劉芳，魏彪，殷霈瑤，劉影，金虎

(黑龍江省林業(yè)科學(xué)院牡丹江分院，黑龍江 牡丹江 157010)

北蟲(chóng)草(Cordycepsmilitaris)又名北冬蟲(chóng)夏草、與冬蟲(chóng)夏草同屬異種，藥理作用與冬蟲(chóng)夏草類(lèi)似[1]。北蟲(chóng)草中含蛋白質(zhì)、氨基酸、蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草多糖等多種有效成分，藥用價(jià)值很高，是一種藥食兩用真菌[2-6]。蛋白質(zhì)作為北蟲(chóng)草中重要的營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)，對(duì)評(píng)價(jià)其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值具有重要意義。為此，對(duì)不同培養(yǎng)下北蟲(chóng)草干重及蛋白質(zhì)含量進(jìn)行對(duì)比分析，找出最適宜北蟲(chóng)草的人工栽培條件。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌種。試驗(yàn)用菌種由黑龍江省林業(yè)科學(xué)院牡丹江分院提供。

1.1.2 培養(yǎng)基。大米，營(yíng)養(yǎng)液。(營(yíng)養(yǎng)液配方為葡萄糖20 g/L，酵母粉10 g/L，磷酸二氫鉀2 g/L，硫酸鎂2 g/L，維生素B110 mg，加水定容至1 L。)

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基制備。將大米和配制好的營(yíng)養(yǎng)液灌裝到580 mL組培玻璃瓶中，放入121 ℃高壓滅菌鍋中，滅菌30 min，出鍋泠卻后接種并用聚丙烯薄膜封口。經(jīng)過(guò)暗培養(yǎng)、菌絲生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)色、子座生長(zhǎng)幾個(gè)階段后，待子實(shí)體成熟即可采收，采收后將北蟲(chóng)草子實(shí)體置于40 ℃干燥箱內(nèi)烘干至恒重，取出稱(chēng)取每瓶子實(shí)體干重。

1.2.2 蛋白質(zhì)測(cè)定。按照GB 5009.5-2010食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定方法測(cè)定北蟲(chóng)草中蛋白質(zhì)含量，按要求進(jìn)行試樣處理，用凱氏定氮法測(cè)定其蛋白質(zhì)含量。每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)3次，試驗(yàn)結(jié)果取平均值。

1.2.3 試驗(yàn)方案。選取影響試驗(yàn)結(jié)果的四個(gè)關(guān)鍵因素，分別為基質(zhì)用量，基質(zhì)料液比，接種量和培養(yǎng)基pH值。以北蟲(chóng)草子實(shí)體干重、蛋白質(zhì)含量為指標(biāo)，用L9(34)進(jìn)行正交試驗(yàn)。各因素水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)因素及水平表

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)條件對(duì)北蟲(chóng)草干重的影響

北蟲(chóng)草需要在適宜的pH值范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)。培養(yǎng)基內(nèi)含水量高低直接影響北蟲(chóng)草菌絲發(fā)育，只有基質(zhì)用量和基質(zhì)料液比配比準(zhǔn)確，經(jīng)高壓滅菌后培養(yǎng)基內(nèi)含水量才能促進(jìn)北蟲(chóng)草菌絲萌發(fā)[7-8]。接種量的多少關(guān)系到北蟲(chóng)草的子座密度，從而影響其產(chǎn)量。

由表2可見(jiàn)，以北蟲(chóng)草子座干重為指標(biāo)的正交試驗(yàn)最佳培養(yǎng)條件為A2B1C2D3，即當(dāng)基質(zhì)用量為40 g，基質(zhì)料液比為1∶1.4，接種量為3.2 mL，培養(yǎng)基pH值為7時(shí)，北蟲(chóng)草干重為5.85 g。由極差分析可以看出，培養(yǎng)條件對(duì)北蟲(chóng)草子座干重的影響顯著順序依次為D>A>B>C，即培養(yǎng)基pH值>基質(zhì)用量>基質(zhì)料液比>接種量。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析表

2.2 不同培養(yǎng)條件對(duì)北蟲(chóng)草蛋白質(zhì)含量的影響

由表3可見(jiàn)，以北蟲(chóng)草蛋白質(zhì)含量為指標(biāo)的正交試驗(yàn)最佳培養(yǎng)條件為A2B2C3D1，即當(dāng)基質(zhì)用量為40 g，基質(zhì)料液比為1∶1.5，接種量為4.8 mL，培養(yǎng)基pH值為6時(shí)，北蟲(chóng)草蛋白質(zhì)含量為21.86 g/100 g。由極差分析可以看出，培養(yǎng)條件對(duì)北蟲(chóng)草子座干重的影響顯著順序依次為A>C>D>B，即基質(zhì)用量>接種量>培養(yǎng)基pH值>基質(zhì)料液比。

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果分析表

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同培養(yǎng)條件對(duì)北蟲(chóng)草的干重和蛋白質(zhì)含量影響不同。只有各培養(yǎng)條件均達(dá)到適宜水平，才能促進(jìn)北蟲(chóng)草的生長(zhǎng)發(fā)育。當(dāng)基質(zhì)用量為40 g，基質(zhì)料液比為1∶1.4，接種量為3.2 mL，培養(yǎng)基pH值為7時(shí)，北蟲(chóng)草子座干重最大，為5.85 g；基質(zhì)用量為40 g，基質(zhì)料液比為1∶1.5，接種量為4.8 mL，培養(yǎng)基pH值6時(shí)，北蟲(chóng)草中蛋白質(zhì)含量最高，為21.86 g/100 g。