詹日明，唐旭東,b

(廣東醫(yī)科大學(xué) a.生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所，b.抗腫瘤活性物質(zhì)研發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心，廣東 湛江 524023)

肺癌是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，同時(shí)也是全世界癌癥死亡的主要原因，但肺癌的病因及發(fā)展機(jī)制目前尚未明確。近年來(lái)，我國(guó)的肺癌發(fā)病率和病死率均呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，肺癌患者的預(yù)后也不理想[1]。肺癌早期癥狀不明顯，且發(fā)展迅速，易出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，因此尋找特異性高的早期診斷標(biāo)志物和療效更好的治療方法迫在眉睫。外泌體中富含多種生物活性物質(zhì)(包括核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等)，可介導(dǎo)細(xì)胞間物質(zhì)和信息傳遞，參與蛋白質(zhì)和RNA的轉(zhuǎn)運(yùn)、抗原呈遞以及免疫應(yīng)答等生理和病理過(guò)程[2-3]。外泌體來(lái)源的微RNA(microRNA，miRNA/miR)是一種長(zhǎng)約22 nt的非編碼內(nèi)源性小RNA，可在轉(zhuǎn)錄后水平負(fù)性調(diào)節(jié)基因的表達(dá)，進(jìn)而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和轉(zhuǎn)移等[4-5]。外泌體源性miRNA并非被動(dòng)釋放，而是響應(yīng)機(jī)體特定刺激下的選擇性分泌。有證據(jù)表明，外泌體源性miRNA在肺癌外泌體源性信息調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中占據(jù)重要地位，參與肺癌的血管生成、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)、腫瘤微環(huán)境的重編程、免疫調(diào)節(jié)及腫瘤細(xì)胞間耐藥性的傳遞，在調(diào)控肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[6-7]?，F(xiàn)就外泌體源性miRNA在肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制予以綜述。

1 外泌體源性miRNA概述

1983年，外泌體首次在綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)[8]，1987年，Johnstone等[9]將其命名為“Exosome”。外泌體是活細(xì)胞分泌的直徑為30～100 nm的囊狀小泡，外部由雙層脂膜構(gòu)成，內(nèi)部包裹著細(xì)胞分泌的各種信息物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、信使RNA、miRNA)，具有發(fā)展為高效藥物載體和基因治療制劑的潛力[10]。1993年，Lee等[11]首次在秀麗隱桿線蟲(chóng)發(fā)現(xiàn)miRNA。隨后，研究發(fā)現(xiàn)，miRNA可通過(guò)與目標(biāo)信使RNA的3′非翻譯區(qū)或開(kāi)放閱讀框區(qū)域結(jié)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄后基因沉默，參與調(diào)控細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展[12-13]。作為臨床檢測(cè)指標(biāo)，外泌體源性miRNA便于取材，易于篩檢。Nik Mohamed Kamal等[14]研究發(fā)現(xiàn)，血清和唾液中的外泌體富集miRNA；其他體液(如尿液、腦脊液、乳汁)中檢測(cè)到的miRNA也主要為外泌體源性miRNA[15]。miRNA通過(guò)與外泌體獨(dú)特的囊泡樣結(jié)構(gòu)結(jié)合，使自身的化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，而外泌體源性miRNA可逃脫核糖核酸酶的消化，在人體循環(huán)中具有較好的生物穩(wěn)定性，通過(guò)與細(xì)胞受體結(jié)合、細(xì)胞質(zhì)膜融合將miRNA遞送至靶細(xì)胞，調(diào)節(jié)靶細(xì)胞的活動(dòng)[16]。

2 外泌體源性miRNA在肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用

2.1外泌體源性miRNA在肺癌血管生成中的作用 血管生成是指從已有的毛細(xì)血管或毛細(xì)血管后靜脈發(fā)展而成的新血管。在正常的生理?xiàng)l件下，血管生成是一個(gè)嚴(yán)格的、多重精確調(diào)節(jié)的過(guò)程。新生血管的生成對(duì)于腫瘤的生長(zhǎng)至關(guān)重要，建立腫瘤的新生血管網(wǎng)絡(luò)是促進(jìn)實(shí)體瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵[17]。

