陳冬格，羅雍猷，劉 斌

干擾素調節(jié)因子2(interferon regulatory factor 2, IRF-2)是干擾素家族(interferons, IFNs)的一員，1989年[1]首次在大腸桿菌中被發(fā)現。IRF家族又稱轉錄因子家族，是一個多功能細胞因子家族，已發(fā)現9個家族成員：IRF-1～9。根據C末端區(qū)域的特征，IRF分為四個子家族，即IRF-1子家族(包括IRF-1、IRF-2)、IRF-3子家族(包括IRF-3、IRF-7)、IRF-4子家族(包括IRF-4、IRF-8、IRF-9、IRF-10)和IRF-5子家族(包括IRF-5、IRF-6)[2]。IFNs調節(jié)細胞因子、趨化因子、免疫調節(jié)因子和蛋白質的表達，參與細胞生長、增殖以及腫瘤的發(fā)生[3]。IRF-2在實體腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著復雜的雙重作用。IRF-2在多種腫瘤中起促癌作用，而在某些腫瘤中起抑癌作用。近年來，隨著化療藥物應用的增多，腫瘤耐藥性的缺點日益顯著。因此，尋找治療腫瘤的新策略是亟待解決的問題。本文就IRF-2的分子結構、生物學功能及其在實體腫瘤中的研究進展作一綜述，為腫瘤的治療尋找新靶點。

1 IRF-2的分子結構及生物學功能

IRF-2位于染色體4q34.1-35.1上，由510個氨基酸組成，相對分子質量為1.70×104，具有2個蛋白結構域vRING-HC_IRF2BP1_like和IRF-2BP1_2，與小鼠IRF-2的同源性為93.5%。IRF-1是干擾素家族中首個被發(fā)現的成員，IRF-1和IRF-2以及其他IRFs具有同源性為73%的N端DNA結合域(DNA binding domain, DBD)。DBD識別與IFN刺激的應答元件(IFN-stimulated response element, ISRE)序列相似的DNA。IRF-2的C-末端區(qū)域是一個富含堿性殘基的轉錄抑制區(qū)域。IRF的C-末端均包含1個IRF關聯(lián)域(IRF associate domains, IAD)，但IRF-1和IRF-2除外，它們具有不同的交互域(IAD2)。IAD2中蛋白質的相互作用可能決定蛋白質復合物是作為轉錄激活因子還是轉錄抑制因子發(fā)揮功能，并指定復合物與ISRE相鄰的DNA序列結合。與IRF-1相比，IRF-2具有更高的蛋白質穩(wěn)定性和細胞聚集濃度[4-6]。IRF-2 mRNA內含有“內部核糖體進入位點(internal ribosome entry site, IRES)”原件，以5′帽獨立方式與多嘧啶束結合蛋白(polypyrimidine tract binding protein, PTB)結合后啟動翻譯[7]。

IFNs是DNA結合蛋白，通過與多種干擾素反應元件(interferon regulatory factor binding element, IRF-E)結合來發(fā)揮其轉錄調節(jié)活性，包括IFN-α/β的基因、MHC Ι類、TAP1等。IRF-2還作為幾個基因的正調控因子發(fā)揮作用，如人組蛋白H4、EB病毒編碼核抗原-1(EBNA-1)、鼠血管黏附分子(VCAM-1)等[8]。IRF-2最廣受認可的功能是在多種靶細胞中產生抗病毒效應。其最初被認為拮抗IRF-1，通過競爭IFN基因和干擾素刺激基因(IFN stimulated genes, ISGs)啟動子中的結合位點，抑制了IRF-1的活性，從而限制IFN的反應。而Ren等[9]認為IRF-1是強轉錄激活劑，IRF-2是弱激活劑，它們在抗病毒調節(jié)劑-TLR3(toll-like receptor 3)激活的不同階段起作用。宿主細胞因子C2(host cell factor C2, HCFC2)促進IRF-2結合到TLR3啟動子上，從而促進干擾素調控基因的轉錄，增加對傳染病的敏感性[10]。TRIM14是維甲酸誘導的天然抗病毒免疫所必需的蛋白。IRF-2通過與IRES結合激活TRIM14啟動子產生抗病毒效應[11]?？傊?，IRF-2不論作為激活因子還是抑制因子，均通過與不同基因啟動子上的IRF-E結合發(fā)揮作用。

