■徐田田 王 婧，2 許 丹 劉興旺 李國(guó)立 王國(guó)霞

（1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306；2.鹽城市劉莊鎮(zhèn)人民政府，江蘇鹽城 224111；3.上海牧漁科技有限公司，上海 201306；4.廣州飛禧特生物科技有限公司，廣東廣州 510640；5.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，廣東廣州 510640）

凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）俗稱南美白對(duì)蝦，具有個(gè)體大、生長(zhǎng)快、營(yíng)養(yǎng)需求低、抗病力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是一種優(yōu)良的養(yǎng)殖品種[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)南美白對(duì)蝦年產(chǎn)量已超過100萬噸，成為我國(guó)最重要的甲殼類養(yǎng)殖動(dòng)物[2]。隨著對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，對(duì)蝦飼料需求量也逐年增加。其中，魚粉因其營(yíng)養(yǎng)全面、適口性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)被廣泛使用[3]。但隨著全球漁業(yè)資源的匱乏和魚粉需求量不斷增大，魚粉價(jià)格不斷上漲，供需矛盾日漸突出。因此，開發(fā)可再生的替代蛋白源是影響對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)盈利的關(guān)鍵因素[4]。

在各種替代蛋白源中，植物蛋白因其來源廣泛、產(chǎn)量大、可再生等優(yōu)勢(shì)成為研究的熱點(diǎn)[5]。其中，使用量較大的是豆粕。前人研究發(fā)現(xiàn)飼料中使用56%的豆粕對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)及飼料轉(zhuǎn)化沒有產(chǎn)生顯著影響[6]。此外，針對(duì)花生餅、菜粕、玉米蛋白粉等在凡納濱對(duì)蝦飼料中的應(yīng)用也有一些相關(guān)研究[7-8]。這些研究均發(fā)現(xiàn)，單一植物蛋白替代魚粉可能因原料中的氨基酸不平衡，抗?fàn)I養(yǎng)因子難以去除以及霉菌毒素普遍存在等因素造成替代水平受限。因此，探討使用不同植物蛋白源組合，提高其在對(duì)蝦配合飼料中的利用率可能是提高植物蛋白在水產(chǎn)動(dòng)物中使用量的有效手段[3]。本實(shí)驗(yàn)以目前對(duì)蝦飼料中常用的植物蛋白源豆粕、花生餅、玉米蛋白粉和菜籽粕相互復(fù)合搭配（4∶3∶1∶1）替代不同梯度的魚粉，配制成等氮等能的飼料。旨在研究飼料中復(fù)合植物蛋白替代魚粉的水平對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)及體組成的影響，以期為對(duì)蝦配合飼料開發(fā)提供更多數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)飼料

本實(shí)驗(yàn)以豆粕、花生餅、玉米蛋白粉和菜粕按照4∶3∶1∶1比例組成復(fù)合植物蛋白源，分別替代飼料中0、14%、28%、42%、56%和70%的魚粉，使飼料中魚粉含量分別為53%、46%、38%、31%、23%和16%。同時(shí)以魚油及磷脂油為脂肪源，烏賊膏、蝦殼粉和啤酒酵母作為誘食劑，高筋面粉為糖源，配制成6種等氮等能的飼料。飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表1，其氨基酸組成見表2。所有飼料原料經(jīng)粉碎后過80目篩，使用V型混合機(jī)混合均勻后用擠壓機(jī)（華南理工大學(xué)生產(chǎn)SLX-80型）制成粒徑為1.0 mm的顆粒，在60℃烘箱中烘干后置于-20℃冰箱備用。

表1 實(shí)驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平（%干物質(zhì)）

表2 實(shí)驗(yàn)飼料氨基酸組成(%干物質(zhì))

