唐文文，孟艷林，陳 垣

基于多指標(biāo)成分優(yōu)化天麻產(chǎn)地“發(fā)汗”加工工藝

唐文文1,2，孟艷林1，陳 垣2*

1. 銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院，貴州 銅仁 554300 2. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070

利用響應(yīng)面法優(yōu)化天麻產(chǎn)地“發(fā)汗”加工工藝。以天麻中天麻多糖、天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、巴利森苷A、B、C、E 7種成分為指標(biāo)成分，AHP層次分析法確定各指標(biāo)成分權(quán)重，結(jié)合單因素實(shí)驗(yàn)，采用Box-Behnken設(shè)計(jì)法對(duì)蒸制時(shí)間、“發(fā)汗”時(shí)間和“發(fā)汗”次數(shù)3個(gè)因素進(jìn)行考察，綜合評(píng)分作為最終察指標(biāo)進(jìn)行天麻“發(fā)汗”加工工藝優(yōu)化研究。最佳“發(fā)汗”加工工藝為蒸制20 min，60 ℃烘至麻體發(fā)軟時(shí)，“發(fā)汗”9 h，取出攤開晾干麻體表面水分，再次“發(fā)汗”9 h，以60 ℃烘干。響應(yīng)面法優(yōu)選的天麻“發(fā)汗”加工工藝，穩(wěn)定性好，可操作性強(qiáng)，可為天麻產(chǎn)地“發(fā)汗”初加工提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)參考。

天麻；響應(yīng)面法；“發(fā)汗”加工；多糖；天麻素；巴利森苷；對(duì)羥基苯甲醇；AHP層次分析法；Box-Behnken設(shè)計(jì)

天麻Bl.首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，記載如下：“味辛，溫。主殺鬼精物，蠱毒，惡氣，久服益氣力，長(zhǎng)陰，肥健，輕身延年”[1]，為蘭科多年生異養(yǎng)寄生型草本植物，是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥[2]。天麻用藥歷史悠久，加工方法不一，現(xiàn)主要為蒸制、發(fā)汗和煮制等，但大致都需經(jīng)過殺青和干燥過程，在天麻的傳統(tǒng)加工工藝中，米湯水煮法、明礬水煮法以及雪天麻的加工過程均采用了“發(fā)汗”技術(shù)，在《中草藥加工技術(shù)》一書中，也有對(duì)天麻采用“發(fā)汗”技術(shù)進(jìn)行初加工的記載[3]，有研究表明[4-5]，“發(fā)汗”前后天麻中有效成分含量差異明顯，且發(fā)汗處理后，天麻素和天麻多糖含量均較高[5]，說明“發(fā)汗”處理對(duì)天麻有效成分具有一定的良性影響，季德等[6]在天麻的干燥加工方式研究中，也采用了發(fā)汗處理，所得天麻樣品品質(zhì)較好。

目前，針對(duì)天麻加工工藝的研究多集中在蒸（煮）殺青方法[7-9]和干燥方式[9-14]上，對(duì)“發(fā)汗”加工工藝研究較少，通過前期天麻產(chǎn)區(qū)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，天麻的“發(fā)汗”工藝在產(chǎn)地初加工中應(yīng)用較廣泛，尤其是家庭作坊式小型加工企業(yè)，但“發(fā)汗”時(shí)間，“發(fā)汗”次數(shù)以及在加工流程中的步驟雜亂不一。因此，本研究以天麻中主要藥效成分天麻多糖（polysaccharides of，GEP）、天麻素、對(duì)羥基苯甲醇（4-hydroxybenzyl alcohol，4-HA）、巴利森苷A（parishin A，GPA）、巴利森苷B（parishin B，GPB）、巴利森苷C（parishin C，GPC）、巴利森苷E（parishin E，GPE）7種成分為指標(biāo)，采用AHP層次分析法確定各指標(biāo)相關(guān)權(quán)重系數(shù)，以鮮天麻分級(jí)凈選→蒸制→預(yù)干燥→“發(fā)汗”→干燥為基本工藝流程，結(jié)合Box-Behnken響應(yīng)面法，優(yōu)選天麻藥材產(chǎn)地加工工藝，為天麻“發(fā)汗”加工提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)參考。

