王金鐸， 崔云卿， 張 慧， 王艷華， 李英華

（復旦大學附屬上海市第五人民醫(yī)院，上海 200240）

尿液中各項指標的變化在一定程度上可以反映泌尿系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、腎臟系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等的病變程度，是人體具有重要檢驗意義的樣本[1]。與血液樣本等其他樣本相比，尿液樣本種類分為晨尿、隨機尿、餐后尿、24 h尿等，采集程序相對復雜，規(guī)范較為困難。正確、合理、規(guī)范的尿液收集操作是保證尿液檢驗結(jié)果真實、可靠的前提。雖然尿液樣本明確規(guī)定應(yīng)采集中段尿，并在冷藏條件下運送，在盡可能短的時間內(nèi)進行檢測[2]。但在實際操作中，尿液樣本一般由被檢者自行收集，其收集過程的規(guī)范性無法得到保證。為探索非中段晨尿?qū)δ蛞荷笜撕臀⑸餃y定的影響，本研究模擬常規(guī)的體檢條件和體檢流程，探討外陰部清洗與否對尿液樣本各項指標檢測結(jié)果的影響，為晨尿樣本及腎病患者生物樣本庫中尿液樣本的收集提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2020年5月復旦大學附屬上海市第五人民醫(yī)院參加健康體檢的志愿者35名，其中男16名、女19名，年齡7～85歲。所有對象均被明確告知留取中段尿的操作流程和注意事項。收集所有對象晨尿的中段尿樣本。將未清潔外陰部志愿者的晨尿樣本作為未清洗組，其中女性樣本19例、男性樣本16例。為消除由飲食結(jié)構(gòu)變化可能帶來的檢測結(jié)果的變化，以第2天和第3天用50 mL 0.9%NaCl溶液清潔外陰部3次后收集的晨尿樣本作為清洗組，其中男性樣本32例、女性樣本36例。

1.2 方法

尿液樣本以400×g離心10 min，待測。采用cobas C311全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑檢測尿液氯離子（chloridion，Cl-）、鉀離子（kalium ion，K+）、鈉離子（sodion，Na+）濃度。采用cobas 8000全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑測定尿液微量白蛋白（microalbumin，mAlb）、肌酐（creatinine，Cr）、總蛋白（total protein，TP）、α1-微球蛋白（alpha1-microglobulin，α1-MG）、β2-微球蛋白（beta2-microglobulin，β2-MG）、IgG、轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TF）、鈣（calcium，Ca）、磷（phosphorus，P）和葡萄糖（glucose，Glu）。采用VITEK 2 Compact自動化鑒定藥敏儀（法國生物梅里埃公司）對尿液中的微生物進行菌落計數(shù)，采用Maldi-Tof Biotype質(zhì)譜儀（德國BRUKER公司）鑒定菌種。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示，多組間比較采用方差分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

未清洗組男、女性尿液樣本菌落總數(shù)差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），細菌種類以葡萄球菌、糞腸球菌、格式乳桿菌和卷曲乳桿菌為主；尿液Cl-、K+、Na+、Alb、Cr、TP、α1-MG、β2-MG、IgG、TF、Ca、P和Glu差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。清洗組男、女性尿液樣本菌落總數(shù)、Cl-、Na+、Cr、α1-MG、IgG、TF差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），K+、Ca、P 、Alb、β2-MG和Glu差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。清洗組男性與未清洗組男性比較，尿液IgG差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），尿液菌落總數(shù)、Cl-、K+、Na+、Alb、Cr、TP、α1-MG、β2-MG、TF、Ca、P和Glu差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。清洗組女性與未清洗組女性比較，各項指標差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

