韋 志,阮心眉,戴濤濤,付 敏,袁建成,李 俶, ,陳 軍
(1.南昌大學(xué), 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西南昌330047;2.廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 廣西果蔬貯藏與加工新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西南寧530007)
砂仁(Amomum villosum,A.villosum)是姜科(Zingiberaceae)豆蔻屬的植物果實(shí),與益智仁、檳榔、巴戟天并稱為我國“四大南藥”,同時(shí)也是《中華人民共和國藥典》(2015年版)收錄的重要品種[1]。砂仁味道豐富,有酸甜苦辣咸味,砂仁的花、果、根、莖、葉部位均可入藥。它具有“化濕開胃、理氣止痛、溫脾止瀉、行氣安胎”等功效[2]。研究結(jié)果表明砂仁中的揮發(fā)油成分具有顯著的抗?jié)?、促進(jìn)腸胃蠕動(dòng)、胃排空和鎮(zhèn)痛等作用[3]。砂仁中含有較高含量的多酚、多糖等多種生物活性成分,具有明顯的抗炎、抗氧化、抗腫瘤、鎮(zhèn)痛等作用[4-6]。
多糖一般是指由十種或更多單糖通過糖苷鍵鏈接而成的聚合物。植物多糖是一種天然大分子,在其生命活動(dòng)中發(fā)揮重要作用[7]。近年來,多糖因無毒、可生物降解、生物相容性好,而且與合成聚合物相比價(jià)格更低等優(yōu)點(diǎn)備受關(guān)注。所有這些優(yōu)點(diǎn)賦予了多糖及其衍生物在不同領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,如食品、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域[8]。
目前,溶劑法提取多糖主要包括熱水浸提、酸浸提、堿浸提、螯合劑浸提(草酸銨、EDTA等),不同溶劑提取的多糖具有不同的結(jié)構(gòu)及生物活性[9],這可能是因?yàn)橹参镏卸嗵峭c其他成分結(jié)合共存,以及多糖在不同溶劑條件下的存在形式不同導(dǎo)致(如構(gòu)象等)。熱水浸提法只能提取一些水溶性的長鏈多糖分子,酸法是工業(yè)上提取果膠的常用技術(shù),堿法則是通過釋放與多酚或其它小分子結(jié)合的多糖,螯合劑的作用機(jī)理則是與鈣離子結(jié)合降低多糖大分子之間的交聯(lián)。有文獻(xiàn)報(bào)道,堿法提取的多糖在抗氧化性上優(yōu)于傳統(tǒng)的水提多糖[10]。
為了獲得更好的生物活性的多糖,本實(shí)驗(yàn)采用堿浸提法提取砂仁多糖,探究堿性提取條件下砂仁多糖的結(jié)構(gòu)特性和抗氧化性,旨在為砂仁多糖的應(yīng)用提供理論依據(jù),對砂仁資源的開發(fā)利用提供參考。
海南砂仁 湛江中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所;咔唑、單糖組成標(biāo)準(zhǔn)品、3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮(PMP)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、半乳糖醛酸 美國Sigma公司;考馬斯亮藍(lán)G-250 北京索萊寶科技有限公司;牛血清白蛋白 阿拉丁試劑(上海)有限公司;葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 西隴科學(xué)股份有限公司;所有試劑 均為分析純。