1 材料與試劑

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)用天麻于2020年11月中旬采之于貴州省德江縣天麻種植區(qū)，經(jīng)銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院梁玉勇教授鑒定為蘭科天麻屬植物天麻Bl.的塊莖。

1.2 儀器與試劑

Agilent1260高效液相色譜儀，安捷倫有限公司；UV-1801紫外可見分光光度計(jì)，北京瑞麗分析儀器有限公司；SB5200DTD超聲波清洗機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；CP214萬分之一電子天平，奧豪斯儀器有限公司；New Human Power型超純水儀，韓國(guó)Human公司；Kromasil-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；對(duì)照品天麻素，批號(hào)110807-202010，質(zhì)量分?jǐn)?shù)95.5%，購(gòu)自于中國(guó)食品藥品檢定研究院；對(duì)照品4-HA（批號(hào)H21D6Q7813）、GPA（批號(hào)P10O7F22270）、GPB（批號(hào)P11J7F17626）、GPC（批號(hào)P11J7F17625）、GPE（批號(hào)P10J8F28472），質(zhì)量分?jǐn)?shù)均≥98%，均購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司；甲醇、乙腈，色譜純，美國(guó)Tedia公司；-無水葡萄糖對(duì)照品，批號(hào)110833-201908，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.8%，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

2 方法與結(jié)果

2.1 天麻“發(fā)汗”加工工藝流程

按照鮮天麻分級(jí)凈選→蒸制→預(yù)干燥→“發(fā)汗”→干燥的工藝流程進(jìn)行制備，抽真空包裝，4 ℃冰箱保存，待測(cè)。選擇大小均一的鮮天麻（120～150 g），置于蒸鍋中蒸制一定時(shí)間，將蒸制后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱60 ℃烘至麻體發(fā)軟時(shí)取出，自然冷卻，將冷卻后的天麻放入潔凈容器內(nèi)，覆蓋濕夾棉紗布室溫“發(fā)汗”一定時(shí)間，取出在陰涼通風(fēng)處晾干麻體表面水分，再進(jìn)行“發(fā)汗”，將“發(fā)汗”后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱中，以60 ℃烘至含水量在10%～15%時(shí)取出。

2.2 GEP的含量測(cè)定

采用硫酸-苯酚法，參考楊天友等[15]的方法進(jìn)行，以-無水葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（）、吸光度值為縱坐標(biāo)（）繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程為＝0.008 1－0.003 9，2＝0.999 4，-無水葡萄糖對(duì)照品質(zhì)量濃度的線性范圍為26.60～159.84 μg/mL。

供試品溶液的制備方法修改如下：分別精密稱取各樣品，加入樣品重100倍體積的95%乙醇浸泡過夜，濾過，濾渣揮至無醇味，加入液料比50∶1的純化水，密塞搖勻，稱定質(zhì)量，超聲（200 W、40 kHz）30 min，稱定質(zhì)量，用蒸餾水補(bǔ)足減失的質(zhì)量，回流提取1.5 h，4000 r/min離心10 min，精密吸取上清液5 mL至10 mL量瓶中，加水定容，搖勻，即得。

