李大命 劉洋 唐晟凱 劉燕山 蔣琦辰 何浩然 沈冬冬 張彤晴

摘要：為探究滆湖鲌類國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)主要保護(hù)對象3種鲌類遺傳資源狀況，利用線粒體DNA COⅠ基因序列評價(jià)3種鲌類的遺傳多樣性及種群歷史動(dòng)態(tài)。通過PCR技術(shù)和測序技術(shù)，獲得長度為630 bp COⅠ基因片段。序列分析結(jié)果表明，3種鲌類COⅠ基因序列堿基組成相似，且具有明顯堿基組成偏向性，A+T的含量高于G+C的含量。翹嘴鲌的46條COⅠ基因片段發(fā)現(xiàn)4個(gè)變異位點(diǎn)，定義了4種單倍型（Hq1-Hq4），翹嘴鲌的單倍型和核苷酸多樣性指數(shù)分別為0.422和0.00 085;蒙古鲌的20條COⅠ基因片段發(fā)現(xiàn)4個(gè)變異位點(diǎn)，定義4種單倍型（Hm1-Hm4），蒙古鲌的單倍型和核苷酸多樣性指數(shù)分別為0.695和0.001 90;達(dá)氏鲌的41條COⅠ基因片段發(fā)現(xiàn)4個(gè)變異位點(diǎn)，定義5種單倍型（Hd1-Hd5），達(dá)氏鲌的單倍型和核苷酸多樣性指數(shù)分別為0.230和0.000 53。中性檢驗(yàn)和歧點(diǎn)分布分析顯示，3種鲌類在歷史進(jìn)化過程中經(jīng)歷了不明顯的種群擴(kuò)張。整體來看，滆湖鲌類國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)3種鲌類的遺傳多樣性水平較低，種群遺傳組成趨于單一化，需要采取措施增加鲌類種群數(shù)量，提高其遺傳多樣性水平。

關(guān)鍵詞：國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū);遺傳多樣性;COⅠ基因;翹嘴鲌;蒙古鲌;達(dá)氏鲌

中圖分類號：S917.4;S931?? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2021）20-0177-05

收稿日期：2021-04-08

基金項(xiàng)目：江蘇省水生生物資源重大專項(xiàng)暨首次水生野生動(dòng)物資源普查（編號：ZYHB16-3）;2019年淡水漁業(yè)資源監(jiān)測（編號：2019-SJ-018-2）;2020年漁業(yè)生態(tài)監(jiān)測（編號：2020-SJ-016-2）。

作者簡介：李大命（1981—），男，河南省汝南人，博士，副研究員，主要從事大水面漁業(yè)資源監(jiān)測和評估研究。E-mail：ldm8212@126.com。

國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)是依法予以特殊保護(hù)和管理的水產(chǎn)種質(zhì)資源主要生長繁殖區(qū)域，以實(shí)現(xiàn)水產(chǎn)種質(zhì)資源及其生存環(huán)境的保護(hù)和合理利用，水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)的建立對于保護(hù)水產(chǎn)種質(zhì)資源起到重要作用[1]。多年來，受氣候變化、過度捕撈、環(huán)境污染、工程建設(shè)的影響，水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)的生態(tài)環(huán)境及主要保護(hù)對象受到巨大威脅，亟待開展水產(chǎn)種質(zhì)資源遺傳狀況的研究和保護(hù)[2]。滆湖鲌類國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)位于江蘇省常州市武進(jìn)區(qū)西南處滆湖水域的北端，保護(hù)區(qū)面積為1 520 hm2，其中核心區(qū)面積509 hm2，實(shí)驗(yàn)區(qū)面積1 011 hm2。保護(hù)區(qū)特別保護(hù)期為全年，主要保護(hù)對象為翹嘴鲌（Culter alburnus）、蒙古鲌（Culter mongolicus）及達(dá)氏鲌（Culter dabryi）。迄今，尚無有關(guān)于保護(hù)區(qū)保護(hù)對象3種鲌類遺傳狀況的研究。