TGL-20B高速離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;HR-10中藥粉碎機(jī) 浙江哈瑞工貿(mào)有限公司;RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;AlpHa1-2LD冷凍干燥機(jī) 德國Christ公司;TU-1810紫外分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;Agilent 1260高效液相色譜儀(配Brookhaven BIDNDC示差檢測器)、Agilent 1260型液相色譜儀(配DAD檢測器) 美國Agilent公司;Nicolet 5700傅里葉紅外光譜儀 美國熱電公司;TGA 4000熱重分析儀 美國PE公司;JSM-6701F冷場發(fā)射掃描電鏡 日本電子株式會(huì)社;D8 Advance X射線衍射儀德國Bruker公司;Gen 5通用型酶標(biāo)儀 美國Bio Tek公司。
1.2.1 砂仁多糖樣品制備 根據(jù)Gao等[11]方法稍作修改提取砂仁多糖。采用中藥粉碎機(jī)將干燥后(含水量小于5%)砂仁粉碎,過60目標(biāo)準(zhǔn)篩。80%乙醇浸泡砂仁粉末過夜,除去脂溶性雜質(zhì)。揮發(fā)蒸干乙醇后,加入3000 mL的0.1 mol/L NaOH(含0.01 mol/L NaBH4),在室溫條件下提取多糖2 h。粗提液經(jīng)離心(4800 r/min,15 min)得上清液,然后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在60 °C條件下,濃縮上清液至原上清液的1/4后,加入95%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)到80%。樣品經(jīng)醇沉過夜后離心取沉淀,加水復(fù)溶。以Sevag法去除蛋白,即氯仿-正丁醇(4:1,v/v)溶液與砂仁多糖水溶液振搖混合(1:4,v/v),重復(fù)四次,使蛋白質(zhì)變性析出,離心去除變性蛋白。蒸餾水透析(8~14 kDa)3 d。然后旋蒸,濃縮,經(jīng)真空冷凍干燥獲得砂仁多糖。
1.2.2 砂仁多糖的化學(xué)組成測定
1.2.2.1 總糖含量測定 采用苯酚-硫酸法[12]測定砂仁多糖的總糖含量。取1.0 mL不同濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液或0.1 mg/mL的多糖溶液或蒸餾水(空白),與1.0 mL的5%的苯酚溶液混合均勻,加入4.0 mL濃硫酸搖勻混合,靜置30 min,于490 nm處測定吸光度值。以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算砂仁多糖的總糖含量(μg/mL)。
1.2.2.2 糖醛酸含量測定 采用硫酸-咔唑法[13]測定多糖中的糖醛酸含量。取1.0 mL的不同濃度的半乳糖醛酸溶液或1 mg/mL的多糖溶液或蒸餾水(空白),在冰水浴條件下加入6.0 mL濃硫酸混合均勻,放入85 ℃水浴中恒溫保持20 min,取出冷卻至室溫后,分別向各管中加入0.2 mL的0.1%咔唑-乙醇溶液,在室溫下放置2 h,于530 nm處測定吸光度值。以半乳糖醛酸溶液的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算砂仁多糖的糖醛酸含量(μg/mL)。
1.2.2.3 蛋白質(zhì)含量測定 采用考馬斯亮藍(lán)法[14]測定蛋白質(zhì)含量。取1.0 mL的不同濃度的牛血清白蛋白溶液或0.1 mg/mL的多糖溶液或蒸餾水(空白)加入5.0 mL的考馬斯亮藍(lán)溶液混勻,靜置5 min。于595 nm處測定吸光度值。以牛血清白蛋白的溶液濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪制牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算砂仁多糖的蛋白質(zhì)含量(μg/mL)。