Liu等[18]研究發(fā)現(xiàn)，外泌體源性miR-21能夠促進(jìn)正常肺組織的血管生成，并促進(jìn)其上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，與非吸煙者相比，吸煙者血清中外泌體源性miR-21的表達(dá)水平顯著升高；進(jìn)一步試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，香煙煙霧提取物誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的支氣管上皮細(xì)胞可通過(guò)外泌體將miR-21轉(zhuǎn)移至正常的支氣管上皮細(xì)胞，并通過(guò)促進(jìn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3活化，導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平升高，促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的血管生成和支氣管上皮細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。缺氧是肺癌等實(shí)體瘤的特征之一[19]。缺氧能夠改變肺癌細(xì)胞分泌的外泌體miRNA的種類和含量，而肺癌細(xì)胞分泌的外泌體源性miRNA反過(guò)來(lái)通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，影響肺癌脈管系統(tǒng)生成，介導(dǎo)肺癌細(xì)胞微環(huán)境的低氧進(jìn)化，從而影響腫瘤細(xì)胞的氧氣供應(yīng)和營(yíng)養(yǎng)供給；與正常氧條件下的親代細(xì)胞相比，低氧條件下的肺癌細(xì)胞可產(chǎn)生更多特定種類的外泌體，如肺癌細(xì)胞中的miR-23a水平顯著升高，并通過(guò)外泌體轉(zhuǎn)移至內(nèi)皮細(xì)胞，直接靶向抑制內(nèi)皮細(xì)胞中脯氨酰羥化酶1和脯氨酰羥化酶2的表達(dá)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子-1α堆積，進(jìn)而促進(jìn)肺癌血管生成，增加肺癌細(xì)胞的血流供應(yīng)[20]。因此，有學(xué)者提出，可以通過(guò)檢測(cè)外周血循環(huán)中特定種類的外泌體源性miRNA的變化實(shí)現(xiàn)對(duì)肺癌的早期篩查[21]。在基因調(diào)控方面，低氧條件下，肺癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)的外泌體源性miR-619-5p可通過(guò)靶向抑制鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)因子1.4誘導(dǎo)血管生成，有助于肺癌細(xì)胞獲取更多的血液供應(yīng)以及遠(yuǎn)處遷移、侵襲的機(jī)會(huì)[22]。外泌體源性miR-497可有效抑制腫瘤的生長(zhǎng)以及肝癌衍生生長(zhǎng)因子、細(xì)胞周期蛋白E1和非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)A549細(xì)胞中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A等相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而抑制內(nèi)皮細(xì)胞管狀樣結(jié)構(gòu)形成和肺癌細(xì)胞的遷移[23]。人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten，PTEN)基因是一種磷酸酶，在負(fù)調(diào)控蛋白激酶B(protein kinase B，PKB/Akt)和胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶通路中起核心作用，通過(guò)抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖在血管生成中發(fā)揮關(guān)鍵作用。經(jīng)輻射誘導(dǎo)的肺癌細(xì)胞分泌的外泌體miR-23a水平顯著升高，過(guò)表達(dá)的外泌體源性miR-23a可通過(guò)抑制PTEN的分泌，促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，加速放療環(huán)境中肺癌細(xì)胞的血管生成，增強(qiáng)放療抵抗[24]。另有研究發(fā)現(xiàn)，肺腺癌來(lái)源的miR-142-3p通過(guò)外泌體向內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)移，并通過(guò)抑制人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β受體Ⅰ促進(jìn)血管生成，進(jìn)而促進(jìn)肺癌細(xì)胞的遷移和侵襲[25]。因此，調(diào)控外泌體源性miRNA血管生成有望成為肺癌治療的潛在靶點(diǎn)。

2.2外泌體源性miRNA在肺癌EMT中的作用 EMT是指上皮細(xì)胞通過(guò)特定程序轉(zhuǎn)化為具有間質(zhì)表型細(xì)胞的生物學(xué)過(guò)程，主要表現(xiàn)為典型的上皮細(xì)胞特征的喪失，而出現(xiàn)間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)的特征，如細(xì)胞黏附分子表達(dá)減少、細(xì)胞骨架中角蛋白水平降低、波形蛋白水平升高、細(xì)胞形態(tài)上具有間充質(zhì)的特性等[26]。腫瘤細(xì)胞通過(guò)外泌體源性miRNA影響上皮細(xì)胞信使RNA翻譯，誘導(dǎo)EMT進(jìn)程，使上皮細(xì)胞獲得更高的遷移、侵襲、抗凋亡、降解細(xì)胞外基質(zhì)的能力[27]。

