○潘忠斌

我國(guó)是世界茶葉生產(chǎn)大國(guó)，茶葉加工中獲得的茶多酚具有抗氧化、抗細(xì)菌感染、抵抗輻射、提高機(jī)體免疫力的功效。適量的茶多酚可以有效的促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)，提高機(jī)體免疫力。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)草魚(yú)飼喂含茶多酚的飼料，了解添加茶多酚對(duì)草魚(yú)免疫指標(biāo)的影響、最合適添加濃度及人工感染嗜水氣單胞菌的成活率。

1 .材料和方法

1.1 飼料

本試驗(yàn)選用正大草魚(yú)魚(yú)苗專(zhuān)用飼料F3,產(chǎn)品成分表如表1。將選用的飼料進(jìn)行破碎后按照試驗(yàn)要求添加茶多酚，配制成5種含量不同的飼料，并將破碎后的飼料制為2-3mm的顆粒。

表1 選用飼料成分表

1.2 試驗(yàn)魚(yú)選擇及管理

試驗(yàn)用的草魚(yú)幼魚(yú)選擇平均體重為（16.33±0.11）g的草魚(yú)魚(yú)苗450尾，魚(yú)苗健壯，隨機(jī)將草魚(yú)的幼魚(yú)分為5組，每個(gè)試驗(yàn)組90尾，3個(gè)重復(fù)，每個(gè)網(wǎng)箱飼養(yǎng)30尾，飼養(yǎng)于15個(gè)網(wǎng)箱內(nèi)。試驗(yàn)前將草魚(yú)停食48小時(shí)，然后按照試驗(yàn)分組投喂含量茶多酚不同的飼料，每日飼喂兩次，保證在20分鐘內(nèi)吃完且無(wú)殘留餌料。飼喂60天后接種嗜水氣單胞菌，繼續(xù)飼喂15天。試驗(yàn)用的魚(yú)按照分組飼養(yǎng)在不同的網(wǎng)箱內(nèi)，水溫在18-24℃左右，pH值6.8-7.5，溶氧保持在5mg/L以上，水池內(nèi)配備過(guò)濾以及增氧設(shè)備。

1.3 樣本采集

試驗(yàn)結(jié)束后，停食24小時(shí)，在每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)選3尾，采集尾靜脈血，將采集的試驗(yàn)組草魚(yú)靜脈血液進(jìn)行3000r/分鐘離心，離心10分鐘后緩慢吸取上清液，放置于-20℃冰箱內(nèi)盡快進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 血清的免疫指標(biāo)

本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的血清指標(biāo)為：超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、堿性磷酸酶（AKP）三種項(xiàng)目，試劑采購(gòu)自某生物工程研究所。

1.5 攻毒試驗(yàn)

采集血清后，將每組隨機(jī)選取草魚(yú)20尾，設(shè)置3個(gè)重復(fù)，將試驗(yàn)草魚(yú)每尾注射0.2mL濃度為1.6×108cfu/mL的嗜水氣單胞菌，觀察15天內(nèi)的死亡情況，每天均進(jìn)行詳細(xì)的記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶多酚對(duì)草魚(yú)血清免疫指標(biāo)的影響

表2 結(jié)果顯示，在草魚(yú)飼料中添加茶多酚后超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、堿性磷酸酶（AKP）這三個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的活性均高于未添加茶多酚的對(duì)照組，且當(dāng)飼料中添加的茶多酚含量為500mg/kg和700mg/kg的三個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的數(shù)值明顯高于其他組（P＜0.05），但700mg/kg數(shù)據(jù)有所下降，說(shuō)明飼料中添加茶多酚量為500mg/kg可以顯著提高SOD、CAT、ASP的活性。

表2 試驗(yàn)組飼料不同茶多酚含量的血清免疫指標(biāo)

2.2 飼喂茶多酚對(duì)感染嗜水氣單胞菌存活率的影響

將一定濃度的嗜水氣單胞菌注射于草魚(yú)體內(nèi)發(fā)生感染，各組草魚(yú)的存活率如圖1，在感染后的15天中，5個(gè)試驗(yàn)組的存活率均在下降，但是相比較而言，飼喂含茶多酚飼料的草魚(yú)存活率高于對(duì)照組，尤其是試驗(yàn)組的茶多酚含量為500mg/kg、700mg/kg與其他組差異顯著（P＜0.05）