1.2.3 多糖的單糖組成測定 參考Hu等[15]的方法,稱取2.0 mg凍干的多糖樣品,加入2 mol/L三氟乙酸溶液0.5 mL,在120 °C條件下水解120 min后用氮吹儀吹干。向干燥后的樣品中加入溶于無水甲醇的0.5 mol/L的PMP試劑和0.3 mol/L的NaOH溶液各0.5 mL,充分混勻后置于70 °C水浴反應(yīng)30 min。冷卻至室溫后,加入0.5 mL 0.3 mol/L HCl,混和均勻。加入1.0 mL氯仿,充分振蕩萃取,4800 r/min離心15 min,去除氯仿層,共萃取三次。合并濾液,取水相層,過0.22 μm濾膜后,采用高效液相色譜檢測。單糖標(biāo)準(zhǔn)品無需水解步驟,其他步驟同樣品處理。檢測配置與條件:Agilent 1260型液相色譜儀(配DAD 檢測器)、Thermo ODS-2 C18柱(4.6×250 mm,5 μm)。流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L,pH7.0)與乙腈的混合液(體積比82:18),流速1.0 mL/min,柱溫25 ℃,進(jìn)樣量10 μL,檢測波長245 nm。
1.2.4 多糖的相對分子量測定 采用高效尺寸排阻色譜法對得到的多糖進(jìn)行分子量測定[16]。采用Agilent 1260型液相色譜儀(配 Brookhaven BIDNDC示差檢測器),Agilent PL aquagel-OH系列凝膠過濾色譜柱(7.5×300 mm,8 μm)。流動(dòng)相為超純水(含 0.02% NaN3),流速為 0.5 mL/min,柱溫 30 °C,進(jìn)樣量100 μL。配制1.0 mg/mL多糖溶液或1.0 mg/mL不同分子量(Mw:5、25、50、150、410、670 kDa)的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液,過0.45 μm水相濾膜后,進(jìn)樣檢測。以葡聚糖分子量標(biāo)準(zhǔn)品的對數(shù)值(lgMw)為縱坐標(biāo),保留時(shí)間(min)為橫坐標(biāo),繪制曲線。以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算砂仁多糖的相對分子量(kDa)。
1.2.5 紅外光譜分析(FTIR) 采用傅里葉變換紅外光譜對多糖的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析[17]。取樣品約1.0 mg,置于干燥的瑪瑙研缽中,在紅外燈照射下加入KBr約140 mg,研磨均勻后壓片。用傅立葉紅外光譜儀在400~4000 cm-1區(qū)內(nèi)進(jìn)行掃描,初步分析多糖的官能團(tuán)。
1.2.6 掃描電鏡(SEM)多糖的掃描電鏡分析 取少量的干燥砂仁多糖樣品粘著于樣品臺(tái)上,鍍導(dǎo)電金,采用冷場發(fā)射掃描電鏡在250倍和2000倍下進(jìn)行觀察[18]。
1.2.7 熱重分析(TGA)多糖的熱重分析 采用熱重分析儀對砂仁多糖的熱特性進(jìn)行研究[19],樣品稱取5.0 mg,測試溫度范圍 30~600 °C,以 10 °C/min 的速率升溫,在固定速率通氮?dú)猸h(huán)境下測定多糖的受熱質(zhì)量變化情況。
1.2.8 X衍射分析(XRD) 采用X衍射儀對多糖的晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析[20]。測定范圍為 5°~50°(2θ),步長 0.02°,計(jì)數(shù)時(shí)間 1 s/步。
1.2.9 多糖的抗氧化性指標(biāo)測定
1.2.9.1 DPPH自由基清除能力 參考Gomez-Mejia等[21]方法,將1.0 mL不同濃度多糖溶液(0~2 mg/mL)或抗壞血酸溶液(陽性對照)或乙醇溶液(空白)與1.0 mL 0.2 mmol DPPH(50%乙醇溶解)搖勻,避光孵育30 min后于517 nm處測量吸光值,實(shí)驗(yàn)均平行測定3次,以DPPH自由基清除率表示DPPH自由基清除能力,計(jì)算公式如下:
式中:中Ao為空白吸光度;Ai為樣品或陽性對照吸光度。
