高丕景

（臨沂市蘭山區(qū)畜牧發(fā)展促進中心李官獸醫(yī)站，山東臨沂 276000）

1 前言

隨著我國生豬養(yǎng)殖行業(yè)的快速發(fā)展，規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化以及集約化已經(jīng)成為行業(yè)發(fā)展的重要方向，疫病是危害養(yǎng)殖效益的關(guān)鍵因素，在所有疫病中，非洲豬瘟危害性最大，其屬于一種接觸性、出血性、烈性傳染病，任何品種、性別、年齡的生豬都是感染對象，其傳播方式包括間接接觸和直接接觸，為病毒污染的設(shè)施、車輛、飲水以及飼料都是傳播途徑，該病死亡率較高，生豬患病后10d之內(nèi)死亡。想要有效防控非洲豬瘟，則要依靠有效的診斷技術(shù)，及時發(fā)現(xiàn)污染的設(shè)施，進而保證生豬健康，為我國居民提供放心的豬肉產(chǎn)品。

2 病原學(xué)檢測技術(shù)

2.1 病毒分離

病毒分離檢測技術(shù)是當(dāng)前應(yīng)用較為廣泛的一種技術(shù)，其通過采集病豬的腎臟、扁導(dǎo)體、淋巴結(jié)、脾臟以及血液等組織制作標(biāo)準(zhǔn)完成病毒分離。在組織中可加入抗生素或者培養(yǎng)液，通過離心操作后獲取清液，通過紅細(xì)胞吸附實驗或者病變效應(yīng)確定病豬是否感染非洲豬瘟。

2.2 附紅細(xì)胞吸附實驗

感染非洲豬瘟的病豬，其巨噬細(xì)胞和單個核細(xì)胞會吸附在紅細(xì)胞表面，通過顯微鏡觀察可判斷生豬是否患病。在開展實驗檢測中，可獲取病豬的組織或者血液懸液進行接種，使用含有抗生素和豬血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)48h后，利用顯微鏡觀察，如果培養(yǎng)基中的細(xì)胞組織呈現(xiàn)玫瑰花環(huán)型，則可判斷生豬感染非洲豬瘟。但是這種檢測方式較為耗時，并且需要在專業(yè)的實驗室中進行，對操作人員的技術(shù)能力要求較高，檢測結(jié)果具有一定的局限性。

2.3 抗原檢測

抗原檢測的原理與附紅細(xì)胞吸附實驗具有一定的相似性，其通過獲取病豬組織或者血液懸液，將其與復(fù)合物進行混合，根據(jù)顏色對感染情況進行判斷。隨著該技術(shù)的不斷發(fā)展，其檢測結(jié)果也更加準(zhǔn)確而有效，具有設(shè)備儀器要求低、成本低、方便、快速等特點。但是與附紅細(xì)胞吸附實驗相比較，其靈敏性和特異性較低，檢測結(jié)果受樣本影響較大，如果樣本保存時間較長、保存方式不正確或者長時間處于高溫環(huán)境下，則不能保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4 熒光抗體檢測

熒光抗體檢測屬于一種新型的檢測技術(shù)，對病豬的冰凍切片或者組織切片進行抗原檢測，該技術(shù)具有較強的敏感性和特異性，可以方便、快速的檢測出非洲豬瘟病毒。目前該技術(shù)主要用于抗原檢測和附紅細(xì)胞吸附實驗檢測的輔助方案，與其他檢測技術(shù)相比較，其對熒光素要求較高，如果熒光素屬于非特異性，則會導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。同時，熒光抗體檢測技術(shù)對操作人員的專業(yè)能力、職業(yè)素養(yǎng)要求較高，并且需要借助顯微鏡，難以在現(xiàn)地檢測中應(yīng)用和推廣。

2.5 膠體金免疫層析試紙條技術(shù)

該技術(shù)主要是利用抗體或者抗原與膠體金形成復(fù)合物，進而對非洲豬瘟病毒進行免疫識別的一種技術(shù)，對檢測樣品進行毛細(xì)作用遷移，與形成的復(fù)合物結(jié)合，通過肉眼可發(fā)現(xiàn)復(fù)合物上呈現(xiàn)紅色，進而判斷病豬感染非洲豬瘟病毒。目前該技術(shù)經(jīng)過長期的發(fā)展，其穩(wěn)定性、敏感性和特異性良好，尤其在現(xiàn)地檢測中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。

2.6 核酸檢測技術(shù)

核酸檢測技術(shù)不僅僅應(yīng)用于非洲豬瘟檢測中，在各種流行性疫病中都獲得大量應(yīng)用，其具有良好的特異性和靈敏度，是當(dāng)前國際衛(wèi)生組織制定的非洲豬瘟檢測技術(shù)。核酸檢測技術(shù)分為PCR檢測技術(shù)和多重PCR檢測技術(shù)，二者均具有顯著的效果，在準(zhǔn)確性方面也獲得不斷提升，具有便捷、快速、成本低等優(yōu)勢。

2.7 ELISA技術(shù)

該技術(shù)屬于一種新型技術(shù)，同時也是當(dāng)前國際貿(mào)易中制定的監(jiān)測中等毒性和較低毒性非洲豬瘟的方法，具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，通過采集病豬口腔液和血清制作樣本進行檢測。該技術(shù)具有較強的適用性，可用于現(xiàn)地檢測中，尤其在區(qū)域性流行檢測中，其具有較強的應(yīng)用價值。

3 非洲豬瘟診斷技術(shù)需求分析

隨著我國生豬養(yǎng)殖的快速發(fā)展，對非洲豬瘟的防控難度也不斷增加，當(dāng)前在檢測疫病中尚未有有效、準(zhǔn)確、便捷的檢測技術(shù)，目前依然以核酸檢測和病毒分離為主，核酸檢測具有較強的便捷性，可用于現(xiàn)地檢測，但是在應(yīng)用中也存在一定的不足，而病毒分離則需要在專業(yè)的實驗室中完成，對檢測人員、機械設(shè)備和檢測環(huán)境的要求較高。因此，我國相關(guān)機構(gòu)要綜合各種檢測技術(shù)的優(yōu)勢，加大科技研發(fā)力度，研制出更加便捷、準(zhǔn)確性更高的檢測技術(shù)。

4 結(jié)語

總而言之，在生豬規(guī)?；B(yǎng)殖中，非洲豬瘟屬于危害性較大的疫病，一旦在養(yǎng)殖場內(nèi)傳播難以有效防控，通過科學(xué)的檢測技術(shù)能夠有效避免疫病蔓延，對促進生豬養(yǎng)殖行業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有現(xiàn)實意義。