宋玉梅

（昌樂縣畜牧業(yè)發(fā)展中心山東濰坊262410）

我國是全球最大的養(yǎng)豬國，肉豬出欄量穩(wěn)居世界第一，幾乎占全球一半的市場份額。面對高額的豬肉消費市場，傳統(tǒng)養(yǎng)豬業(yè)已經(jīng)遠遠滿足不了市場需求，只能走規(guī)?；B(yǎng)殖之路。尤其是進入21世紀以來，國內(nèi)大量的規(guī)模化養(yǎng)殖場不斷涌現(xiàn)，年出欄量十萬頭以上的豬場比比皆是，并在近幾年達到高峰。在這種規(guī)?；B(yǎng)殖模式下，豬的飼養(yǎng)密度極高，一旦出現(xiàn)大規(guī)模的疫病暴發(fā)帶來的損失無疑是巨大的，因此疫病防控成為重中之重，尤其是高度傳染性疾病。本文所分析的豬水皰性口炎即是這種一類急性傳染病，本病是由水皰性口炎病毒引起，呈高度接觸性傳染。臨床上以舌、唇、口腔黏膜、乳頭和蹄冠等處發(fā)生水皰為主要特征。本病發(fā)病率和死亡率較低，但由于檢疫、貿(mào)易限制和降低飼料轉(zhuǎn)化率而導(dǎo)致經(jīng)濟損失。本病在全球主要養(yǎng)豬國家都有出現(xiàn)，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將本病列為必須通報疫病。鑒于國內(nèi)近年來大規(guī)模的引種，更應(yīng)該保持足夠的警惕和重視，做好防控。

1 病原

水皰性口炎病毒（vesicular stomatitis virus，VSV）為彈狀病毒科水皰病毒屬成員，病毒粒子為子彈狀或圓柱狀。病毒囊膜上均勻密布有長約10nm的纖突。VSV基因組為不分節(jié)段的單股負鏈RNA，長約11kb，分別編碼核蛋白（N），磷酸蛋白（P）、基質(zhì)蛋白（M）、糖蛋白（G）及RNA聚合酶（L）等5種主要病毒蛋白。

根據(jù)中和試驗和補體結(jié)合試驗，本病毒分為2個血清型，其代表株分別為印第安納（Indiana，IN）型和新澤西（New Jersey，NJ）型。根據(jù)抗原交叉反應(yīng)性，印第安納型又分為3個亞型，分別為IN1、IN2（Coral）和IN3（Ala-goas）。根據(jù)病毒核酸酶指紋圖譜和毒株間的進化關(guān)系，新澤西型至少分為3個亞型[1]。

本病毒在大多數(shù)脊椎動物、鳥類、爬行動物、魚類及昆蟲的細胞培養(yǎng)上可以生長。VSV感染脊椎動物細胞后，18～24h即可引起細胞快速萎縮，脫落，在動物的單層原代腎細胞產(chǎn)生不同大小的蝕斑。而感染昆蟲細胞則引起持續(xù)性感染，無細胞病變。

本病毒對理化因子的抵抗力與口蹄疫病毒（FMDV）相似，56℃30min、可見光、紫外線及脂溶劑（乙醚、氯仿）都能使其滅活。該病毒可在土壤中于4～6℃時存活若干天。0.05%結(jié)晶紫可使其失去感染性，不耐酸。

2 流行病學(xué)

患病動物和感染動物是傳染源，病毒主要存在于感染動物的鼻、口、舌、冠狀帶和乳頭。血液和尿液里沒有發(fā)現(xiàn)病毒，糞便中罕見，但唾液和水皰液中含有大量病毒。臨床癥狀出現(xiàn)后直到第10天，在上皮樣品和口咽液里還能發(fā)現(xiàn)病毒。病毒主要通過接觸損傷的呼吸道和消化道黏膜而傳染。雙翅目昆蟲可充當(dāng)傳播媒介。本病主要侵害家豬和野豬。此外，牛、馬、鹿、刺猬、雪貂、豚鼠、倉鼠、小鼠、雞都易感染。綿羊、山羊、犬和兔不易感染該病，發(fā)病率和死亡率都較低。

VSV感染人類引起感冒樣癥狀，如發(fā)燒、肌痛和嚴重頭痛。

3 主要癥狀與病理變化

本病潛伏期一般2～5d不等。豬最初的癥狀為體溫升高（達40～41℃），倦怠、食欲不振和流涎增多。感染后3～4d口腔（主要是舌部）和鼻端先發(fā)生水皰，食欲減退，磨牙，流涎，水皰很易破裂。此期非常短，隨后表皮脫落留下糜爛和潰瘍，體溫也在幾天內(nèi)恢復(fù)正常。隨之蹄冠和趾間發(fā)生水皰，不久破裂而形成痂塊，蹄冠水皰病灶擴大則可使蹄殼脫落。病程約2周，轉(zhuǎn)歸良好，病灶不留痕跡[2]。