遺傳多樣性是評價(jià)物種資源狀況的一個(gè)重要指標(biāo)，是物種適應(yīng)周圍環(huán)境變化、維持生存和進(jìn)化的物質(zhì)基礎(chǔ)[3]。因此，掌握物種的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)是開展生物種質(zhì)資源保護(hù)和利用的前提和基礎(chǔ)。魚類的線粒體基因組是一種雙鏈DNA分子，具有分子小、結(jié)構(gòu)簡單、編碼效率高、母系遺傳、重組率低、進(jìn)化速率快等特點(diǎn)，已成為群體遺傳學(xué)和系統(tǒng)學(xué)研究的重要分子標(biāo)記[4-5]。COⅠ基因是位于線粒體DNA的蛋白質(zhì)編碼基因，其長度適宜，進(jìn)化速度適中又相對保守，被廣泛應(yīng)用于魚類物種鑒定及群體遺傳學(xué)領(lǐng)域，研究結(jié)果為認(rèn)識魚類種質(zhì)遺傳資源提供了重要依據(jù)[6-9]。

本研究利用線粒體DNA的COⅠ基因序列，首次探討滆湖鲌類國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)主要保護(hù)對象的遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)，研究結(jié)果可為掌握3種鲌類的種質(zhì)資源遺傳狀況、科學(xué)保護(hù)及合理利用水產(chǎn)種質(zhì)資源提供重要依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集和處理

2019年7—11月和2020年5月、9月，在滆湖鲌類國家級自然保護(hù)區(qū)開展?jié)O業(yè)資源調(diào)查。采用三層刺網(wǎng)采集魚類樣本，魚類鑒定依據(jù)《江蘇魚類志》[10]。共采集翹嘴鲌46尾，蒙古鲌20尾，達(dá)氏鲌41尾，測定樣本體長與體質(zhì)量?，F(xiàn)場剪取樣本的肌肉組織，置于無水乙醇中保存，帶回實(shí)驗(yàn)室用于提取基因組DNA。

1.2 DNA提取、PCR和測序

采用廣譜性基因組提取試劑盒提取肌肉組織基因組DNA。利用瓊脂糖凝膠電泳檢驗(yàn)DNA完整性及紫外分光光度計(jì)測定DNA濃度。

COⅠ基因擴(kuò)增引物為F1：5′-TCAACCAACCACAAAGACATTGGCAC-3′和R1：5′-TAGACTTCTGGGTGGCCAAAGAATCA-3′[11]。COⅠ基因的PCR體系為50.0 μL，其中，含有10×PCR Buffer （含 20 mmol/L Mg2+）5.0 μL，Taq DNA polymerase（5 U/μL）0.4 μL，dNTP（各2.5 mmol/L）4.0 μL，上、下游引物（10 μmol/L）各2.0 μL，DNA 模板1.0 μL（80 ng/μL），剩余體積用超純水補(bǔ)足。PCR程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性4 min;94 ℃變性40 s，55 ℃退火40 s，72 ℃延伸50 s，進(jìn)行30個(gè)循環(huán);最后72 ℃延伸5 min，4 ℃保存。

利用瓊脂糖凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)，將合格的PCR產(chǎn)物送生工生物工程（上海）股份有限公司進(jìn)行雙向測序。

1.3 序列分析

使用BioEdit7.05.3軟件[12]讀取序列并輔以人工校對，利用Clustal X1.83軟件[13]進(jìn)行多序列比對。采用MEGA 7.0軟件[14]計(jì)算堿基組成、變異位點(diǎn)及保守位點(diǎn)，計(jì)算種內(nèi)及種間的遺傳距離，采用鄰接法（Neighbor-joining，NJ）構(gòu)建3種鲌類單倍型的分子系統(tǒng)發(fā)育樹。利用DnaSP 6.0軟件[15]確定單倍型種類和個(gè)數(shù)，計(jì)算單倍型多樣性指數(shù)（h）和核苷酸多樣性指數(shù)（π），并進(jìn)行Tajimas D和Fus Fs中性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 COⅠ基因序列堿基組成

經(jīng)比對和分析，獲得3種鲌類COⅠ基因片段，長度為630 bp，無堿基插入或缺失。翹嘴鲌4種堿基A、T、G、C的平均含量分別為26.0%、28.3%、18.0%和27.7%。同樣，蒙古鲌4種堿基的平均含量分別為25.8%、27.3%、18.2%和28.7%，達(dá)氏鲌4種堿基的平均含量分別為26.3%、28.7%、17.6%和27.4%。由表1可知，3種鲌類的堿基組成相近，堿基G的含量最低，堿基A+T含量高于 G+C 含量，表現(xiàn)出明顯堿基偏向性，其中，達(dá)氏鲌的A+T含量（55.0%）最高，蒙古鲌的A+T含量（53.1%）最低。