癌癥相關(guān)的成纖維細(xì)胞是腫瘤基質(zhì)不可缺少的組成部分，可通過(guò)分泌細(xì)胞因子和外泌體與細(xì)胞相互作用，并與腫瘤細(xì)胞串?dāng)_，成為腫瘤EMT發(fā)展的一個(gè)重要因素[28]。癌癥相關(guān)的成纖維細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠提高肺癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的能力，增強(qiáng)神經(jīng)鈣黏素和波形蛋白的表達(dá)，抑制上皮鈣黏素的表達(dá)；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，癌癥相關(guān)的成纖維細(xì)胞來(lái)源的外泌體源性miR-210可通過(guò)靶向上游移碼突變體激活PTEN/磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)/Akt通路，促進(jìn)EMT，進(jìn)而促進(jìn)NSCLC的侵襲和轉(zhuǎn)移[29]。另外，肺癌干細(xì)胞來(lái)源的外泌體源性miR-210-3p可靶向結(jié)合成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體樣1并抑制其功能，進(jìn)而上調(diào)神經(jīng)鈣黏素、波形蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶9和基質(zhì)金屬蛋白酶1的表達(dá)，下調(diào)上皮鈣黏素的表達(dá)，從而促進(jìn)肺癌細(xì)胞EMT[30]。Li等[31]通過(guò)微陣列分析將miR-181a鑒定為肺腺癌A549細(xì)胞系中EMT的新型調(diào)節(jié)劑，并通過(guò)功能測(cè)定確定了miR-181a靶向PTEN啟動(dòng)子和調(diào)節(jié)PTEN表達(dá)的作用，與敏感細(xì)胞相比，miR-181a過(guò)表達(dá)時(shí)，對(duì)紫杉醇和順鉑耐藥的肺癌細(xì)胞更易轉(zhuǎn)移和具有EMT特性，同時(shí)PTEN表達(dá)降低，使肺癌細(xì)胞更具侵襲性。Rahman等[32]用來(lái)自高轉(zhuǎn)移性肺癌細(xì)胞和人晚期肺癌血清來(lái)源的外泌體對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞進(jìn)行處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，處理后的支氣管上皮細(xì)胞中的上皮鈣黏素、緊密連接蛋白1(zonula occludens-1，ZO-1)和間質(zhì)中的神經(jīng)鈣黏素、波形蛋白的表達(dá)均顯著增加，證實(shí)來(lái)自高轉(zhuǎn)移性肺癌細(xì)胞和人晚期肺癌血清來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)支氣管上皮細(xì)胞EMT，增強(qiáng)其腫瘤化傾向。

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為具有多種分化潛能的細(xì)胞亞群，是癌癥微環(huán)境的組成部分，可促進(jìn)癌癥的進(jìn)展[33]。用缺氧狀態(tài)下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體處理的肺癌細(xì)胞表現(xiàn)出明顯的EMT，即細(xì)胞形態(tài)轉(zhuǎn)化為紡錘形的間充質(zhì)樣，細(xì)胞內(nèi)波形蛋白和神經(jīng)鈣黏素水平顯著升高；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，外泌體介導(dǎo)的miR-193a-3p、miR-210-3p和miR-5100通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3誘導(dǎo)上皮細(xì)胞EMT，促進(jìn)肺癌的轉(zhuǎn)移[34]。He等[35]研究發(fā)現(xiàn)，在高度轉(zhuǎn)移性肺癌細(xì)胞系及其外泌體中miR-499a-5p的表達(dá)均上調(diào)，過(guò)表達(dá)的外泌體源性miR-499a-5p可通過(guò)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白通路促使內(nèi)皮細(xì)胞中的上皮鈣黏素水平升高，而神經(jīng)鈣黏素、β聯(lián)蛋白和波形蛋白水平均降低，促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞增殖、遷移和EMT。此外，低氧環(huán)境下，肺癌來(lái)源的外泌體源性miR-23a可被肺部?jī)?nèi)皮細(xì)胞直接內(nèi)化吸收，不僅可以促進(jìn)腫瘤血管的生成，還能靶向抑制ZO-1的表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞EMT[20]，增加血管通透性，使肺癌細(xì)胞更易通過(guò)血管內(nèi)皮的間隙。

