王改琴，耿文靜，胡 濤，賈慧君，沈 波，徐 瑞，劉春雪

（安佑生物科技集團(tuán)股份有限公司，江蘇蘇州 215437）

在產(chǎn)蛋期，蛋雞輸卵管每天都在高效運(yùn)轉(zhuǎn)，易發(fā)生卵巢炎和輸卵管炎，從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率和蛋品質(zhì)下降，造成總蛋重和蛋殼質(zhì)量下降，破殼蛋、沙殼蛋、畸形蛋等增多，嚴(yán)重影響?zhàn)B殖經(jīng)濟(jì)效益[1]。輸卵管炎的主要誘因是禽舍衛(wèi)生環(huán)境差，沙門氏菌、大腸桿菌等細(xì)菌感染泄殖腔，進(jìn)而侵入輸卵管；病毒性輸卵管炎也較為常見，如新城疫病毒、腺病毒或冠狀病毒等誘發(fā)子宮及腺體細(xì)胞變形，導(dǎo)致黏膜分泌功能紊亂[2]、蛋殼變薄[3]或顏色異常[4]，禽流感病毒也會破壞生殖系統(tǒng)，使卵黃充血破裂，造成輸卵管炎[5]。此外，維生素A、維生素D 以及鈣磷等營養(yǎng)素缺乏也會誘發(fā)輸卵管炎。蛋禽輸卵管防控除了日常的禽舍環(huán)境控制外，還可通過在飼料中添加抗菌消炎及免疫活化的物質(zhì)來保健，維護(hù)輸卵管的正常生理功能。精油植生素是由植物精油和中草藥復(fù)方組成的生物活性物質(zhì)，具有抑菌、消炎等作用。本文旨在研究日糧中添加精油植生素對患輸卵管炎的蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、免疫因子和激素水平的影響，以期為精油植生素在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 精油植生素由山川生物科技（武漢）有限公司提供，主要有效成分是肉桂醛、百里香酚、香芹酚、益母草、甘草、黃芪提取物等。試驗(yàn)所用基礎(chǔ)日糧由南通安佑生物科技有限公司提供；試驗(yàn)蛋雞品種為海蘭灰商品蛋雞。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選擇162 只約560 日齡產(chǎn)蛋率較低（連續(xù)2～3 d 不產(chǎn)蛋）、蛋品質(zhì)較差[出現(xiàn)破殼、沙殼、軟殼、臟蛋（蛋殼粘血、糞便或黏液）、畸形蛋（大蛋、小蛋以及不規(guī)則蛋）]的患輸卵管炎的海蘭灰蛋雞，隨機(jī)分為3 組，分別為對照組、250 mg/kg和500 mg/kg 精油植生素試驗(yàn)組，每組6 個重復(fù)，每重復(fù)9 只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，250、500 mg/kg 精油植生素組分別在基礎(chǔ)日糧中添加250、500 mg/kg 精油植生素。試驗(yàn)期28 d。基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

試驗(yàn)在上海奉賢梨園雞場進(jìn)行。采用3 層階梯式籠養(yǎng)，根據(jù)蛋雞的飼養(yǎng)規(guī)程飼喂，自由采食和飲水，每日記錄舍內(nèi)溫度和濕度。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 產(chǎn)蛋性能 每天以重復(fù)數(shù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、軟殼、破殼、沙殼、臟蛋及畸形蛋數(shù)，統(tǒng)計(jì)飼料耗用量。計(jì)算產(chǎn)蛋率、破蛋率、沙殼蛋率、畸形蛋率、平均蛋重及料蛋比，同時記錄整個試驗(yàn)期的死淘情況。

1.3.2 蛋品質(zhì) 試驗(yàn)結(jié)束時，每個重復(fù)隨機(jī)選取2 枚接近平均蛋重的雞蛋（不含破蛋、軟蛋和不合格蛋），測定蛋殼厚度和強(qiáng)度、蛋白高度、哈夫單位、蛋黃顏色等蛋品質(zhì)指標(biāo)。用蛋殼強(qiáng)度儀EFG-0503（Robotmation,Japan）測定蛋殼強(qiáng)度（大頭、小頭及中端的平均強(qiáng)度）；用多功能蛋品質(zhì)分析儀 EMT-7300（Robotmation，Japan）測定蛋重、蛋白高度、哈夫單位。雞蛋放置1 周后進(jìn)行水印蛋的評分（表2），由蛋品儀器綜合評判蛋品質(zhì)，蛋品質(zhì)綜合評分分為AA 級、A 級及B 級。