2.3 6種酚類成分的含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件[4,13]Kromasil-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05%乙酸水溶液-乙腈，梯度洗脫：0～25 min，3%～10%乙腈；25～35 min，10%～20%乙腈；35～46 min，20%～100%乙腈；46～50 min，100%～3%乙腈；體積流量1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL。理論板數(shù)按天麻素峰計(jì)算均大于5000。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取各對(duì)照品適量，加10%甲醇配制成含天麻素4.725 mg/mL、4-HA 1.994 mg/mL、GPA 4.813 mg/mL、GPB 4.274 mg/mL、GPC 3.026 mg/mL、GPE 4.523 mg/mL的混合對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。將混合對(duì)照品儲(chǔ)備溶液用10%甲醇稀釋25倍，得混合對(duì)照品溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備 各樣品粉碎后過3號(hào)篩，精密稱取各樣品適量，置于具塞的錐形瓶中，按20∶1的液料比加入稀乙醇溶液，搖勻稱定質(zhì)量，超聲處理（200 W、40 kHz）40 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，濾過，精密量取續(xù)濾液10 mL，濃縮至近干無醇味，殘?jiān)?0%甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，用10%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.4 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.3.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品儲(chǔ)備溶液0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mL置于25 mL量瓶中，用10%甲醇溶液稀釋至刻度，制成一系列對(duì)照品溶液，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件，進(jìn)樣量10 μL，測(cè)定各對(duì)照品峰面積。以峰面積（）對(duì)應(yīng)對(duì)照品的濃度（）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程，天麻素＝18 107－32.676，2＝0.999 9，線性范圍47.25～756.00 μg/mL；4-HA＝368 54－14.288，2＝0.999 8，線性范圍19.94～319.00 μg/mL；GPA＝25 510＋51.252＝0.999 8，線性范圍48.13～770.00 μg/mL；GPB＝16 079＋183.33，2＝0.999 2，線性范圍42.74～684.00 μg/mL；GPC＝17 693－50.878，2＝0.999 6，線性范圍30.26～484.00 μg/mL；GPE＝11 976－37.917，2＝0.999 8，線性范圍45.23～723.60 μg/mL。

2.3.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.3.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液10 μL，按照“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，即得天麻素、4-HA、GPA、GPB、GPC、GPE峰面積的RSD分別為0.25%、0.17%、0.60%、0.19%、0.50%、1.15%，表明儀器精密性良好。

2.3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取傳統(tǒng)加工工藝制備的天麻樣品供試品溶液，分別于0、4、8、12、16、20、24 h，按照“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄峰面積，得天麻素、4-HA、GPA、GPB、GPC、GPE峰面積的RSD分別為0.95%、0.56%、0.43%、0.33%、0.39%、1.12%，結(jié)果表明供試品溶液在制備后24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取傳統(tǒng)加工工藝制備的天麻樣品按照“2.3.3”項(xiàng)下供試品溶液的制備方法平行制備6份，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定含量，得天麻素、4-HA、GPA、GPB、GPC、GPE質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD分別為1.95%、2.15%、2.23%、1.46%、2.86%、1.54%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.8 加樣回收率試驗(yàn) 稱取已測(cè)定指標(biāo)成分含量的傳統(tǒng)加工工藝制備的天麻樣品粉末約1.0 g，共6份，精密稱定，分別精密加入天麻素、4-HA、GPA、GPB、GPC、GPE對(duì)照品適量，按“2.3.3”項(xiàng)下供試品溶液制備方法處理，再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，得天麻素、4-HA、GPA、GPB、GPC、GPE的平均加樣回收率分別為97.9%、101.6%、97.1%、99.8%、100.1%、96.7%，RSD分別為2.53%、2.27%、1.13%、1.96%、2.72%、2.35%，均小于3.0%，表明該法回收率良好。

2.3.9 樣品測(cè)定 分別精密吸取對(duì)照品溶液和不同處理的供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，分別記錄天麻素、4-HA、GPA、GPB、GPC、GPE的峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算供試品中6種物質(zhì)的含量。HPLC色譜圖見圖1。

1-天麻素 2-4-HA 3-GPE 4-GPB 5-GPC 6-GPA

2.4 天麻產(chǎn)地加工工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)權(quán)重的建立