圖1 試驗(yàn)組飼喂茶多酚感染嗜水氣單胞菌存活率

3 討論

茶多酚作為一種在茶中提取的物質(zhì)，具有抗氧化功能，降脂功能以及抗菌抗病毒的功能。目前茶多酚在畜禽養(yǎng)殖業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)等均有一定的應(yīng)用并獲得了較好的效果。2012年劉振東對(duì)茶多酚對(duì)羅非魚(yú)生長(zhǎng)情況等免疫指標(biāo)進(jìn)行研究，結(jié)果顯示飼喂飼料茶多酚含量為133mg/kg時(shí)的羅非魚(yú)生長(zhǎng)狀態(tài)、增重情況、非特異性免疫情況優(yōu)于其他實(shí)驗(yàn)組。2017年崔光等研究了飼糧中添加茶多酚對(duì)于育成前期水貂的生長(zhǎng)以及營(yíng)養(yǎng)情況的影響，結(jié)果顯示在日糧中添加0.05%的茶多酚可以有效的提高水貂鈣磷比例的消化，更有意義生長(zhǎng)。2020年陳明等研究了茶多酚對(duì)蘇姜育肥豬的肉品質(zhì)以及生長(zhǎng)性能進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示使用含量為300mg/kg時(shí)的飼料效果最佳。2021年蔣磊等研究了茶多酚對(duì)于肉雞生長(zhǎng)性能以及肉品質(zhì)的影響，結(jié)果顯示添加量為0.04%更有益于蛋雞的生長(zhǎng)和產(chǎn)出更高品質(zhì)的肉。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)草魚(yú)飼喂含不同濃度茶多酚的飼料，了解喂食60天后血清學(xué)免疫指標(biāo)，免疫指標(biāo)顯示在飼喂含量為500mg/kg時(shí)指標(biāo)數(shù)值最佳，且在后續(xù)的攻毒試驗(yàn)組中，飼喂含茶多酚500mg/kg、700mg/kg的草魚(yú)生存率最高。

機(jī)體抗氧化能力的三種指標(biāo)在飼喂含有不同濃度的茶多酚均有所提高，說(shuō)明了飼喂茶多酚可以有效的提高草魚(yú)機(jī)體的抵抗力。嗜水氣單胞菌是一種主要通過(guò)腸道感染的致病菌，在接種病菌后會(huì)引起草魚(yú)出現(xiàn)全身癥狀，當(dāng)機(jī)體的免疫力得到有效的提高后可以防止該種細(xì)菌的感染，本試驗(yàn)采用的不同濃度茶多酚飼料均起到了提高血清免疫指標(biāo)的作用，血清檢測(cè)指標(biāo)隨著濃度的升高而升高，在飼喂?jié)舛葹?00mg/kg的試驗(yàn)組中檢測(cè)指標(biāo)有所下降，主要原因是茶多酚濃度較高不能完全吸收起到了抑制的作用。機(jī)體抗病能力的提高有效的提高了草魚(yú)感染嗜水氣單胞菌后的生存率。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，通過(guò)飼喂飼料添加劑，提高抗病水平，可以有效的提高抗病力，為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)更好的效益。

4 結(jié)論

茶多酚作為茶葉中提取的一種可以有效增加機(jī)體免疫力，抑制病菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，應(yīng)用于草魚(yú)的養(yǎng)殖中會(huì)起到一定的積極作用，有效的提高養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益，本研究通過(guò)對(duì)草魚(yú)的血清學(xué)免疫指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，感染試驗(yàn)組草魚(yú)嗜水氣單胞菌的生存率的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，草魚(yú)飼料中添加含量為500mg/kg的茶多酚更有益于提高草魚(yú)的免疫力。

（通聯(lián)：231300，安徽六安舒城縣水產(chǎn)發(fā)展中心，18056479107）