基-尼麥角林)，MDL(6-二甲基-8β-羥甲基-10α-甲氧基-尼麥角林)等活性代謝產(chǎn)物，血漿中無法檢測到原型藥物，因此本文以其活性代謝產(chǎn)物之一的MMDL為檢測指標。

2.2.1 溶液的配制

標準溶液：精密稱取MMDL對照品1.0 mg，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容、搖勻，配制成質(zhì)量濃度為10 mg·L-1的儲備液，至4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

內(nèi)標溶液：精密稱取非那西丁對照品2.0 mg，置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解、定容，配制成質(zhì)量濃度為20 mg·L-1的儲備液，至4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2.2 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)；預處理柱：YGW C18；

流動相：甲醇-30 mmol/L磷酸二氫鈉溶液=60∶40(v∶v)，0.2 mol·L-1磷酸調(diào)節(jié)pH至4.0；

檢測波長：228 nm；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL·min-1；進樣量：20 μL。

2.2.3 血漿樣品處理

精密吸取200 μL血漿加入到10 mL具塞尖底玻璃離心試管中，加入50 μL內(nèi)標溶液，加入乙腈150 μL，渦旋3 min， 8 000 r·min-1離心15 min，取上清液進樣。進樣量20 μL，記錄色譜圖及峰面積，根據(jù)標準曲線方程計算Beagle犬體內(nèi)MMDL血藥濃度。

2.2.4 線性試驗及方法學驗證

精密量取空白狗血漿100 μL分別置于10 mL的具塞離心管中，精密加入MMDL標準溶液50 μL，再加入內(nèi)標溶液50 μL(20 μg·L-1)，按血樣處理方法項下操作，記錄色譜圖和峰面積。以MMDL血藥濃度C為橫坐標，藥物和內(nèi)標峰面積的比值A(AMMDL/A內(nèi)標)為縱坐標，進行線性回歸，標準曲線方程為：

根據(jù)標準曲線，MMDL的線性范圍為1.0～100.0 μg·L-1，線性關(guān)系良好。本法精密度和回收率均符合要求。其中，低、中、高三種濃度血漿樣品的日內(nèi)RSD分別為11.68%、5.15%、7.81%；日間精密度分別為14.22%、6.82%、6.65%。低、中、高三種血漿濃度回收率分別為81.47%、81.23%、78.69%，RSD分別為7.1%、6.6%、6.0%.

2.2.5 給藥方案和樣品采集

6條健康Beagle犬隨機分成2組，每組3條。實驗前一天禁食12 h，給藥2 h后統(tǒng)一進水，4 h后統(tǒng)一進食。自身對照，隨機交叉口服同等劑量(30 mg)自制尼麥角林雙層滲透泵控釋片或市售尼麥角林普通片，給藥間隔為一周。給藥后普通片分 別 于0.25、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、24 h共14個時間點取前肢靜脈血3～4 mL，控釋片分別于1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、24、36 h共13個 時 間點取前肢靜脈血約4 mL，并立即移入涂有肝素的試管中，于 1 200×g離心10 min，分離血漿，于-20 ℃冰箱保存，待分析。一周后交叉。

2.2.6 樣品血藥濃度-時間曲線的繪制

將6條Beagle犬口服自制控釋片(Test)和市售普通片劑(Reference)的經(jīng)時血藥濃度平均值進行擬合，得兩條藥-時曲線(如圖1所示)。

圖1 Beagle犬口服兩種尼麥角林制劑后MMDL藥-時曲線 (n=6, Mean±S.D.)

2.2.7 藥動學參數(shù)計算

采用DAS2.0軟件，以非房室模型法分別處理尼麥角林普通片和尼麥角林雙層滲透泵片的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)，求算藥動學參數(shù)。血藥達峰時間tmax和峰濃度Cmax均為實測值，AUC0-t，AUC0-∞等由軟件計算給出。各主要藥動學參數(shù)如表1所示。由表可知，受試制劑的Cmax明顯降低，tmax明顯延長，達到預期目的。

表1 主要藥動學參數(shù) (n= 6)

分別對受試片與參比片的藥-時曲線下面積AUC0-t、Cmax進行對數(shù)轉(zhuǎn)換，然后對ln(AUC)和ln(Cmax)進行三因素方差分析(周期間、制劑間和個體間)。根據(jù)tmax的分布特定，采用非參數(shù)檢驗法和秩和檢驗進行統(tǒng)計分析，結(jié)果表明，受試制劑與參比制劑相比 Cmax和tmax存在顯著性差異，說明自制滲透泵片與市售片相比Cmax降低，具有良好的控釋效果。

由 雙單側(cè)t檢驗結(jié)果 顯示AUC0-t的tL＞t(1-0.05)、tH＞t(1-0.05)同時成立，受試制劑的AUC0-t的90%可信限落在參比制劑88.2%～102.6%范圍內(nèi)，說明受試制劑與參比制劑生物等效。

3 結(jié)語

文章以尼麥角林為模型藥物，制備了具有良好零級釋放特征的雙層滲透泵型控釋片，并進行了體內(nèi)藥物代謝動力學的研究。Beagle 犬體內(nèi)藥物代謝動力學研究表明，與參比試劑藥動參數(shù)相比，尼麥角林雙層滲透泵控釋片的Cmax降低，tmax延長，具有良好的控釋效果。體內(nèi)外相關(guān)性研究表明，自制滲透泵片具有良好的體內(nèi)外相關(guān)性。