1.2 養(yǎng)殖管理

所用凡納濱對(duì)蝦來自廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司“國(guó)家863”實(shí)驗(yàn)基地，為當(dāng)年人工孵化的同一批蝦苗，挑選體質(zhì)健康且規(guī)格整齊的凡納濱對(duì)蝦。先在流水系統(tǒng)中暫養(yǎng)10 d，然后隨機(jī)分配到室內(nèi)海水流水系統(tǒng)中的18個(gè)300 L的玻璃鋼桶中。每個(gè)處理設(shè)3重復(fù)，每個(gè)重復(fù)35尾蝦[初始體重（1.18±0.011）g]。飼養(yǎng)期間連續(xù)充氣，水溫（28±1）℃，鹽度26.5‰～28‰，溶解氧不低于7.0 mg/L。每天投喂4次，投喂時(shí)間為：6：00、10：30、18：00、22：00，日投喂量為對(duì)蝦體重的6%左右，根據(jù)攝食情況調(diào)整投喂量。整個(gè)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)持續(xù)10周。

1.3 樣品收集及化學(xué)分析

10周生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，停止喂食12 h，開始收集凡納濱對(duì)蝦。分別稱量每桶對(duì)蝦總重，記錄對(duì)蝦個(gè)數(shù)，計(jì)算每桶凡納濱對(duì)蝦平均體重。每個(gè)重復(fù)任意挑選出7～10尾對(duì)蝦擦干蝦體水分儲(chǔ)存，用于測(cè)定全蝦體組成和體氨基酸含量。

體常規(guī)和飼料常規(guī)成分分析均采用AOAC（2000）[9]的方法。其中，水分的測(cè)定為105℃烘干恒重法（24 h）；粗蛋白的測(cè)定為凱氏定氮法，采用瑞典TECATOR公司1030型蛋白質(zhì)自動(dòng)分析儀；粗脂肪的測(cè)定為索氏抽提法；粗灰分的測(cè)定為箱式電阻爐550℃灼燒法（16 h）。總氨基酸的測(cè)定為6 N HCl水解法（24 h），采用日立L-8800型氨基酸自動(dòng)分析儀分析。

1.4 計(jì)算與統(tǒng)計(jì)分析

增重率（WGR，%）=（Wt-W0）/W0×100

特定生長(zhǎng)率（SGR，%/d）=(lnWt-lnW0)/t×100

飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）=I/（Wt-W0）

蛋白質(zhì)效率（PER，%）=（Wt-W0）×100/I×P×100

式中：Wt、W0——終末和初始均重（g）；

t——實(shí)驗(yàn)時(shí)間(d)；

I——攝入的干物質(zhì)含量(g)；

P——飼料中蛋白質(zhì)含量(%)。

采用單因素方差分析（one-way-ANOVA），當(dāng)不同處理之間差異顯著（P＜0.05）時(shí)，用Tukey’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較分析。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，所有統(tǒng)計(jì)分析均在SPSS 11.0軟件中進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響（見表3）

如表3所示。經(jīng)過10周的攝食生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，不同飼料組凡納濱對(duì)蝦成活率均在90%以上，不同梯度復(fù)合蛋白對(duì)凡納濱對(duì)蝦成活率未產(chǎn)生顯著影響（P＞0.05）。但是，隨著復(fù)合蛋白替代水平提高，凡納濱對(duì)蝦增重率、特定生長(zhǎng)率（SGR）、蛋白質(zhì)效率（PER）均產(chǎn)生不同程度下降，飼料系數(shù)（FCR）不同程度升高。所以實(shí)驗(yàn)組中，14%替代組獲得最高的SGR、PER和最低的FCR，與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。28%替代組PER和FCR組與14%替代組差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼料中復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)的影響（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤）

2.2 復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦體組成及氨基酸組成的影響（見表4、表5）

由見表4可知，對(duì)蝦水分含量范圍在75.1%～76.2%，粗蛋白含量范圍在17.50%～18.40%，粗脂肪含量范圍在2.12%～2.89%，粗灰分含量范圍在3.27%～3.45%，各飼料組間沒有出現(xiàn)顯著差異，但隨著復(fù)合植物蛋白比例的升高粗蛋白含量有下降的趨勢(shì)，粗灰分有升高的趨勢(shì)（P＞0.05）。