1.2.9.2 ABTS+自由基清除能力 參考Deseo等[22]的方法,將 5.0 mL ABTS儲(chǔ)備溶液(7 mmol/L)與5.0 mL K2S2O7溶液(2.45 mmol/L)混合后避光置于4 °C冰箱內(nèi)反應(yīng)12~16 h制備得ABTS溶液。反應(yīng)前將ABTS溶液用磷酸緩沖液(0.1 mol/L,pH7.4)稀釋至 734 nm處吸光度為 0.7±0.02,即 ABTS工作液。取40 μL多糖溶液或抗壞血酸溶液(陽性對照)或乙醇溶液(空白)于96孔板中,加入970 μL ABTS工作液混勻,避光反應(yīng)6 min后用酶標(biāo)儀測定734 nm下吸光度,以ABTS+自由基清除率表示ABTS+自由基清除能力,計(jì)算公式如下:
式中:中Ao為空白吸光度;Ai為樣品或陽性對照吸光度。
1.2.9.3 羥基自由基清除能力 參考Wang等[23]的方法,取1.0 mL不同濃度的多糖溶液或抗壞血酸溶液(陽性對照)或乙醇溶液(空白)置于10 mL試管中,加入1.0 mL FeSO4溶液和1.0 mL水楊酸-乙醇溶液,混勻,加入1.0 mL H2O2溶液,充分混勻,放入37 °C水浴 30 min后,立即在510 nm處測定吸光值,平行三次,以羥基自由基清除率為表示羥基自由基清除能力,計(jì)算公式如下:
式中:中Ao為空白吸光度;A1為樣品或陽性對照吸光度;A2為樣品不加H2O2溶液的吸光度。
本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均重復(fù)測定三次。采用Excel2019和SPSS25.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差。使用Origin 2020軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行作圖。
本實(shí)驗(yàn)在堿性條件下,提取砂仁多糖,經(jīng)脫蛋白處理后,測定其總糖含量、糖醛酸含量和蛋白質(zhì)含量,標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1。測定結(jié)果表明砂仁多糖的提取得率為3.97%±0.31%,總糖含量為 37.10%±1.43%,糖醛酸含量達(dá)到65.66%±2.02%,說明砂仁多糖是一種酸性多糖;蛋白質(zhì)的含量為4.36%±0.71%,表明殘留的蛋白可能是蛋白質(zhì)溶于堿性溶液中,并與單糖結(jié)合,形成難以去除的蛋白質(zhì)[24]。
圖1 砂仁多糖的化學(xué)組成含量測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve for determination of chemical composition of A.villosum polysaccharide
如圖2液相色譜分析表明,砂仁多糖是一種雜多糖,含甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖。其相對摩爾百分比分別為 0.74%、0.71%、8.13%、13.41%、5.31%、14.84%、18.84%、38.02%。其中阿拉伯糖、木糖、半乳糖和半乳糖醛酸構(gòu)成砂仁多糖的主要單糖成分。該結(jié)果與樊亞鳴等[25]研究的春砂仁多糖組成結(jié)果相似,均含有阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其他組分的不同可能是因?yàn)樯叭实漠a(chǎn)地和品種的不同。
圖2 砂仁多糖的單糖組成與單糖標(biāo)準(zhǔn)品Fig.2 GC chromatogram of the monosaccharide standards and monosaccharide composition of A.villosum
如圖3所示,依據(jù)多糖分子量大小Mw的對數(shù)值與保留時(shí)間成線性關(guān)系,繪制不同分子量的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線:lgMw=-0.6746t+14.35(其中t表示保留時(shí)間),R2=0.9985。依據(jù)響應(yīng)值最大時(shí)的保留時(shí)間,由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出砂仁多糖的相對分子量為95.46 kDa。