2.3外泌體源性miRNA在肺癌免疫調(diào)節(jié)中的作用 腫瘤細(xì)胞免疫逃逸可影響腫瘤免疫治療的有效性，外泌體介導(dǎo)的天然免疫細(xì)胞間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)受體分子識(shí)別和信號(hào)啟動(dòng)具有重要作用[36]。在抗腫瘤免疫過(guò)程中，負(fù)責(zé)加工處理抗原的樹(shù)突狀細(xì)胞通過(guò)外泌體將抗原呈遞給殺傷性T細(xì)胞來(lái)觸發(fā)抗腫瘤反應(yīng)[37]。一些miRNA借助外泌體從腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至靶向免疫細(xì)胞，影響機(jī)體免疫效應(yīng)細(xì)胞功能的發(fā)揮，并協(xié)助腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，增強(qiáng)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[38]。Besse等[39]研究發(fā)現(xiàn)，樹(shù)突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體可發(fā)揮自然殺傷細(xì)胞效應(yīng)子的功能，直接激活自然殺傷細(xì)胞，同時(shí)還可增強(qiáng)晚期NSCLC患者體內(nèi)自然殺傷細(xì)胞的殺傷活性。乳腺癌細(xì)胞分泌的miR-231可以借助外泌體的包裹逃脫機(jī)體的免疫監(jiān)控，并通過(guò)外泌體膜上過(guò)表達(dá)的整合素β4與肺表面活性蛋白C相互作用被NSCLC特異性內(nèi)化，形成肺歸巢效應(yīng)；外泌體源性miR-231進(jìn)入肺癌細(xì)胞內(nèi)部后通過(guò)阻斷PTEN/PI3K/Akt信號(hào)通路抑制A549肺癌細(xì)胞的增殖和遷移[40]。Fan等[41]發(fā)現(xiàn)，與正常體重的肺腺癌患者相比，肥胖肺腺癌患者的免疫治療效果更顯著；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，脂肪細(xì)胞來(lái)源的exo-miR-27a-3p可抑制誘導(dǎo)共刺激分子(inducible costimulatory molecule，ICOS)T細(xì)胞增殖和γ干擾素分泌，通過(guò)下調(diào)肥胖肺腺癌患者脂肪細(xì)胞外泌體源性miR-27a-3p的分泌，靶向作用于ICOS相關(guān)基因，可促進(jìn)ICOS+T細(xì)胞增殖和γ干擾素分泌，進(jìn)而影響腫瘤免疫微環(huán)境，抑制肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。因此，通過(guò)研究外泌體源性miRNA在肺癌免疫調(diào)節(jié)中的作用機(jī)制，可以為抑制肺癌進(jìn)展、開(kāi)發(fā)針對(duì)肺癌的免疫療法提供新思路。

2.4外泌體源性miRNA在肺癌腫瘤微環(huán)境中的作用 腫瘤微環(huán)境指腫瘤細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境，除腫瘤細(xì)胞本身外，還包括其周圍的成纖維細(xì)胞、免疫細(xì)胞、炎癥細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞等。腫瘤微環(huán)境被視為腫瘤對(duì)放療和化療產(chǎn)生抵抗的主要影響因素，在腫瘤細(xì)胞的起始、生長(zhǎng)、遷移、侵襲過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用[42]。外泌體源性miRNA被認(rèn)為是腫瘤微環(huán)境的重要信息媒介，腫瘤細(xì)胞釋放特定的外泌體，通過(guò)與微環(huán)境中的其他細(xì)胞相互作用改造腫瘤轉(zhuǎn)移前的微環(huán)境，并通過(guò)局部或遠(yuǎn)距離溝通調(diào)控受體細(xì)胞的表達(dá)，重新編程腫瘤的微環(huán)境，使其更有利于腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[43]。