2 IRF-2在腫瘤免疫中的作用

主要組織相容性復合體Ⅱ(major histocompatibility complex Ⅱ, MHCⅡ)向CD4+T淋巴細胞遞送外源性抗原肽，致其活化和分化。二類反式激活因子(MHC class Ⅱ transactivator, CIITA)是一種共激活因子，調節(jié)MHCⅡ轉錄，并與細胞核中多種DNA結合因子相互作用。對CIITA表達的控制決定了對一般抗原提呈能力的控制，并可能控制腫瘤細胞的免疫原性。CIITA由多個啟動子控制，在啟動子Ⅳ上存在IRF-E，通過IFN-γ(Interferon-γ)信號通路介導激活。IRF-2與IRF-1共同占據IRF-E并協(xié)同激活啟動子Ⅳ[12]。Xi等[13]首次報道在人類胰腺癌中發(fā)現IRF-2突變，并發(fā)現突變體IRF-2無法激活CIITA啟動子進而使IFN-γ誘導的MHCⅡ類分子缺乏，降低腫瘤的免疫原性。提示IRF-2突變可能會影響腫瘤的免疫原性或與其他腫瘤表型相關。

近年來，細胞焦亡受到醫(yī)學界的廣泛關注，與凋亡形式不同，通過Gasdermin蛋白家族介導細胞發(fā)生程序性壞死。細胞焦亡早期特征為凋亡樣染色質凝聚、DNA片段化，隨后出現壞死樣細胞膜孔形成、細胞腫脹和細胞膜破裂，導致細胞內容物和促炎介質的釋放[14]。在人類單核細胞和巨噬細胞中，Caspase-4組成型表達并參與細胞焦亡。Thygesen等[15]利用全基因組篩查確定IRF-2是人類單核細胞中Caspase-4水平的調節(jié)因子，直接調控Caspase-4的表達。而Kayagaki等[16]提出了不同的觀點，認為IRF-2誘導巨噬細胞、內皮細胞和多種小鼠組織中gasdermin D蛋白(GSDMD)的表達，從而參與細胞焦亡的過程。不論IRF-2是誘導GSDMD還是Caspase-4，其是細胞焦亡中的重要環(huán)節(jié)，最終使GSDMD裂解寡聚并轉移到細胞膜上穿孔，破壞細胞滲透屏障導致細胞焦亡。隨著醫(yī)療技術的發(fā)展，腫瘤細胞相關的凋亡誘導缺陷成為癌癥治療中難以攻克的問題，因此細胞焦亡提示我們可以從非凋亡機制著手進行治療。

3 IRF-2在實體腫瘤中的表達及免疫調控效應

崔曼莉等[17]檢測IRF-2在69例食管鱗狀細胞癌及癌旁組織中的表達，結果顯示IRF-2在食管鱗狀細胞癌組織中的表達明顯高于癌旁組織。相關性分析顯示，IRF-2表達與腫瘤分化程度、分期、淋巴結轉移等相關。IRF-2高表達患者無進展生存期較短，提示IRF-2可能是預后不良的獨立危險因子。

肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是全球男性第二大死亡病因。目前抗PD-L1/PD-1治療HCC有效率較低，實驗發(fā)現調節(jié)PD-L1信號通路可提高免疫檢查點抑制劑的療效。Yan等[18]發(fā)現，IRF-2協(xié)同IRF-1調節(jié)PD-L1信號通路。分析不同肝臟背景(HBV/HCV)、腫瘤分化程度、TNM分期患者的基因表達，IRF-2與PD-L1呈明顯正相關。在炎癥腫瘤微環(huán)境中，浸潤T細胞及其他免疫細胞釋放IFN-γ，上調IRF-1、抑制IRF-2進而增加PD-L1表達。同時，IRF-2過表達會下調IFN-γ。提示IRF-2為PD-L1信號調控通路中的重要節(jié)點，對克服PD-1/PD-L1耐藥性具有重要意義。

Chen等[19]的研究結果顯示，與癌旁正常組織相比，79.0%胃癌患者低表達IRF-2，10.5%胃癌患者高表達IRF-2，10.5%胃癌患者兩者表達一致。另分析其表達與臨床病理特征的相關性，結果顯示IRF-2在65歲以下、胃癌位于胃竇且直徑大于5 cm、TNM分期較高的男性患者預后價值較高。IRF-2高表達組患者的總生存期明顯高于低表達組。上調IRF-2在胃癌細胞中的表達，可能是提高胃癌免疫治療效果的方法之一。