圖3 砂仁多糖的相對分子量圖Fig.3 Relative molecular weight curves of A.villosum polysaccharide
根據(jù)紅外光譜吸收峰的位置和強(qiáng)度可判斷多糖的基礎(chǔ)官能團(tuán)。一般來說,多糖的主要特征吸收峰位于 3100~3700 cm-1和 2800~3000 cm-1,前者被認(rèn)為是分子間氫鍵和分子內(nèi)氫鍵引起的O-H伸縮振動(dòng),后者歸因于游離碳水化合物的C-H不對稱伸縮振動(dòng)[15]。如圖4所示,在1615~1653 cm-1附近的強(qiáng)吸收峰,表明存在羰基的C=O不對稱伸縮振動(dòng)[23],而在1411~1423 cm-1附近的弱吸收峰則反映了羰基的C-O伸縮振動(dòng),表明多糖中含有糖醛酸[12],與砂仁多糖的化學(xué)組成結(jié)果一致。1075~1100 cm-1處的吸收峰,表明主鏈中存在吡喃糖環(huán)[26]。紅外光譜表明砂仁多糖具備碳水化合物典型吸收峰,且存在吡喃糖環(huán)結(jié)構(gòu)。
圖4 砂仁多糖的紅外光譜圖Fig.4 FTIR spectra of A.villosum polysaccharide
SEM圖像提供了砂仁多糖的表面形貌特征。SEM結(jié)果表明(圖5),砂仁多糖的表觀形貌為片狀結(jié)構(gòu)。放大250倍可以看到,多糖形狀不規(guī)則,大多為片狀結(jié)構(gòu),有少量塊狀存在,碎片形狀并不均一。該結(jié)果與Zhou等[27]研究結(jié)果一致,其觀察到從陽春砂仁中提取的酸性多糖在SEM中呈現(xiàn)片狀的疏松結(jié)構(gòu)。放大2000倍下觀察可見多糖表面粗糙,邊緣不規(guī)則,這可能是凍干時(shí)冰升華。Zhu等[28]研究也發(fā)現(xiàn),在高倍放大倍數(shù)下,多糖表面呈現(xiàn)不均勻的鱗片結(jié)構(gòu)和少量的凹陷。
圖5 砂仁多糖的掃描電鏡圖Fig.5 SEM images of A.villosum polysaccharide
由圖6熱重分析曲線可以看出,砂仁多糖在高溫過程中三次主要失重,可大概劃分為40~150 °C、151~400 °C、401~600 °C 三個(gè)階段。第一階段可能為結(jié)晶水的散失[29],失重率約為4.21%;第二階段可能為碳水化合物長鏈的降解和碎片的解聚,失重率約為30.55%[30],第三階段質(zhì)量損失減緩,可能是多糖的在進(jìn)一步分解,剩下的多糖的熱穩(wěn)定性較好或者多數(shù)多糖已經(jīng)碳化,從而導(dǎo)致失重緩慢[31]。在600 °C時(shí)剩余質(zhì)量百分比為20.06%。不同來源的植物多糖往往具有相似的熱重分析曲線,但其熱降解溫度和質(zhì)量損失率可能存在差異。張華峰等[31]研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)溫度從248 °C升至350 °C時(shí),滇黃精多糖的失重率約為58.59%,并將該現(xiàn)象其歸因于多糖分子劇烈的解聚和分解作用。王占一等[32]研究發(fā)現(xiàn)石榴皮多糖在溫度 225.4~327.9 °C內(nèi)質(zhì)量損失率為 46.5%,而以石榴皮多糖與亞硒酸鈉為原料制備石榴皮多糖硒酸酯,其在600 °C前已經(jīng)基本分解完全。由此可知,砂仁多糖具有較好的熱穩(wěn)定性。
圖6 砂仁多糖的熱重分析曲線Fig.6 TGA of A.villosum polysaccharide