表1 清洗組與未清洗組男性、女性尿液樣本各項指標檢測結(jié)果的比較 ±s

表1 清洗組與未清洗組男性、女性尿液樣本各項指標檢測結(jié)果的比較 ±s

注：與未清潔組男性比較，*P<0.05、**P<0.01；與清潔組男性比較，#P<0.05、##P<0.01；空白表示無此項。

菌落總數(shù)（CFU/L）未清洗組男性 16 3.67±0.75 118.56±10.84 14.25±1.45 30.27±2.80 148.38±10.64 75.13±6.74 9.42±3.80女性 19 5.32±1.52 99.85±6.78 11.23±1.25 29.96±4.11 132.16±12.13 83.84±12.40 42.32±8.37**##清洗組男性 32 7.34±1.72 125.37±7.62 16.38±1.00 39.76±3.48 146.12±8.07 82.28±5.91 6.25±1.88女性 36 4.19±0.80 107.91±10.95# 12.47±1.20# 33.13±3.42 120.90±8.21# 68.83±5.57 36.54±6.32##組別 α1-MG/（mg/L）組別 例數(shù) mAlb/（mg/L）Cl-/（mmol/L）Cr/（mmol/L）K+/（mmol/L）Na+/（mmol/L）TP/（mg/L）IgG/（mg/L）β2-MG/（mg/L）TF/（mg/L）Ca/（mmol/L）P/（mmol/L）Glu/（mmol/L）未清洗組男性 1.66±0.28 0.13±0.02 0.70±0.18 0.74±0.08 4.12±0.57 26.74±2.74 0.43±0.04女性 2.13±0.97 0.19±0.05 1.01±0.37 0.78±0.09 4.15±0.60 21.26±2.68 0.36±0.07清洗組男性 3.06±0.84 0.11±0.01 1.95±0.40* 0.81±0.07 4.33±0.37 30.10±2.33 0.48±0.04女性 1.26±0.27# 0.17±0.03 0.79±0.24## 0.64±0.04# 3.35±0.27 23.81±2.45 0.37±0.04

3 討論

本研究結(jié)果顯示，未清洗組男性與女性的尿液菌落總數(shù)雖均在參考區(qū)間（<100 CFU/L）內(nèi)，但女性的菌落總數(shù)遠高于男性（P<0.01），其他生化指標男、女性之間差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。女性菌落總數(shù)遠高于男性可能是導致女性尿路感染率高于男性的原因之一[3]。

本研究結(jié)果顯示，清洗組女性菌落總數(shù)遠高于男性（P<0.01），說明進行簡單的外陰部清潔操作后女性尿液樣本受微生物污染的程度仍顯著高于男性。清洗組男性尿液α1-MG、IgG、TF水平均高于女性（P<0.05），可能與男性清潔后微生物減少、降解效應(yīng)降低有關(guān)。由此可見，雖然男、女性菌落總數(shù)均在參考區(qū)間內(nèi)，但帶菌量的差異可能會導致微生物的降解作用出現(xiàn)明顯不同，進而使尿液中蛋白類指標的檢測結(jié)果出現(xiàn)差異。體檢時的晨尿樣本一般由體檢者自行在家取樣，然后攜帶至體檢點進行處理并檢測，從樣本收集到檢測時間的間隔一般為1～3 h[4]。郭瑞瑩[5]的研究結(jié)果顯示，腸球菌、大腸埃希菌、葡萄球菌均對尿液紅細胞的檢測結(jié)果有影響。本研究在尿液樣本中分離到的菌株包括糞腸球菌、葡萄球菌、格式乳桿菌和卷曲乳桿菌。但何種細菌對尿液蛋白類指標檢測的影響最大以及菌落總數(shù)低于多少在4 h內(nèi)不影響蛋白類指標檢測還有待于進一步研究。本研究結(jié)果還顯示，清洗組男性尿液IgG水平高于未清洗組男性（P<0.05）。提示外陰部清潔操作對男性尿液IgG水平有明顯影響。另外，男性尿液Cl-、Na+水平均高于女性（P<0.05），這可能與男性采用0.9%NaCl溶液清潔后取樣易受0.9%NaCl溶液殘留影響有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，清洗組女性與未清洗組女性比較，尿液各項指標差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。說明女性在采集中段尿時，僅依靠簡單的清洗擦拭操作并不能降低細菌污染對尿液各項指標檢測結(jié)果的影響。因此，在留取用于生物樣本庫的樣本時，建議女性在采集中段晨尿樣本前，使用外陰部用清潔類產(chǎn)品徹底清潔后再進行樣本采集。另外，樣本庫的晨尿樣本采集也可以考慮用二次晨尿采集的方式降低尿液樣本從收集到檢測的時間間隔過長的影響[6-7]。

尿液樣本不加防腐劑在常溫下保存對尿液菌落總數(shù)影響較大[8]。在實際工作中，體檢晨尿樣本采集后低溫運輸較為困難。因此，建議在向體檢者發(fā)放晨尿樣本采集瓶時除發(fā)放冰袋外，還應(yīng)發(fā)放對檢測指標不產(chǎn)生影響的防腐劑，如甲苯、二甲苯、尼伯金乙酯、戊二醛、疊氮化鈉、對羥基苯甲酸酯、尼伯金丁酯等，這對于保證尿液檢測結(jié)果的準確有著重要的意義[9-10]。

綜上所述，簡單的外陰部清潔操作對男性尿液蛋白類指標的檢測有明顯影響，但對女性尿液相關(guān)指標的檢測無影響。中段尿采集是否應(yīng)在執(zhí)行清潔操作后進行值得臨床關(guān)注。