侯慧文
天津市農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心,天津300192
動物飼料是畜牧業(yè)生產(chǎn)發(fā)展的基礎(chǔ),安全性高的動物飼料不僅能推動畜牧業(yè)良性健康發(fā)展,而且還能提高畜禽產(chǎn)品品質(zhì)和養(yǎng)殖效益。飼料安全快速檢測技術(shù),能縮短待檢飼料前期處理、試驗操作和結(jié)果查詢等各個環(huán)節(jié)所耗時間,且檢測結(jié)果靈敏度和特異性高、符合國家對飼料物質(zhì)成分的檢測限。隨著農(nóng)業(yè)技術(shù)的發(fā)展,飼料安全快速檢測技術(shù)還有許多便攜式儀器(如便攜式光度計、便攜式PCR 儀)或膠體金試紙條等,便于工作人員現(xiàn)場檢測,為飼料殘藥物留、致病菌、生物毒素及其他有害物質(zhì)檢測提供技術(shù)保障。
免疫學(xué)檢測方法主要包括免疫沉淀法(IP)、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLI)、放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)等,飼料安全快速檢測最常用的免疫學(xué)技術(shù)為ELISA,檢測原理為抗原或抗體固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與樣品中待檢物質(zhì)的量具有相關(guān)性,根據(jù)產(chǎn)物顏色深淺進行定性或定量判斷。ELISA 常用于飼料中生物毒素的檢測,李慧娟等[1]通過ELISA 對飼料中赭曲霉毒素A 進行檢測,赭曲霉毒素A 的添加回收率為88.4%~134.6%,且檢測結(jié)果符合國標(biāo)GB 13078-2017《飼料中赫曲霉毒素A 含量的測定》,且該方法的樣品的前期處理簡單,大大縮短了檢測時長,是一種適用于飼料中赭曲霉毒素A 初篩的檢測方法。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種成熟、應(yīng)用范圍廣的快速檢測技術(shù),PCR 檢測原理是以DNA 片段為模板,在DNA 聚合酶和核苷酸底物共同參與下,通過變性-退火-延伸等不同溫度反應(yīng)將DNA 擴增至足夠數(shù)量的檢測方法,適用于微量DNA 模板,且對待檢樣品純度要求不高。目前常用的PCR 檢測技術(shù)包括熒光定量PCR(Real-time qPCR)、環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法(LAMP)和微滴式數(shù)字PCR(dd PCR),PCR 檢測技術(shù)常用于飼料中細(xì)菌微生物的檢測。阮靖華等[2]利用Real-time qPCR 對進境動物源性飼料中沙門氏菌進行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Real-time qPCR檢測的進境動物源性飼料樣品的檢出率與國標(biāo)法一致,檢測的可重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確高,由于試驗時間短,大大加快了飼料通關(guān)速度。
生物傳感器由生物感應(yīng)元件和信號傳導(dǎo)器組成,是一種對生物物質(zhì)敏感且能將這些物質(zhì)濃度轉(zhuǎn)換為電信號進行檢測的儀器。根據(jù)生物感應(yīng)元件所采用的生命物質(zhì)可以劃分為細(xì)胞、組織、酶、微生物、免疫傳感器等傳感器。生物傳感器具有占地小、成本低、耗時短、特異性和靈敏度高的優(yōu)點,但由于某些待檢樣品預(yù)處理難度較高,還需要進一步開發(fā)。生物傳感器不僅對飼料中阿維菌素(AVMs)、鏈霉素(STR)等藥物具有相對的檢測優(yōu)勢,而且也可以用于檢測飼料中的生物毒素。周歷嵐等[3]通過表面等離子體振諧生物傳感器法(SPR)對玉米飼料中黃曲霉毒素進行檢測,發(fā)現(xiàn)SPR 對黃曲霉毒素的檢測限為0.78 ppb,且SPR 無需標(biāo)記,具有能實時監(jiān)測生物分子相互作用、可確定反應(yīng)物種類和濃度、定量分析抗原抗體的結(jié)合狀態(tài)等優(yōu)勢和快速、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點,但是配套的設(shè)備儀器費用高,操作較為復(fù)雜,在我國的應(yīng)用范圍較小。
基因芯片技術(shù)結(jié)合微電子光刻技術(shù)和DNA 化學(xué)合成技術(shù)檢測飼料,其檢測原理是將各種基因寡核苷酸在物體表面點樣,并將DNA 片段進行PCR擴增和標(biāo)記,再與寡核苷酸樣品雜交,以雜交信號的篩選實現(xiàn)對待檢樣品物質(zhì)的檢測。這是一種飼料及食品安全的新型檢測技術(shù),主要用于檢測飼料及食品中的微生物[4]。
飼料安全快速檢測技術(shù),不僅可以在短時間內(nèi)檢測飼料中藥物殘留、微生物、生物毒素污染情況,還能對飼料成分和安全性進行檢測,和傳統(tǒng)檢測方法相比,縮短了檢測時間,其檢測結(jié)果的可靠性和靈敏度也較高,是未來飼料安全檢測的發(fā)展方向。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和快速檢測技術(shù)的普及,我國飼料業(yè)的安全性也會逐步提高,為畜牧業(yè)提供更安全健康的飼料產(chǎn)品。