天麻中富含酚類物質(zhì)成分群，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病表現(xiàn)出較強(qiáng)的藥理作用，其中天麻素是4-HA的葡萄糖苷，是《中國(guó)藥典》2020年版中要求的天麻質(zhì)控成分，巴利森苷類是天麻素和檸檬酸酯化而成的化合物，能在胃腸道降解為天麻素被吸收入血；GEP是天麻中又一大類活性成分，具有延緩衰老、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，抗輻射、抗炎及降壓的藥理作用[16-17]。根據(jù)各成分的重要性，運(yùn)用AHP層次分析法，將GEP、天麻素、4-HA、巴利森苷類（GPs＝GPA＋GPB＋GPC＋GPE）含量作為權(quán)重指標(biāo)，通過SPSS AU分析計(jì)算得到各成分的權(quán)重值，GEP為27.034%，天麻素為35.601%，4-HA為12.585%， GPs為24.779%，一致性比例因子（CR）＝0.001＜0.1，表明各指標(biāo)成分所得權(quán)重具有一致性。綜合評(píng)分（）＝GEP×27.034%＋天麻素×35.601%＋4-HA× 12.585%＋GPs×24.779%（＝含量/含量最大值，為指標(biāo)成分測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)）。實(shí)驗(yàn)中各成分含量差異太大，所以對(duì)各指標(biāo)成分的測(cè)定值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。

2.5 天麻加工工藝單因素實(shí)驗(yàn)

2.5.1 蒸制時(shí)間 選擇大小均一的鮮天麻（120～150 g），置于蒸鍋中蒸制（10、20、30、40 min），放入熱風(fēng)恒溫干燥箱中，以60 ℃烘至含水量在10%～15%時(shí)取出。按“2.2”和“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定GEP和6種酚類成分，結(jié)合評(píng)價(jià)指標(biāo)權(quán)重，計(jì)算值。從表1可以看出，值最高的為蒸制20 min。

表1 蒸制時(shí)間對(duì)有效成分的影響(n = 3)

2.5.2 “發(fā)汗”時(shí)間 選擇大小均一的鮮天麻（120～150 g），置于蒸鍋中蒸制20 min，將蒸制后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱60 ℃烘至麻體發(fā)軟時(shí)取出，自然冷卻，將冷卻后的天麻放入潔凈容器內(nèi)，覆蓋濕夾棉紗布室溫“發(fā)汗”，設(shè)置發(fā)汗時(shí)間分別為0、6、8、10、12 h，將“發(fā)汗”后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱中，以60 ℃烘至含水量在10%～15%時(shí)取出。按“2.2”和“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定GEP和6種酚類成分，結(jié)合評(píng)價(jià)指標(biāo)權(quán)重，計(jì)算值。從表2可以看出，綜合評(píng)分最高的為“發(fā)汗”10 h。

2.5.3 “發(fā)汗”次數(shù) 選擇大小均一的鮮天麻（120～150 g），置于蒸鍋中蒸制20 min，將蒸制后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱60 ℃烘至麻體發(fā)軟時(shí)取出，自然冷卻，將冷卻后的天麻放入潔凈容器內(nèi)，覆蓋濕夾棉紗布室溫“發(fā)汗”10 h，設(shè)置發(fā)汗次數(shù)為不“發(fā)汗”（0次）、“發(fā)汗”1次、“發(fā)汗”2次、“發(fā)汗”3次，將“發(fā)汗”后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱中，以60 ℃烘至含水量在10%～15%時(shí)取出。按“2.2”和“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定GEP和6種酚類成分，結(jié)合評(píng)價(jià)指標(biāo)權(quán)重，計(jì)算值。由表3可知，“發(fā)汗”工藝指標(biāo)綜合得分較不“發(fā)汗”要高，“發(fā)汗”2次的綜合得分最高。

表2 “發(fā)汗”時(shí)間對(duì)有效成分的影響(n = 3)

表3 “發(fā)汗”次數(shù)對(duì)有效成分的影響(n = 3)