在H510A和H2291兩個肺癌細胞系中過表達IRF-2，結果顯示IRF-2的過表達促進肺癌細胞增殖[20]。而董磊等[21]的實驗結果顯示，IRF-2過表達可抑制Ki-67的表達，抑制A549非小細胞肺癌細胞侵襲和增殖能力，加速癌細胞凋亡。分析產生不同結果的原因可能與細胞系差異相關，IRF-2具體在肺癌中的作用有待進一步探討。

骨肉瘤是高度惡性原發(fā)性骨腫瘤，在兒童和青少年中具有較高的發(fā)病率和病死率。骨肉瘤轉移率較高，短短幾個月便可發(fā)生肺轉移。Lu等[22]檢測IRF-2在人成骨肉瘤MG-63、Saos-2細胞系及正常人胎兒成骨細胞系中的表達，結果發(fā)現IRF-2在骨肉瘤細胞系中較正常成骨細胞系中表達降低。通過遷移實驗進一步證實IRF-2抑制骨肉瘤細胞的侵襲、遷移發(fā)揮腫瘤抑制作用，上游靶點抑制IRF-2表達而促進腫瘤的增殖。

Mei等[23]采用RT-PCR法檢測結直腸癌(colorectal cancer, CRC)組織中IRF-2的表達，結果顯示CRC中IRF-2的表達水平高于癌旁正常組織，且IRF-2表達與遠處轉移及術前癌胚抗原水平相關，提示IRF-2水平可體現患者預后水平。IRF-2表達與其他臨床病理特征，如年齡、性別、部位、腫瘤大小、分化、TNM分期等無明顯相關性。有報道稱IRF-2在CRC肝轉移的CD68巨噬細胞中表達。隨著疾病的進展，IRF-2在CRC轉移患者肝臟中的表達水平增加。這些結果表明IRF-2與CRC肝轉移分化相關[24]。在CRC患者中，微衛(wèi)星穩(wěn)定性(microsatellite stable, MSS)占大多數，其中KRAS致癌突變是其常見致病因素。30%～50%的CRC患者存在KRAS基因突變，并與疾病的侵襲性和轉移密切相關。在KRAS突變的腫瘤區(qū)域IRF-2呈低表達或陰性。IRF-2在KRAS野生型和突變型患者樣本中的表達存在異質性，這可能是由于KRAS在空間或表達水平上存在異質性或存在額外的調控機制。在微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定性(microsatellite instability-high, MSI-H)CRC中的表達高于MSS CRC，這對MSI-H CRC患者可能是一個潛在的治療方案[25-26]。實驗發(fā)現[27]，CRC衍生的外泌體內IRF-2表達增高，轉錄激活促進腫瘤相關巨噬細胞血管內皮生長因子C(vascular endothelial growth factor-C, VEGFC)的表達，最終導致前哨淋巴結中淋巴管生成，為腫瘤轉移創(chuàng)造了良好的條件。通過靶向IRF-2的治療策略，可以預防在外泌體中高表達IRF-2的CRC患者的轉移。這種預防腫瘤轉移的干預措施可能會延長CRC患者的生存期。IRF-2還可通過抑制腫瘤中PD-L1的表達來增強抗腫瘤免疫力，或減少吸引免疫細胞介導抑制抗腫瘤免疫力的趨化因子。因此，IRF-2可作為預測抗PD-1治療反應的生物標志物，KRAS-IRF2軸可增強免疫治療CRC的有效性[28-29]。

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)為成人常見的白血病類型，進展迅速，存活率低。IRF-2基因敲除抑制了AML細胞生長增殖，進一步研究表明IRF-2與Ⅱ型多磷酸肌醇4-磷酸酶(inositol polyphosphate 4-phosphatase type Ⅱ, INPP4B)協(xié)同作用調節(jié)細胞自噬，抑制腫瘤細胞凋亡[30]。細胞自噬參與多種生物學過程，并與腫瘤、感染、衰老等有關[31]。此外，在多發(fā)性骨髓瘤中IRF-2參與骨髓微環(huán)境介導的耐藥作用，通過激活STAT1-IRF2信號通路促進多發(fā)性骨髓瘤細胞的增殖[32]。

4 結語

IRF-2在多種實體腫瘤中發(fā)揮癌基因作用，與不同靶點結合發(fā)生腫瘤免疫逃逸，可作為預后危險因素存在，同時在某些腫瘤中發(fā)揮抑癌作用。另外IRF-2參與細胞焦亡，為治療對常規(guī)化療藥物產生耐藥性的患者提供新思路。目前其具體分子通路不明，且在不同腫瘤中產生的效應各異。隨著腫瘤免疫機制研究的深入，IRF-2可為臨床腫瘤的治療帶來更廣闊的前景。