黃金玉，陳永媛

(廣西崇左市江州區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，廣西 崇左 532200)

0 引言

針對動物進(jìn)行的疫病的采樣和檢測工作不僅可以有效避免動物之間出現(xiàn)疫病的流行，也可以在實際的采樣和檢測中獲得防治疫病的措施和方法。雖然采樣和檢測工作隨著社會的發(fā)展而不斷提升，但是在實際工作中還是會存在各種問題，在新形勢之下，怎樣讓采樣和檢測工作得到大幅度的改善和強化，以提升最終的工作效率，是現(xiàn)階段動物采樣和檢測工作人員要考慮的首要問題之一。

1 動物疫病監(jiān)測中存在的問題

1.1 重視動物疫病抗體監(jiān)測，輕視病原學(xué)監(jiān)測

對動物的疫病進(jìn)行監(jiān)測的主要目的就是為對現(xiàn)階段動物疫病進(jìn)行風(fēng)險等級的有效評估，并為動物疫病的防護(hù)和控制措施及政策提供必要的數(shù)據(jù)和信息基礎(chǔ)[1]。在這樣的工作中，抗體監(jiān)測僅僅是整體疫病監(jiān)測的一個組成部分，而對病原學(xué)進(jìn)行監(jiān)測的意義也是非常重大的，尤其是針對疑似疫病的疾病發(fā)生的時候，對病原學(xué)進(jìn)行監(jiān)測可以起到診斷疫病的作用。但是現(xiàn)階段的許多動物疫病在監(jiān)測中都只重視抗體的監(jiān)測，而不重視病原學(xué)的監(jiān)測。

1.2 流行病學(xué)的調(diào)查不夠

在動物疫病的監(jiān)測工作中，對動物的流行病學(xué)進(jìn)行深入的調(diào)查，可以有效評估相關(guān)疫病的發(fā)展趨勢，并將結(jié)果及時的反饋給指導(dǎo)疫病防控政策的相關(guān)人員[2]。針對動物的流行病學(xué)進(jìn)行深入的調(diào)查是疫病在風(fēng)險評估上比較重要的內(nèi)容之一，現(xiàn)階段雖然許多監(jiān)測中都已經(jīng)開展了流行病學(xué)的調(diào)查工作，但是實際工作的深度并不夠，還是有較大的發(fā)展空間。

1.3 監(jiān)測結(jié)果利用程度不夠

現(xiàn)階段許多對動物疫病抗體的檢測結(jié)果，主要就是評估相關(guān)疫苗的實際免疫效果，用于指導(dǎo)免疫流程和最終有效診斷疫病的工作還不夠深入，未能有效發(fā)揮動物疫病監(jiān)測結(jié)果的實際價值和作用。

1.4 基層人員對監(jiān)測工作的認(rèn)識不夠

針對動物開展的疫病監(jiān)測工作是最近幾年才慢慢得到重視的一項工作。由于開展的時間并不長，許多人對于監(jiān)測工作的真正作用和意義的認(rèn)知程度還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，這也阻礙了動物疫病監(jiān)測工作的順利開展[3]。

2 動物疫病采樣中存在的問題

2.1 采集血樣中存在的問題

溶血這一現(xiàn)象，是在實際采血工作中比較容易出現(xiàn)的問題之一。產(chǎn)生這樣的問題主要是因為：①采血或排血到容器過程中速度過快造成紅細(xì)胞破裂。②相關(guān)容器放置不穩(wěn)，產(chǎn)生了容器倒置或者是送樣的過程中受到了震蕩。③采血的注射器或容器受到了污染。④采血之后沒有對樣品進(jìn)行適當(dāng)溫度的保存或者沒有及時送到實驗室進(jìn)行保存。⑤抽血困難，采血進(jìn)針不準(zhǔn)，針尖在血管中穿來穿去造成血腫，在血腫的地方采集。另外因為有時實際采血量不足3 mL或者更少，使得被分離出的血清不足量，很難進(jìn)行檢測工作[4]。

2.2 棉拭子采樣中存在的問題

在棉拭子的采樣中一般都是采用2 mL的離心管來進(jìn)行保存，但是在實際的保存工作中經(jīng)常會出現(xiàn)沒有在離心管中加入保存液或者離心管的蓋子沒有擰緊等情況，這樣造成的直接后果就是會使離心管中的液體流失造成污染，影響檢測結(jié)果。

2.3 組織病料采集中存在的問題

在對組織病料進(jìn)行采集中比較常出現(xiàn)的問題是所采集的組織病料沒有一定的代表性，采集的動物因為死亡過久而組織病料不新鮮，所采集的病料受到其他病毒或物質(zhì)等的污染，所采集的病料體積太大或者太小及許多個病料混在一起存放等。

2.4 采樣記錄中存在的問題

在實際進(jìn)行采樣之前，部分工作人員并不進(jìn)行必要的采樣前準(zhǔn)備工作，在實際采樣中不攜帶采樣登記表或者記錄不規(guī)范、不完整等，也存在并沒有按照實際要求對所采集的樣品進(jìn)行編號等情況[5]。