2.6 Box-Behnken響應(yīng)面法試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，以《中國(guó)藥典》2020年版中對(duì)天麻產(chǎn)地加工描述為準(zhǔn)則，結(jié)合產(chǎn)地調(diào)研結(jié)果，根據(jù)Box-Behnken響應(yīng)面法的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，在其他條件下一致的前提下，選取蒸制時(shí)間（A）、“發(fā)汗”次數(shù)（B）、“發(fā)汗”時(shí)間（C）3個(gè)因素為變量，在加權(quán)評(píng)分的基礎(chǔ)上，以天麻“發(fā)汗”加工工藝的主要指標(biāo)成分百分含量的為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)3因素3水平響應(yīng)面試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果見表4。

采用Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行2次響應(yīng)面回歸分析，得到如下多元2次回歸方程＝0.840＋0.063 A－0.006 375 B－0.011 C＋0.012 AB－0.016 AC－0.015 BC－0.095 A2－0.030 B2－0.019 C2。

對(duì)回歸模型進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表5，由表5可知，該模型顯著性檢驗(yàn)的值為＜0.000 1，表明該模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，失擬項(xiàng)的值為0.179 7＞0.05，調(diào)整系數(shù)2adj＝0.975 8，C·V%（C.V值表示可靠性，值越低，可靠性越高）為1.45%，說明回歸模型擬合較好，能較準(zhǔn)確反映3個(gè)因素對(duì)天麻7種主要指標(biāo)成分的影響，可以作為天麻“發(fā)汗”加工工藝的優(yōu)選模型。

表4 天麻加工工藝響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素、水平和實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n = 3)

表5 回歸模型方差分析

從表5方差來源各因素的值可以看出蒸制時(shí)間對(duì)天麻主要指標(biāo)成分含量影響最大；A、B、C、AB、AC、BC、A2、B2和C2的值能夠反映3個(gè)因素對(duì)指標(biāo)成分的影響：其中A、A2、B2、C、C2的值表明蒸制時(shí)間、“發(fā)汗”次數(shù)、“發(fā)汗”時(shí)間對(duì)天麻主要指標(biāo)成分含量均有影響，其中蒸制時(shí)間對(duì)天麻主要指標(biāo)成分含量有極顯著影響（＜0.01），發(fā)汗時(shí)間有顯著影響（＜0.05），3個(gè)因素中蒸制時(shí)間的影響極大，這在圖2中各因素兩兩交互作用的3D響應(yīng)面圖曲線坡度陡峭程度上得到了驗(yàn)證，蒸制時(shí)間的曲面最為陡峭；另外AC、BC的值表明蒸制時(shí)間和發(fā)汗時(shí)間、發(fā)汗時(shí)間和發(fā)汗次數(shù)交互作用顯著（＜0.05），對(duì)天麻“發(fā)汗”加工過程中7種指標(biāo)成分有顯著影響。

2.7 天麻產(chǎn)地加工最佳工藝的確定及驗(yàn)證

根據(jù)響應(yīng)面分析結(jié)果得到天麻“發(fā)汗”加工的最佳工藝為蒸制時(shí)間為21.88 min、發(fā)汗次數(shù)為2.09次、發(fā)汗時(shí)間為9.02 h，此加工工藝條件下天麻7種主要指標(biāo)成分的綜合評(píng)分理論值可達(dá)0.853?？紤]到實(shí)驗(yàn)中實(shí)際可操作性，對(duì)鮮天麻（120～150 g）最佳“發(fā)汗”加工藝調(diào)整如下：置于蒸鍋中蒸制20 min，將蒸制后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱60 ℃烘至麻體發(fā)軟時(shí)取出，自然冷卻，將冷卻后的天麻放入潔凈容器內(nèi)，覆蓋濕夾棉紗布室溫“發(fā)汗”9 h，取出攤開放置于陰涼通風(fēng)處晾干麻體表面水分，再次進(jìn)行“發(fā)汗”9 h，將“發(fā)汗”后的天麻放入熱風(fēng)恒溫干燥箱中，以60 ℃烘至含水量在10%～15%。按照優(yōu)化后的“天麻”發(fā)汗加工工藝，加工天麻，按照按“2.2”和“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定GEP和6種酚類成分，結(jié)果見表6，結(jié)合評(píng)價(jià)指標(biāo)權(quán)重，得出加權(quán)后的綜合評(píng)分為0.838，與理論值的相對(duì)誤差為1.79%，說明此回歸模型預(yù)測(cè)較可靠且穩(wěn)定，優(yōu)化出的天麻“發(fā)汗”加工工藝具有可操作性。