誘導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)移前的生態(tài)位形成是外泌體源性miRNA改造腫瘤微環(huán)境的重要手段。Lewis肺癌細(xì)胞來(lái)源的外泌體源性miR-3473b被肺成纖維細(xì)胞吞噬，通過(guò)阻礙核因子κB抑制劑δ的功能促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞核因子κB活化和肺癌細(xì)胞的肺內(nèi)定植[44]。增加能量獲取是腫瘤細(xì)胞改造微環(huán)境的重要目的，腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)分泌高水平的外泌體源性miR-122下調(diào)糖酵解中的丙酮酸激酶水平，抑制微環(huán)境中非腫瘤細(xì)胞的葡萄糖攝取，經(jīng)能量代謝重編程，促使腫瘤細(xì)胞獲得更多能量攝入[45]。miR-182可通過(guò)上調(diào)NSCLC細(xì)胞中控制葡萄糖代謝的缺氧誘導(dǎo)因子-1α的表達(dá)促進(jìn)葡萄糖代謝[46]。Zhai等[47]研究發(fā)現(xiàn)，miR-33b可通過(guò)靶向結(jié)合NSCLC細(xì)胞乳酸脫氫酶A的3′非翻譯區(qū)，下調(diào)乳酸脫氫酶A的表達(dá)，從而減少腫瘤細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝入，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。Syndecan-1是一種跨膜蛋白聚糖，表達(dá)于肺上皮細(xì)胞，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、遷移、黏附和存活。Parimon等[48]發(fā)現(xiàn)，缺乏Syndecan-1的肺癌細(xì)胞可以通過(guò)改變癌細(xì)胞釋放的外泌體miRNA的種類和數(shù)量，增強(qiáng)成瘤通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)腫瘤微環(huán)境的形成，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲，因此Syndecan-1表達(dá)缺失的肺癌患者臨床預(yù)后一般較差。另有研究表明，miR-21可借助外泌體從肺腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移至破骨細(xì)胞祖細(xì)胞，并靶向作用于程序性細(xì)胞死亡蛋白4基因，促進(jìn)破骨細(xì)胞成熟和骨基質(zhì)溶解，如骨基質(zhì)溶解過(guò)多，儲(chǔ)存的生長(zhǎng)因子(如人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β受體)則大量釋放到微環(huán)境中，進(jìn)一步促進(jìn)肺癌細(xì)胞的侵襲和骨轉(zhuǎn)移[49]。Lawson等[25]發(fā)現(xiàn)，外泌體源性miR-142-3p不僅可通過(guò)抑制人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β受體Ⅰ促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞血管生成，還可增強(qiáng)肺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的表達(dá)，促進(jìn)肺癌細(xì)胞微環(huán)境的形成。由此可見(jiàn)，外泌體源性miRNA不僅能夠調(diào)控肺癌細(xì)胞自身的微環(huán)境，還能遠(yuǎn)距離誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移前的生態(tài)位形成，影響肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。

2.5外泌體源性miRNA在肺癌耐藥中的作用 耐藥是肺癌復(fù)發(fā)的最常見(jiàn)原因之一，盡管抗耐藥治療已取得一定進(jìn)展，但腫瘤細(xì)胞的耐藥仍是癌癥治療的難點(diǎn)。近年來(lái)，外泌體源性miRNA的發(fā)現(xiàn)為探索腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制提供了新的思路，相關(guān)研究表明，外泌體源性miRNA能夠?qū)⒛退幖?xì)胞的耐藥表型傳遞給敏感細(xì)胞，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞形成耐藥抵抗，促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[50]。