3 動物疫病采樣監(jiān)測中的注意事項

3.1 做好準(zhǔn)備工作

1)樣品采樣的基本原則。在實際進(jìn)行采集的時候要按從動物的胸腔位置到腹腔位置的順序進(jìn)行，先采用無菌的方式采集動物的實質(zhì)器官，以有效避免組織受到外界的污染，后采集受到污染的組織，如動物的胃腸和糞便等[6]。實際所采集到的病料必須具有一定的代表性，且在一些病變比較明顯的位置采集的組織和器官。采集病料的種類，要根據(jù)動物所患有的不同的疾病或者實際檢查的目的來進(jìn)行采集；病料的采集也應(yīng)該在動物沒有使用任何的藥物之前進(jìn)行，以免受到藥物的干擾。針對一些死亡的動物，其內(nèi)臟病料的采取最好不要超過6 h，否則會因為天氣變化導(dǎo)致組織腐敗進(jìn)而產(chǎn)生不合格的病料。

2)采樣前的準(zhǔn)備。在實際進(jìn)行樣品的采集之前，要做好需要的器械和記錄用品、樣品保存液和相關(guān)防護(hù)用品的準(zhǔn)備工作。

3.2 血樣采集的注意事項

3.2.1 注意采血的目的與用途

在實際進(jìn)行實驗血清的制備的時候，一般情況之下是要使用一次性的不含抗凝劑的真空采血管來進(jìn)行采血。在實際制備血漿的時候，應(yīng)用含有抗凝劑的采血管，在采血工作完成之后，相關(guān)工作人員要讓血管盡量多搖晃幾次，以使得其中的抗凝劑可以和血液均勻地混合在一起[7]。

3.2.2 掌握好采血時間和免疫間隔時間

在對動物進(jìn)行血液采集的過程中，用于免疫抗體監(jiān)測的血樣采集應(yīng)該注意各種疫苗在免疫之后的抗體的產(chǎn)生時間。例如禽流感和口蹄疫一類的疾病，一般都要在免疫的21 d之后再進(jìn)行采血，致病率比較高的豬藍(lán)耳病則需要在免疫的28 d之后進(jìn)行采血。這里還需要注意的是在實際進(jìn)行采血之前要讓被采動物在實際采血之前禁食8 h左右。

3.2.3 注意采集血樣的部位

不同種類的動物采血方式上也是不一樣的。雞鴨類要采集其心臟或者翅膀下的靜脈血；而牛羊類則要采集其頸靜脈中的血液；豬則需要采集耳尖靜脈血或者前腔中的竇靜脈血。

3.2.4 注意樣品的標(biāo)記和采樣記錄的規(guī)范性

在采血工作結(jié)束之后，相關(guān)工作人員要馬上在血液儲存管子上做好相關(guān)標(biāo)記，并在采樣的登記表中標(biāo)明相關(guān)樣品的序號、采血管編號等信息。這里需要注意的是，相關(guān)信息必須要保持實物和登記表中的信息一一對應(yīng)。采樣的登記表中的全部內(nèi)容應(yīng)由相關(guān)工作人員填寫完整，在送樣之前要留下一份以備自查。

3.3 采集棉拭子應(yīng)注意的事項

針對一些致病率比較高的疾病，例如高致病性禽流感H7N9等進(jìn)行棉拭子采集的時候，要采集家禽咽喉部位和泄殖腔2個位置[8]。在實際采集中，應(yīng)使用無菌的棉簽，插入雞喉頭的位置和泄殖腔位置轉(zhuǎn)動3圈再取出，并將該棉簽插入離心管中且要棄掉多余的部分進(jìn)行保存。切記擰緊瓶蓋、做好相關(guān)標(biāo)記，密封保存；針對豬的棉拭子，咽部拭子、肛門部位的拭子在采集中都要使用無菌的棉簽進(jìn)行相關(guān)位置分泌物的采集。在棉拭子的保存工作中，要在密封且低溫的條件下保存，其中比較常用的保存液是加有0.8～1 mL的PBS液(含有抗生素)。

3.4 組織病料的采樣

在進(jìn)行動物內(nèi)臟的組織采集時，如果動物已經(jīng)死亡則要盡快進(jìn)行。如果采集時間是在夏天，那么最好不要超過2 h，冬天則可以不超過6 h。在實際采集的時候要盡可能地保證動物的病料不受到外界污染。實際采集的組織病料不用太大但也不能太小，最佳的大小要在1～2 cm。采集以后的樣本要放在經(jīng)過消毒的密閉容器之中。如果所采集的樣本是要進(jìn)行病理檢查，則需要采集一些病變部位和健康部位交接的位置，切記不要讓組織塊受到擠壓或者水洗。如果用作冷凍和切片的話，則需要將組織塊放置在0℃～4℃的消毒容器之中并將其在最短的時間之內(nèi)送到實驗室中進(jìn)行檢測。

3.5 樣品的保存和送樣應(yīng)注意的事項

如果采集現(xiàn)場沒有條件對所采集的血液樣品進(jìn)行血清分離工作，應(yīng)該對其進(jìn)行冷藏保存。進(jìn)行冷藏保存，必須要在48 h之內(nèi)將樣品送進(jìn)冷藏室中，以保證血清可以得到低溫的保存；相關(guān)棉拭子和組織的病料在采集后要馬上送到冷藏箱中或者實驗室中進(jìn)行保存或者檢測。如果不能馬上進(jìn)行檢測，則應(yīng)對其進(jìn)行低溫的保存。

4 結(jié)語

動物疫病的采樣和監(jiān)測工作相對來講是比較復(fù)雜的，所以在每一個工作環(huán)節(jié)中都需要仔細(xì)，都要嚴(yán)格按照相關(guān)注意事項開展。動物疫病采樣監(jiān)測工作的正確進(jìn)行，不僅有利于動物疫病的檢測，防止疫病傳染，也可以有效促進(jìn)畜牧業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展。