表2 水印蛋蛋殼評分

1.3.3 血清免疫指標(biāo)和激素水平 于試驗(yàn)結(jié)束時每個重復(fù)隨機(jī)抽取1 只雞進(jìn)行翅靜脈采血5 mL，血樣4℃靜置待血清析出后，5 000 r/min 離心10 min，吸取上層血清-20℃冷凍保存待測。采用ELISA 方法檢測白細(xì)胞介素2（IL-2）、白細(xì)胞介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子（TNF-α）及雌激素（E2）含量，相關(guān)試劑盒均購自上海通蔚實(shí)業(yè)有限公司，用紫外可見光分光光度計(jì)（普析新世紀(jì)儀器有限公司產(chǎn)WF2 W-2102C）進(jìn)行測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 軟件以單因素方差分析(One-Way ANOVA) 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，Duncan's法進(jìn)行均值的多重比較，以P<0.05 為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 精油植生素對產(chǎn)蛋性能的影響 從表3 可知，各組蛋雞的平均蛋重相對穩(wěn)定，采食量無明顯差異，各組的料蛋比及產(chǎn)蛋率略有改善（P>0.05）。

表3 精油植生素對輸卵管炎蛋雞采食量及產(chǎn)蛋性能的影響

2.2 精油植生素對蛋品質(zhì)的影響 由表4 可知，精油植生素對臟蛋率及破蛋率有改善，但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著水平。250、500 mg/kg 精油植生素組的沙殼蛋比例比對照組分別降低64.24% 和82.32%（P<0.05）。250 mg/kg 精油植生素組未出現(xiàn)畸形蛋。

表4 精油植生素對輸卵管炎蛋雞產(chǎn)蛋相關(guān)品質(zhì)的影響

由表5 可見，3 個處理組的蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度及平均蛋重?zé)o顯著差異。與對照組相比，500 mg/kg 精油植生素組的雞蛋哈夫單位提高12.00%（P<0.05），但250 mg/kg 精油植生素組的蛋白高度和哈夫單位未見改善。水印蛋評分以250 mg/kg 精油植生素組最佳。綜合蛋品質(zhì)中，雞蛋達(dá)到AA 級別的比例以試驗(yàn)2 組最高，達(dá)到91.67%，而對照組最低為63.64%。

表5 精油植生素對輸卵管炎蛋雞的雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 精油植生素對輸卵管炎蛋雞免疫因子和激素水平的影響 由表6 可知，與對照組相比，250、500 mg/kg 精油植生素組的IL-2 分別提高22.67%和25.05%（P<0.05），IL-10 分別提高46.67%及74.39%（P<0.05）。TNF-α以250 mg/kg 組最低，比500 mg/kg 組降低13.13%（P<0.05）。500 mg/kg 組E2水平比對照組提高29.27%（P<0.05）。

表6 精油植生素對輸卵管炎蛋雞的免疫因子和激素水平的影響 pg/mL

3 討 論

3.1 精油植生素對輸卵管炎蛋雞生產(chǎn)性能的影響 輸卵管炎是蛋雞生產(chǎn)中常見的疾病，通常表現(xiàn)為產(chǎn)蛋率下降，臟蛋、破蛋、畸形蛋等比例增加，也會影響到雞蛋大小、蛋殼質(zhì)量、蛋黃顏色、蛋清粘稠度[1]。鑒于食品安全，抗生素或激素類藥物在養(yǎng)殖中禁用，尋找安全高效的中草藥及相關(guān)植物提取物來解決蛋禽的輸卵管炎問題具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)，益母草可以活血化瘀、利尿消腫、促進(jìn)輸卵管發(fā)育和改善輸卵管炎[6]，恢復(fù)機(jī)體的排卵功能[7]，提高種雞的產(chǎn)蛋率[8]，提高種蛋的孵化率和蛋黃顏色等[9]。益母草黃芪提取物[10]、益母草淫羊藿提取物[11]和甘草[12]同樣可補(bǔ)中益氣、抗病毒和提高免疫力，能緩急止痛，有效緩解炎癥，改善禽生產(chǎn)性能。而植物精油[13-17]具有抗菌抗病毒、消炎、提高機(jī)體免疫和產(chǎn)蛋率的功效，且精油具有很強(qiáng)的穿透力，可到達(dá)輸卵管部位，有效發(fā)揮抗菌消炎的作用。精油植生素是由益母草、甘草及黃芪提取物搭配肉桂醛、百里香酚、香芹酚等植物精油組成的復(fù)方產(chǎn)品。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與同雞場的其他正常蛋雞相比，試驗(yàn)所用輸卵管炎的對照組蛋雞產(chǎn)蛋率明顯較低（降低22.81%），料蛋比顯著升高，輸卵管炎造成較大的飼料損失。本試驗(yàn)中，飼喂精油植生素后，患有輸卵管炎蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比有一定程度的改善，這與之前益母草、黃芪等提取物或植物精油對提升蛋禽產(chǎn)蛋率的文獻(xiàn)結(jié)果一致[11,12,17-19]。也有研究認(rèn)為植物精油對蛋雞[20]及蛋鴨[21]的產(chǎn)蛋率和料蛋比無影響，這可能是單獨(dú)使用植物精油且與在正常健康狀況下對家禽的改善效果不及亞健康或發(fā)生輸卵管炎時的效果明顯有關(guān)。本試驗(yàn)所用的精油植生素融合了精油和益母草、黃芪等多種有效成分，兩類活性物質(zhì)協(xié)同增效，改善效果得到綜合體現(xiàn)。