2.2 群體遺傳多樣性

由表2可知，翹嘴鲌46條COⅠ基因序列有4個(gè)變異位點(diǎn)，其中，1個(gè)是單一信息位點(diǎn)，3個(gè)是簡約信息位點(diǎn)，定義4種單倍型，單倍型多樣性和核苷酸多樣性分別為0.422和0.000 85;蒙古鲌20條 COⅠ 基因序列有4個(gè)變異位點(diǎn)，全部是簡約信息位點(diǎn)，定義4種單倍型，單倍型多樣性和核苷酸多樣性分別為0.695和0.001 90;達(dá)氏鲌41條COⅠ基因序列有4個(gè)變異位點(diǎn)，其中，3個(gè)是單一信息位點(diǎn)，1個(gè)是簡約信息位點(diǎn)，定義5種單倍型，單倍型多樣性和核苷酸多樣性分別為0.230和0.005 3。整體來看，3種鲌類的遺傳多樣性較低，其中蒙古鲌遺傳多樣性最高，達(dá)氏鲌遺傳多樣性最低。

翹嘴鲌群體有4種單倍型（Hq1～Hq4）組成，其中，單倍型Hq2數(shù)量最多，有34個(gè)，占群體比例為73.9%，單倍型Hq4有2個(gè)，單倍型Hq1和Hq3各有1個(gè);蒙古鲌群體有4種單倍型（Hm1～Hm4）組成，單倍型Hm2數(shù)量最多，有10個(gè)，占群體的比例為50.0%，單倍型Hm1和Hm4各有4個(gè)，單倍型Hm3有2個(gè);達(dá)氏鲌群體有5種單倍型（Hd1～Hd5）組成， 單倍型Hd1數(shù)量最多，有36個(gè)，占群體的比達(dá)87.8%，單倍型Hd4有2個(gè)，單倍型Hd2、Hd3和Hd5各有1個(gè)。

2.3 種內(nèi)和種間遺傳距離

3種鲌類的種內(nèi)遺傳距離均為0.000～0.005，翹嘴鲌和達(dá)氏鲌的種內(nèi)遺傳距離均值為0.001，蒙古鲌的種內(nèi)遺傳距離均值為0.002。3種鲌類的種間遺傳距離為0.031～0.043，其中，蒙古鲌和達(dá)氏鲌間的遺傳距離最大，蒙古鲌和翹嘴鲌之間的遺傳距離最小。種內(nèi)遺傳距離均小于2%，種間遺傳距離為種內(nèi)遺傳距離的15.5～43.0倍（表3）。

2.4 分子系統(tǒng)發(fā)育

以鯉（Cyprinus carpio，MK843657.1）為外類群，基于NJ法構(gòu)建鲌類的分子系統(tǒng)發(fā)育樹，并應(yīng)用Bootstrap（重復(fù)次數(shù)1 000）檢驗(yàn)聚類樹各分支置信度。由圖1可知，3種鲌類均單獨(dú)聚為獨(dú)立分支，且節(jié)點(diǎn)的置信度水平較高，翹嘴鲌分支的支持率為99%，蒙古鲌和達(dá)氏鲌的分支支持率為100%，表明COⅠ基因可作為鲌類鑒定的有效分子標(biāo)記[8]。同時(shí)可看出，達(dá)氏鲌和翹嘴鲌最先聚集在一起，然后與蒙古鲌聚集在一起，表明達(dá)氏鲌和翹嘴鲌的親緣關(guān)系較近，與蒙古鲌的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，與王偉的研究結(jié)果[16]一致。

2.5 群體進(jìn)化歷史

由表4可知，利用DnaSP 6.0對3種鲌類進(jìn)行Tajiams D和FuFs中性檢驗(yàn)，結(jié)果表明，3種鲌類的中性檢驗(yàn)值均為負(fù)值，但統(tǒng)計(jì)結(jié)果不顯著（P>0.1）。由圖2可知，3種鲌類的歧點(diǎn)分布圖中，歧點(diǎn)分布曲線呈明顯的單峰型。