順鉑是腫瘤治療最常用的化療藥物，但隨著治療的進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞逐漸對(duì)順鉑產(chǎn)生耐藥。有研究對(duì)NSCLC患者血清外泌體源性miRNA的分析發(fā)現(xiàn)，順鉑耐藥與順鉑敏感患者體內(nèi)的6種循環(huán)外泌體miRNA(miR-425-3p、miR-1273h、miR-4755-5p、miR-9-5p、miR-146a-5p和miR-215-5p)水平相比差異較大；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，外泌體源性miR-146a-5p水平低的晚期NSCLC患者復(fù)發(fā)率較高，同時(shí)，在順鉑誘導(dǎo)的耐藥過(guò)程中，NSCLC細(xì)胞系或外泌體中的miR-146a-5p表達(dá)逐漸減少，表明miR-146a-5p過(guò)表達(dá)可以逆轉(zhuǎn)肺癌對(duì)順鉑的耐藥性[51-52]。外泌體源性miR-425-3p通過(guò)靶向Akt1上調(diào)自噬過(guò)程，而腫瘤細(xì)胞自噬的增加促進(jìn)了NSCLC細(xì)胞中順鉑耐藥性的發(fā)展，導(dǎo)致藥物治療反應(yīng)降低[53]。另有研究發(fā)現(xiàn)，順鉑可通過(guò)β聯(lián)蛋白信號(hào)通路上調(diào)NSCLC細(xì)胞中外泌體源性miR-425-3p的表達(dá)，過(guò)表達(dá)的外泌體源性miR-425-3p通過(guò)靶向Akt1促進(jìn)受體細(xì)胞中的自噬激活，最終導(dǎo)致化學(xué)抗性；而miR-146a可以特異性結(jié)合細(xì)胞周期蛋白J信使RNA并促使其降解，同時(shí)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞G0/G1期停滯、抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng)并促進(jìn)細(xì)胞凋亡、增加肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性[54-55]。因此，血清外泌體miR-146a-5p和miR-425-3p可作為預(yù)測(cè)順鉑對(duì)NSCLC患者療效及實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)耐藥性的新標(biāo)志物。外泌體源性miR-96在肺癌患者(尤其是高侵襲性肺癌)中的表達(dá)增加，可通過(guò)靶向LMO7(LIM-domain only protein 7)促進(jìn)肺癌進(jìn)展，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性，因此，外泌體源性miR-96被相關(guān)研究認(rèn)定為肺癌的血清生物標(biāo)志物，可作為早期肺癌的臨床篩查指標(biāo)之一[56]。另外，外泌體源性miR-100-5p可以逆轉(zhuǎn)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白的表達(dá)，增強(qiáng)肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性，通過(guò)誘導(dǎo)增加miR-100-5p的分泌，有助于提高順鉑的化療效果[57]。

另外，對(duì)吉西他濱耐藥的肺癌細(xì)胞來(lái)源的外泌體源性miR-222-3p可通過(guò)窩莢蛋白和脂筏依賴的內(nèi)吞途徑向敏感細(xì)胞轉(zhuǎn)移，并通過(guò)直接靶向細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3的啟動(dòng)子，增強(qiáng)敏感肺癌細(xì)胞的遷移、侵襲和抗失巢凋亡能力，同時(shí)也向敏感細(xì)胞傳播吉西他濱抗性[58]。攜帶表皮生長(zhǎng)因子受體T790M突變的肺癌細(xì)胞釋放的外泌體源性miR-522-3p可以通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路在敏感細(xì)胞中傳播吉非替尼耐藥性[59]。Zhang等[60]發(fā)現(xiàn)，對(duì)吉非替尼耐藥的肺癌細(xì)胞通過(guò)外泌體源性miR-214可以將耐藥轉(zhuǎn)移至其受體敏感的細(xì)胞，導(dǎo)致敏感細(xì)胞在后續(xù)的藥物治療中表現(xiàn)出相同耐藥性。

3 小 結(jié)

外泌體源性miRNA作為外泌體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要組成部分，在肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中扮演重要角色。目前關(guān)于外泌體源性miRNA與肺癌侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究多局限于單個(gè)外泌體源性miRNA在肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用，而多個(gè)外泌體源性miRNA共同作用于肺癌調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的相關(guān)研究仍較少。同時(shí)，受限于目前的外泌體提取技術(shù)，外泌體的定性和定量仍較難把控。而外泌體源性miRNA數(shù)量及質(zhì)量的差異是否會(huì)影響外泌體源性miRNA調(diào)控肺癌侵襲、轉(zhuǎn)移的效果目前尚無(wú)定論，同時(shí)多個(gè)外泌體源性miRNA與肺癌信號(hào)通路調(diào)控之間是否存在協(xié)同或拮抗作用也仍未明確。因此，未來(lái)還應(yīng)圍繞外泌體源性miRNA與肺癌侵襲和遷移之間的關(guān)系繼續(xù)深入探索。