組織病理學(xué)上，VSV水皰病變從棘層開始，伴有細胞間的水腫和微皰，接著棘層松解。在水皰早期，上皮細胞通過細胞間的橋粒連接在一起，形成網(wǎng)狀的結(jié)構(gòu)。后來，出現(xiàn)感染的、死亡的角質(zhì)化細胞和嚴重的炎癥細胞浸潤，大多是中性粒細胞。病變很少侵害到基底層，基底層上層分離，微皰合并，水皰液蓄積、充滿水皰。

4 診斷要點

4.1 一般診斷

由于本病多發(fā)生在夏季和秋初，有明顯的季節(jié)性，發(fā)病率和死亡率低，以及發(fā)病動物在舌面、鼻端和唇部上皮發(fā)生水皰，并伴隨食量減少和流涎，隨后蹄冠部、趾間發(fā)生水皰，以蹄冠部尤為嚴重，感染后的動物大約2周后轉(zhuǎn)歸良好。這些臨床特征可作為初步診斷本病的依據(jù)。

4.2 病原學(xué)診斷

1）病毒分離鑒定：①樣品采集，水皰液、水皰皮及水皰拭子是病原分離的最佳樣品。但是，在樣品采集過程中，要注意人員的安全，避免感染；②分離的細胞可采用Vero細胞、BHK-21細胞和IBRS-2細胞。本病毒能在這三種細胞中產(chǎn)生病變。接種后24h后將含細胞的玻片取出，做免疫熒光試驗。其他已接種的細胞繼續(xù)培養(yǎng)，觀察細胞病變，第7天時作免疫熒光檢測。細胞病變與熒光檢測均為陽性時方能判定病料含有病毒。其他類癥病毒，如口蹄疫病毒能在BHK-21細胞和IBRS-2細胞中產(chǎn)生病變，而SVD卻只能在IBRS-2細胞中出現(xiàn)細胞病變。病毒分離也可以用8～10日齡雞胚卵黃囊接種或用2～7日齡未斷乳的小鼠進行。

2）病毒中和試驗：按照常規(guī)，將病毒與標準血清作用后，接種細胞或動物，觀察細胞是否有病變或動物是否有癥狀。

3）ELISA檢測抗原：根據(jù)使用血清的特性，本法能檢測所有血清型的病毒，也可以進行病毒血清型的鑒定。

4）分子生物學(xué)診斷：已建立RT-PCR檢測VSV，也有利用多重RT-PCR快速鑒別豬口蹄疫病毒、豬水皰病毒和豬水皰性口炎病毒。RT-PCR技術(shù)不但能準確檢測VSV，還可區(qū)別VSV的兩種血清型。近年來，還有基因芯片和實時定量RT-PCR用于該病毒檢測的報道。

4.3 血清學(xué)診斷

1）補體結(jié)合試驗：可用于檢出動物感染4～5d產(chǎn)生的特異性抗體，能用于疫病的早期檢測。本法是國際貿(mào)易指定試驗之一。

2）血清中和試驗：待檢血清經(jīng)56℃滅活30min，再與1,000個TC ID50的病毒混合，接種Ve ro細胞和IBRS-2細胞。如沒有出現(xiàn)病變，即可認為獲得保護，血清為陽性。本法也是國際貿(mào)易指定試驗。

3）ELISA：OIE推薦使用液相阻斷ELISA方法，用病毒糖蛋白為抗原，可降低非特異性反應(yīng)。

5 防治措施

目前，我國還沒有該病的豬用疫苗，主要依靠綜合性預(yù)防措施，包括加強入境口岸及國內(nèi)流通領(lǐng)域的檢疫以防止帶毒豬的流動，嚴格檢疫和淘汰帶毒豬，制定并執(zhí)行科學(xué)合理的免疫程序，改善豬舍環(huán)境衛(wèi)生及飼養(yǎng)管理，防止豬發(fā)生皮膚外傷導(dǎo)致感染，加強生物安全措施等。一旦發(fā)病，及時隔離病豬或可疑病豬，封鎖疫點，加強消毒，對病豬進行撲殺與無害化處理。用2%～4%氫氧化鈉溶液、10%石灰乳、0.2%～0.5%過氧乙酸等消毒液進行消毒。封鎖14d后，如果沒有新的病畜出現(xiàn)，通過終末消毒后，可按規(guī)定解除隔離封鎖。

6 診療注意事項

本病應(yīng)該注意與豬口蹄疫、豬水皰病和豬水皰疹等疾病相區(qū)分。主要是從感染宿主動物的種類、接種細胞后發(fā)生病變的細胞種類以及引起實驗小鼠死亡的日齡進行區(qū)分。必要時，對部分重要基因進行PCR擴增和序列分析，可以達到確診的目的。█