3 討論

3.1 3種鲌類的遺傳多樣性

通常采用單倍型多樣性指數(shù)（h）和核苷酸多樣性指數(shù)（π）2個(gè)常用參數(shù)衡量物種遺傳多樣性的高低，h和π值越大，表明群體的遺傳多樣性越豐富[17]。本研究采用COⅠ基因片段，首次分析滆湖鲌類國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)主要保護(hù)對象的遺傳多樣性。結(jié)果顯示，翹嘴鲌、蒙古鲌和達(dá)氏鲌的單倍型多樣性分別為0.422、0.695和0.230，核苷酸多樣性分別為0.000 85、0.001 90和0.000 53。Grant和Bowen通過研究，將魚類的單倍型多樣性指數(shù)和核苷酸多樣性指數(shù)大小的閾值分別設(shè)定為0.5和0.005[18]。本研究結(jié)果表明，3種鲌類中只有蒙古鲌的單倍型多樣性大于0.5，表明保護(hù)區(qū)3種鲌類的遺傳資源較為貧乏。與三峽庫區(qū)翹嘴鲌（h：0.972 2～0.990 5，π：0.002 4～0.014 1）、蒙古鲌（h：0.866 7～1，π：0.002 2～0.002 4）、達(dá)氏鲌（h：0.969 0～1.000 0，π：0.033 0～0.071 5）[19]、長江中下游5個(gè)達(dá)氏鲌地理群體（h：0.412 3，π：0.001 1）[20]及長江流域湖北段和江蘇段5個(gè)蒙古鲌群體（h：0.664，π：0.002）[21]的遺傳多樣性相比，同樣表明保護(hù)區(qū)3種鲌類的遺傳多樣性指數(shù)較小。多年來，滆湖環(huán)境污染嚴(yán)重，藍(lán)藻水華頻繁發(fā)生，水生植物消失，涉水工程項(xiàng)目建設(shè)較多，加之過度捕撈等多種不利因素的影響，導(dǎo)致保護(hù)區(qū)魚類的棲息

環(huán)境被破壞，魚類的小型化、低齡化趨勢加劇，種群資源量下降，遺傳多樣性喪失[22-25]。另外，受水利工程建設(shè)的影響，滆湖處于相對封閉狀態(tài)，與周邊水體的魚類群體基因交流受阻，進(jìn)一步導(dǎo)致滆湖魚類種質(zhì)資源遺傳多樣性下降[26]。

一般來說，魚類的遺傳多樣性特征與進(jìn)化歷史密切相關(guān)。Grant和Bowen根據(jù)單倍型多樣性和核苷酸多樣性的關(guān)系，將群體遺傳多樣性分為4種模式：第一類模式為低h和低π（h<0.5，π<0.005），表明種群近期經(jīng)歷了瓶頸效應(yīng);第二類模式為高h(yuǎn)和低π（h≥ 0.5，π<0.005），表示是受瓶頸效應(yīng)后群體數(shù)量的迅速擴(kuò)張導(dǎo)致;第三類模式為低h和高π（h<0.5，π ≥ 0.005），表示群體經(jīng)歷了輕微的瓶頸效應(yīng)，但沒有影響到核苷酸變異;第四類模式為高h(yuǎn)和高π（h≥ 0.5，π≥0.005），表示群體穩(wěn)定且具有比較悠久的進(jìn)化歷史[18]。本研究結(jié)果顯示，翹嘴鲌和達(dá)氏鲌的單倍型多樣性<0.5，核苷酸多樣性<0.005，屬于第一種類型;蒙古鲌單倍型多樣性>0.5，核苷酸多樣性<0.005，屬于第二種類型，這表明3種鲌類近期均經(jīng)歷了瓶頸效應(yīng)，群體尚未有足夠長的時(shí)間積累遺傳變異。3種鲌類的中性檢驗(yàn)結(jié)果顯示，Tajimas D 值和Fus Fs值均為負(fù)值，但統(tǒng)計(jì)結(jié)果不顯著，表明進(jìn)化過程中偏離了中性選擇，發(fā)生輕微的有害突變或有害突變被清除[27-28]。3種鲌魚的歧點(diǎn)分布圖呈現(xiàn)單峰型[29]，綜合來看，表明3種鲌魚進(jìn)化歷史上經(jīng)歷了不明顯的種群擴(kuò)張過程。