圖2 各因素交互作用響應(yīng)面圖

2.8 天麻“發(fā)汗”加工與傳統(tǒng)加工工藝的比較

根據(jù)《中國(guó)藥典》2020年版中對(duì)天麻藥材加工的描述（采挖后，立即洗凈，蒸透，敞開低溫干燥），結(jié)合對(duì)貴州天麻種植基地調(diào)研結(jié)果，制備天麻傳統(tǒng)加工工藝樣品（將天麻采挖后洗凈，選取120～150 g大小鮮天麻，蒸透，40 ℃烘干）。

按“2.2”和“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定GEP和6種酚類成分，比較天麻“發(fā)汗”加工樣品與傳統(tǒng)加工樣品的活性成分差異，結(jié)果見表6。

表6 “發(fā)汗”加工工藝驗(yàn)證及與傳統(tǒng)工藝比較

3 討論

“發(fā)汗”初加工方法是常用的中藥產(chǎn)地加工方法之一，在天麻的產(chǎn)地初加工過程，通常采用“火汗”法，將藥材用微火烘至半干，堆置“發(fā)汗”至內(nèi)部變色時(shí)再烘干[18]。有研究表明天麻在“發(fā)汗”過程中其功效成分天麻苷在葡萄糖苷酶的催化下水解釋放出葡萄糖和天麻素[19]，GEP、天麻素、4-HA及GPA、B、C、E均為天麻中主要的功能性成分，且彼此之間存在相互轉(zhuǎn)化的關(guān)系，其中，天麻素的苷元為4-HA，巴利森苷類為天麻素與檸檬酸的結(jié)合物，因此，本研究以此7種成分作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選天麻產(chǎn)地“發(fā)汗”加工工藝。

根據(jù)前期針對(duì)發(fā)汗時(shí)間和發(fā)汗次數(shù)的單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，針對(duì)不“發(fā)汗”和“發(fā)汗”天麻7種指標(biāo)成分的綜合評(píng)分，確定出“發(fā)汗”天麻的綜合評(píng)分顯著高于不“發(fā)汗”處理，特別是對(duì)天麻素和GEP的含量具有顯著影響，這與周碧乾等[4-5]的研究結(jié)果一致，推測(cè)應(yīng)該與麻體內(nèi)酶的活性密切相關(guān)，“發(fā)汗”可能抑制或者激活相關(guān)酶活性，使化學(xué)成分發(fā)生變化，尤其是酚類成分的變化。結(jié)合產(chǎn)地調(diào)研，針對(duì)120～150 g大小的鮮天麻選擇蒸制20 min、發(fā)汗時(shí)間10 h和發(fā)汗次數(shù)2次，作為響應(yīng)面設(shè)計(jì)的中心水平點(diǎn)。