采用X衍射對砂仁多糖的晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。一般來說,衍射峰的尖窄可以反映晶體結(jié)構(gòu),衍射寬峰反映的是非晶結(jié)構(gòu),非晶區(qū)域的分子間鍵弱于晶體區(qū)域的分子間鍵[33]。如圖7所示,XRD結(jié)果表明砂仁多糖在15°~30°之間,有一個(gè)峰寬較寬、強(qiáng)度較大的峰。因此,砂仁多糖的結(jié)晶度較低,屬于低結(jié)晶度材料[34]。此外,半結(jié)晶區(qū)在20.75°。該結(jié)果與Zhu等[28]研究水提醇沉法提取海南砂仁多糖的X衍射的分析結(jié)果一致,均是半結(jié)晶結(jié)構(gòu)。
圖7 砂仁多糖的X-衍射圖Fig.7 XRD of A.villosum polysaccharide
2.8.1 DPPH自由基清除能力的測定 如圖8a所示,砂仁多糖的DPPH自由基清除率在0~2.0 mg/mL范圍內(nèi),表現(xiàn)出濃度依賴性,即隨著多糖濃度的升高,其DPPH自由基清除率逐漸升高。在濃度為2.0 mg/mL時(shí),砂仁多糖的自由基清除能力接近抗壞血酸,自由基清除率達(dá)到96.13%。而Zhang等[35]研究發(fā)現(xiàn)砂仁粗多糖在5.0 mg/mL濃度下,DPPH自由基清除能力為73.5%。本研究的砂仁多糖對DPPH自由基半數(shù)抑制對應(yīng)的濃度(IC50)為0.81 mg/mL,顯示出較好的抗氧化性。
2.8.2 ABTS+自由基清除能力的測定 如圖8b所示,砂仁多糖的ABTS+自由基清除率在在0~2.0 mg/mL范圍內(nèi),表現(xiàn)出濃度依賴性,即隨著多糖濃度的升高,其ABTS+自由基清除率逐漸升高。砂仁多糖對ABTS+自由基半數(shù)抑制對應(yīng)的濃度(IC50)為0.65 mg/mL??箟难嵩?.25 mg/mL時(shí),達(dá)到最大抑制能力,但是在1.0 mg/mL時(shí),砂仁多糖的自由基清除率達(dá)到了80.95%,清除率較高。相比于其他多糖,如仙人掌皮多糖[36](在10mg/mL時(shí),對ABTS+自由基清除率為39.85%),砂仁多糖具有更強(qiáng)的ABTS+自由基清除能力。
圖8 砂仁多糖的體外抗氧化性Fig.8 In vitro antioxidant activities of A.villosum polysaccharide
2.8.3 羥基自由基清除能力的測定 如圖8c所示,隨著砂仁多糖濃度的增加,其羥基自由基的清除率增大。在0.5 mg/mL時(shí),抗壞血酸的羥基自由基清除率達(dá)到97.65%。同時(shí),砂仁多糖的羥基自由基清除率隨著濃度的增大而增大,在2.0 mg/mL時(shí),砂仁多糖的羥基自由基清除率達(dá)到67.22%,對羥基自由基半數(shù)抑制對應(yīng)的濃度(IC50)為1.20 mg/mL。Zhang等[35]研究發(fā)現(xiàn)在5.0 mg/mL濃度下,陽春砂仁粗多糖的羥基自由基清除能力為66.3%,兩者的羥基自由基清除能力相近。綜上,砂仁多糖具有較好的抗氧化能力。
本研究選用海南砂仁為原料,采用堿液浸提法提取多糖,對所得砂仁多糖進(jìn)行理化性質(zhì)、表觀形貌、晶型和熱重分析,并評(píng)價(jià)其體外抗氧化活性,以期為砂仁多糖發(fā)展奠定良好基礎(chǔ)。主要結(jié)論如下:砂仁多糖的提取得率為3.97%,總糖含量為37.10%,糖醛酸含量為65.66%,蛋白質(zhì)的殘留含量為4.36%。砂仁多糖的主要單糖組成為阿拉伯糖、木糖、半乳糖和半乳糖醛酸,其摩爾百分比分別為38.02%、18.84%、14.84%和13.41%,且分子量為95.46 kDa;砂仁多糖是一種低結(jié)晶度、具有吡喃環(huán)、熱穩(wěn)定較好的片狀酸性雜多糖,具備多糖普遍的表觀形貌特征;砂仁多糖的三種體外抗氧化模型研究表明,砂仁多糖對DPPH自由基、ABTS自由基和羥基自由基的半數(shù)抑制對應(yīng)的濃度(IC50)分別為 0.81、0.65和 1.20 mg/mL,具有較好的抗氧化能力。該研究證實(shí)砂仁多糖的抗氧化能力強(qiáng),可作為天然抗氧化劑,值得更深入的研究其抗氧化機(jī)制,該研究結(jié)果可為砂仁多糖的開發(fā)和利用提供理論應(yīng)用基礎(chǔ)。