3.2 3種鲌類的遺傳結(jié)構(gòu)

Hebert等基于COⅠ序列，對動(dòng)物界11個(gè)門、13 320 個(gè)物種進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，種內(nèi)遺傳距離多在2%以下[30]。本研究結(jié)果顯示，翹嘴鲌、蒙古鲌和達(dá)氏鲌的種內(nèi)遺傳距離均為0.000～0.005，明顯<2%，這說明在保護(hù)區(qū)內(nèi)3種鲌類群體是一個(gè)自由交配的群體，群體內(nèi)個(gè)體間存在廣泛的基因交流。從單倍型組成來看，特定類型的單倍型在群體中占據(jù)明顯優(yōu)勢，翹嘴鲌的優(yōu)勢單倍型Hq2有34個(gè)，占群體的比例為73.9%，蒙古鲌的優(yōu)勢單倍型Hm2有10個(gè)，占群體的比例為50%，達(dá)氏鲌的優(yōu)勢單倍型Hd1有36個(gè)，占群體的比例為87.8%，說明3種鲌類群體的遺傳組成趨于單一化，這可能由于鲌類的群體數(shù)量較小，受遺傳漂變的影響所致[31]。從保護(hù)生物學(xué)的角度來看，數(shù)量較少的單倍型容易丟失，對種群的遺傳多樣性產(chǎn)生較大影響，更需要加大保護(hù)力度。

3.3 鲌類種質(zhì)資源保護(hù)

本研究顯示，種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)的3種鲌類遺傳多樣性水平較低，種群遺傳組成單一化，需要采取措施保護(hù)和修復(fù)鲌類資源，提高遺傳多樣性水平：（1）控制環(huán)境污染，治理藍(lán)藻水華，改善魚類的棲息環(huán)境;（2）構(gòu)建水域生態(tài)牧場和建設(shè)人工魚巢，為繁殖和孵化提供基質(zhì)和空間;（3）開展增殖放流，補(bǔ)充魚類資源量，優(yōu)化魚類遺傳結(jié)構(gòu);（4）強(qiáng)化執(zhí)法，嚴(yán)厲打擊非法捕撈，保護(hù)魚類繁殖和生長。

參考文獻(xiàn)：

[1]郭子良，張曼胤，崔麗娟，等. 中國國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)建設(shè)及其發(fā)展趨勢分析[J]. 水生態(tài)學(xué)雜志，2019，40（5）：112-118.

[2]盛 強(qiáng)，茹輝軍，李云峰，等. 中國國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)分布格局現(xiàn)狀與分析[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2019，43（1）：62-80.

[3]錢迎倩，馬克平.生物多樣性研究的原理與方法：生物多樣性研究系列專著 1[M]. 北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社，1994：13-36.

[4]肖武漢，張亞平.魚類線粒體DNA的遺傳與進(jìn)化[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2000，24（4）：384-391.

[5]袁 娟，張其中，羅 芬.魚類線粒體DNA及其在分子群體遺傳研究中的應(yīng)用[J]. 生態(tài)科學(xué)，2008，27（4）：272-276.

[6]彭居俐，王緒禎，王 丁，等. 基于線粒體COⅠ基因序列的DNA條形碼在鯉科鲌屬魚類物種鑒定中的應(yīng)用[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2009，33（2）：271-276.

[7]張龍崗，楊 玲，李 嫻，等. 利用mtDNA COⅠ基因序列分析引進(jìn)的澳洲蟲紋鱈鱸群體遺傳多樣性[J]. 水產(chǎn)學(xué)雜志，2013，26（2）：14-18.

[8]王利華，羅相忠，王 丹，等. 基于COⅠ和Cytb DNA條形碼在鲌屬魚類物種鑒定中的應(yīng)用[J]. 淡水漁業(yè)，2019，49（4）：22-28.

[9]李大命，孫文祥，許 飛，等. 高郵湖大銀魚、太湖新銀魚Cytb和COⅠ基因序列多態(tài)性分析[J]. 水產(chǎn)科學(xué)，2020，39（2）：258-264.

[10]倪 勇，伍漢霖.江蘇魚類志[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：283-288.