表4 飼料中復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦體組成的影響（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，%）

同時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，不同飼料組凡納濱對(duì)蝦體組織氨基酸組成見表5。各飼料組間對(duì)蝦氨基酸組成沒有出現(xiàn)顯著差異（P＞0.05）。

表5 飼料中復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦氨基酸組成的影響（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，%）

3 討論

3.1 復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

本實(shí)驗(yàn)條件下，復(fù)合植物蛋白替代14%魚粉時(shí)，凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)或蛋白質(zhì)效率無顯著變化，但隨著替代水平的提高，凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)指標(biāo)SGR及蛋白質(zhì)利用指標(biāo)PER呈不同程度下降。很多研究結(jié)果證實(shí)凡納濱對(duì)蝦或水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物可以有效利用植物蛋白源。例如，在凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中可以用豆粕和菜粕來替代魚粉[10]。然而，過高的植物蛋白替代魚粉可能會(huì)抑制水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)和飼料利用。Lim等[7]發(fā)現(xiàn)使用雙低菜粕替代60%魚粉蛋白，凡納濱對(duì)蝦成活率和特定生長(zhǎng)率顯著低于對(duì)照組。在魚類的研究也得到類似的結(jié)果。當(dāng)復(fù)合蛋白替代20%魚粉時(shí)，對(duì)花鱸生長(zhǎng)無顯著影響，但當(dāng)替代比例達(dá)到40%時(shí)復(fù)合蛋白則會(huì)顯著降低花鱸的生長(zhǎng)性能[11]。林仕梅等[12]在雜交鱧上的研究也顯示復(fù)合蛋白源替代24%以上的魚粉會(huì)顯著降低雜交鱧的特定生長(zhǎng)率和飼料效率。這種生長(zhǎng)效應(yīng)的抑制，主要可能是由于植物蛋白中促攝食物質(zhì)含量較低導(dǎo)致的攝食率降低[13]。也可能與植物蛋白的消化利用率偏低有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)飼料復(fù)合蛋白含量超過28%時(shí)，凡納濱對(duì)蝦特定生長(zhǎng)率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。說明復(fù)合蛋白能夠替代飼料中14%的魚粉蛋白而不影響對(duì)蝦的生長(zhǎng)，替代比例不要超過28%。

3.2 復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦肌肉常規(guī)成分和體組織氨基酸的影響

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分含量沒有顯著影響（P＞0.05）。在大口黑鱸、大菱鲆、黃顙魚的蛋白替代實(shí)驗(yàn)中也得到了類似的研究結(jié)果[14-16]。在本研究中雖然統(tǒng)計(jì)上無顯著差異，但凡納濱對(duì)蝦脂肪含量卻有隨著復(fù)合蛋白替代量升高呈下降的趨勢(shì)。有研究認(rèn)為，腸道脂肪酶活性可能受復(fù)合蛋白替代魚粉比例升高而降低[11]。此外，由于植物蛋白源中非淀粉性多糖和低聚糖含量較高，可能導(dǎo)致動(dòng)物對(duì)脂肪的消化吸收率下降[14，17]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同復(fù)合植物蛋白替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦體組織氨基酸沒有顯著影響。這與陳曉瑛等[18]在黃顙魚、朱旺明等[14]在大口黑鱸上添加復(fù)合蛋白源，肌肉中的氨基酸、必需氨基酸以及非必需氨基酸的含量與魚粉組沒有顯著差異的研究結(jié)果保持一致。本實(shí)驗(yàn)中不同復(fù)合植物蛋白替代魚粉組氨基酸含量沒有顯著差異，說明適當(dāng)比例的復(fù)合植物蛋白替代魚粉可以維持凡納濱對(duì)蝦的營(yíng)養(yǎng)及肌肉品質(zhì)。

4 結(jié)論

綜上所述，以生長(zhǎng)和飼料效率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，凡納濱對(duì)蝦配合飼料中復(fù)合植物蛋白替代魚粉的最適比例為14%。