3.2 精油植生素對輸卵管炎蛋雞的蛋品質(zhì)影響 在蛋品質(zhì)方面，精油植生素表現(xiàn)出改善臟蛋率、破蛋率、沙殼蛋率以及畸形蛋率，特別是在改善沙殼蛋方面效果顯著，且對雞蛋的蛋白高度、哈夫單位以及雞蛋AA 級比例有提升效果，這與精油植生素的組成密不可分。精油植生素的有效成分益母草能夠顯著提高蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋黃顏色評分、哈夫單位[22]；另外精油的活性成分肉桂醛、百里香酚及百里香精油能夠改善蛋白高度和蛋殼強(qiáng)度[18,23]，原因在于植物精油通過提高蛋白質(zhì)的消化利用率[24]和影響輸卵管腺體的濃蛋白的分泌量[23]來改善蛋白品質(zhì)。

3.3 精油植生素對免疫指標(biāo)和雌激素的影響 IL-2、IL-10 和TNF-α是機(jī)體免疫調(diào)節(jié)及炎癥調(diào)控的重要細(xì)胞因子，其中 IL-2、TNF-α是促炎因子，IL-10 是抗炎因子。資料顯示[25-27]，香芹酚、百里香酚、黃芪多糖、甘草都能夠促進(jìn)IL-10 分泌，抑制TNF-α的釋放。本試驗(yàn)中2 個試驗(yàn)組抗炎因子的IL-10 水平均顯著高于對照組，與文獻(xiàn)結(jié)果一致。有關(guān)精油對IL-2 的影響趨勢，不同文獻(xiàn)研究結(jié)果不同。有研究發(fā)現(xiàn)肉雞日糧中添加200 和400 g/t 百里香酚[28]，或添加80 g/t 的精油[29]均可顯著提高血清IL-2 水平，另一研究則認(rèn)為百里香酚降低IL-2 水平[30]。黃芪對IL-2 有雙向調(diào)節(jié)作用，低、中劑量黃芪可促進(jìn)小鼠IL-2 生成，高劑量抑制IL-2 生成[31]。本試驗(yàn)中2 個精油植生素添加組IL-2 水平均顯著高于對照組。理論上輸卵管炎得到改善后，促炎因子IL-2 水平理應(yīng)降低，但本試驗(yàn)得出相反的結(jié)論，可能與試驗(yàn)條件、添加劑量或樣本量大小有關(guān)，需進(jìn)一步驗(yàn)證確認(rèn)。

精油植生素中的活性成分黃芪、甘草具有植物雌激素作用，其與動物內(nèi)源性E2結(jié)構(gòu)類似，在動物體內(nèi)E2水平較低時可以發(fā)揮弱雌激素效應(yīng)，水平較高時可以競爭性地結(jié)合E2受體，減輕E2過多的不良影響[32]。資料顯示，1.0%和1.5%益母草也可以顯著提高綠殼蛋雞血清中E2含量[22]。本試驗(yàn)中精油植生素組E2水平高于對照組，尤其500 mg/kg 達(dá)到顯著水平，這可能與益母草、黃芪、甘草的雌激素作用有關(guān)，具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，精油植生素對患輸卵管炎蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比略有改善，但未達(dá)顯著水平；在蛋品質(zhì)方面也有不同程度的改善，其中沙殼蛋和畸形蛋比例顯著降低，AA 級雞蛋比例大幅提高。此外，精油植生素還能顯著提高蛋雞血清中IL-2、IL-10 及E2水平。綜合考慮以500 mg/kg 精油植生素組效果最佳。