[11]Ward R D，Zemlak T S，Innes B H，et al.DNA barcoding Australias fish species[J]. Philosophical Transactions of the Royal Society of London（Series B，Biological Sciences），2005，360（1462）：1847-1857.

[12]Hall T A. BioEdit：A user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95 /98 /NT[J]. Nucleic Acids Symp Ser，1999，41：95-98.

[13]Thompson J D，Gibson T J，Plewniak F，et al.The CLUSTAL_X windows interface：flexible strategies for multiple sequence alignment aided by quality analysis tools[J]. Nucleic Acids Research，1997，25（24）：4876-4882.

[14]Kumar S，Stecher G，Tamura K.MEGA7：molecular evolutionary genetics analysis version 7.0 for bigger datasets[J]. Molecular Biology and Evolution，2016，33（7）：1870-1874.

[15]Rozas J，F(xiàn)errer-Mata A，Sánchez-Delbarrio J C，et al.DnaSP 6：DNA sequence polymorphism analysis of large data sets[J]. Molecular Biology and Evolution，2017，34（12）：3299-3302.

[16]王 偉. 翹嘴鲌（Culter alburnus）群體遺傳多樣性及鲌亞科魚類系統(tǒng)發(fā)生的研究[D]. 上海：華東師范大學(xué)，2007.

[17]沙 航，羅相忠，李 忠，等. 基于COⅠ序列的長江中上游鰱6個(gè)地理群體遺傳多樣性分析[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)，2018，25（4）：783-792.

[18]Grant W，Bowen B.Shallow population histories in deep evolutionary lineages of marine fishes：insights from sardines and anchovies and lessons for conservation[J]. Journal of Heredity，1998，89（5）：415-426.

[19]王 丹，程慶武，楊鎮(zhèn)宇，等. 三峽庫區(qū)鲌屬魚類線粒體COⅠ基因遺傳多樣性的初步分析[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2015，39（5）：1054-1058.

[20]謝佳燕，顏 淵，楊鈺慧.達(dá)氏鲌不同地理種群線粒體COⅠ基因遺傳多態(tài)性的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（3）：37-40.

[21]謝佳燕，顏 淵，楊鈺慧，等. 基于線粒體COⅠ基因序列的蒙古鲌群體遺傳結(jié)構(gòu)分析[J]. 淡水漁業(yè)，2019，49（3）：3-7.

[22]彭自然，陳立婧，江 敏，等. 滆湖水質(zhì)調(diào)查與富營養(yǎng)狀態(tài)評價(jià)[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，16（3）：252-258.

[23]周 剛.滆湖水生植物生物量、演替規(guī)律及合理利用[J]. 湖泊科學(xué)，1997，9（2）：175-182.

[24]童合一，劉其根，陳馬康，等. 滆湖天然魚類小型化及其對策[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1992，1（增刊2）：124-135.

[25]唐晟凱，張彤晴，孔優(yōu)佳，等. 滆湖魚類學(xué)調(diào)查及漁獲物分析[J]. 水生態(tài)學(xué)雜志，2009，30（6）：20-24.

[26]張 迪，雷光春，龔 成，等. 基于COⅠ基因序列的太湖新銀魚遺傳多樣性[J]. 湖泊科學(xué)，2012，24（2）：299-306.

[27]Fu Y X. Statistical tests of neutrality of mutations against population growth，hitchhiking and? background selection[J]. Genetics，1997，147（2）：915-925.

[28]Hickerson M J，Meyer C P. Testing comparative phylogeographic models of marine? vicariance and dispersal using a hierarchical Bayesian approach[J]. BMC Evolutionary Biology，2007，8（3）：322-340.

[29]Barbosa A M，Real R，Munoz A R，et al. New measures for assessing model equilibrium and prediction mismatch in species distribution models[J]. Diversity and Distributions，2013，19（10）：1333-1338.

[30]Hebert P D N，Ratnasingham S，deWaard U R，et al. Barcoding animal life：cytochrome c oxidsse subunit 1 divergences among closely related species[J]. Proceeding of the Royal Society of London B：Biological Science，2003，270（suppl. 1）：96-99.

[31]沈銀柱，黃占景. 進(jìn)化生物學(xué)[M]. 北京：高等教育出版社，2018：145-146.