由表6結(jié)果可知，經(jīng)過“發(fā)汗”加工工藝處理的天麻藥材，GEP、天麻素，以及總巴利森苷類（GPs）含量均高于傳統(tǒng)加工工藝的。鮮天麻中酶活 性較強(qiáng)，而經(jīng)過高溫蒸制殺青可使麻體內(nèi)葡萄糖苷酶[19]等水解酶滅活，因此，天麻采挖后一定要及時(shí)進(jìn)行高溫殺青，以達(dá)到“殺酶保苷的效果，田治蛟等[20]研究發(fā)現(xiàn)蒸制時(shí)間不夠，天麻未熟透，天麻素生成較少，體內(nèi)酶活性未完全抑制，發(fā)生酶促褐變反應(yīng)，使天麻表皮變黑、天麻素含量降低。但不同等級(jí)天麻所需蒸制殺青時(shí)間不同，故在殺青處理前應(yīng)對(duì)天麻進(jìn)行嚴(yán)格等級(jí)。

鮮天麻體積大，水分含量高，干燥時(shí)間較長(zhǎng)，在干燥過程中容易發(fā)生變質(zhì)，而“發(fā)汗”可利于藥材的干燥，楊紅兵等[21]發(fā)現(xiàn)“發(fā)汗”厚樸含水量顯著低于未“發(fā)汗”厚樸。鮮天麻的水分散失過程分為等速和降速2個(gè)階段，降速階段主要取決于水分在麻體內(nèi)部的擴(kuò)散。在降速階段，因表面汽化速率大于麻體內(nèi)水分?jǐn)U散速率，藥材表面迅速干燥，麻體外殼變硬，阻礙內(nèi)部水分的擴(kuò)散和蒸發(fā)，形成假干，通過“發(fā)汗”可以增加麻體內(nèi)部水分?jǐn)U散速率，減少內(nèi)部水分在麻體的滯留[4]，加速天麻干燥速率，減少能耗，節(jié)約成本。本研究從多指標(biāo)藥效成分上來評(píng)價(jià)和優(yōu)選天麻“發(fā)汗”加工工藝的合理性及科學(xué)性，為產(chǎn)地初加工過程中的“發(fā)汗”工藝提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)參考。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Optimization of primary processing forbased on multi-index efficacy composition

TANG Wen-wen1, 2, MENG Yan-lin1, CHEN Yuan2

1. Tongren Polytechnic College, Tongren 554300, China 2. College of Agriculture, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China

To optimize the technology of “sweating” processing for Tianma () by response surface experiments.The single factor experiment combined with Box-Behnken design was used to optimize the “sweating” processing, with seven kinds of efficacy components (polysaccharide, 4-hydroxybenzyl alcohol, gastrodin, parishin A, parishin B, parishin C, and parishin E) as indexes, combined with the weight coefficients were calculated by AHP method, in order to detect three factors (steaming time, “sweating” time, and times of “sweating”), and optimize the “sweating” processing for.The optima “sweating” processing was as following:was steamed for 20 min, baked until becoming soft at 60oC, covered for “sweating” for 9 h, sprawled and dried the surface moisture, covered for “sweating” for 9 h again, then dried at 60oC.This optimized “sweating” processing ofreasonable and feasible, and with high accuracy. It could provide the scientific basis to the “sweating” processing of.

; response surface; “sweating” processing; polysaccharide; gastrodin; parishin; 4-hydroxybenzyl alcohol;AHP analytic hierarchy process; Box-Behnken design

R283.1

A

0253 - 2670(2021)23 - 7185 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.23.012

2021-06-18

教育部精準(zhǔn)扶貧項(xiàng)目（XZ20190326）；銅仁市科技計(jì)劃項(xiàng)目（銅市科研[2019]12-10號(hào)）；甘肅省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中藥材產(chǎn)業(yè)體系首席專家（GARS-ZYC-1）；銅仁職院院級(jí)課題（tzky-2020年-ZX05號(hào)）

唐文文，副教授，研究方向?yàn)樗幱弥参镔Y源開發(fā)、中藥材加工儲(chǔ)藏與質(zhì)量評(píng)價(jià)。E-mail: 412251544@qq.com

陳 垣，教授。E-mail: chenyuan@gsau.edu.cn

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