謝浩然,楊月娟,朱剛,,謝威,高艷芳,安偉莉,3,鄭曉鐘,雷沙,李娜,,張謙,殷祚云?
(1 仲愷農業(yè)工程學院園藝園林學院,廣東廣州 510225;2 廣東省林業(yè)科學研究院,廣東廣州 510520;3 中國科學院華南植物園,廣東廣州,510650)
楓香(Liquidambar formosana Hance),金縷梅科楓香屬高大落葉喬木,也稱中國楓香,在我國主要分布于秦嶺-淮河線以南地區(qū)。深秋時其葉變色,觀賞價值高,是我國南方重要的鄉(xiāng)土秋色葉樹種。在楓香生產中,種子育苗是重要的繁殖方式。楓香屬于異系交配體系,風媒傳粉,在其苗木生產中也可見自花傳粉現象,其種子綜合發(fā)芽率及發(fā)芽勢處于較低水平[1]。在圃地培育中,其發(fā)芽率僅在20%~57%[2],播種前預處理通常而言是提高種子發(fā)芽率及發(fā)芽勢的有效手段。
目前,針對種子的預處理措施多樣,含磁場、激光、熱處理、低溫層積等物理手段和促生性微生物、促進型化感物質、外源激素調控等手段[3]。因此,探究楓香種子萌發(fā)機制,采用溫度處理和外源激素刺激2 種手段,對楓香種子進行播前預處理,以期了解楓香種子對這2項苗木生產中常見處理手段的反應機制,提高楓香種子發(fā)芽率和生產效率,對實際楓香苗木培育有著重要意義。地理種群差異、種子活力、種子貯藏條件、播種苗生長特性、萌發(fā)條件與播種措施、脅迫因子影響等是楓香種子研究報道的主要方向[4-7]。嘗試通過低溫和外源赤霉素刺激2 種預處理方法,進行多組發(fā)芽、出苗對比試驗,以探討預處理手段對于楓香種子萌發(fā)的具體作用效果,為育苗移栽或直接播種提供參考。
(1)楓香種子,千粒重4.21g,常溫儲藏,種子為當年采收的廣東產楓香種子。(2)赤霉素(GA3),高錳酸鉀(KMnO4),產自廣州市林國化肥有限公司。(3)培養(yǎng)基質:赤紅壤、泥炭土、珍珠巖為4∶2∶1 混合,取自仲愷農業(yè)工程學院苗圃。
1.2.1 室內組。設置種子預處理溫度和赤霉素溶液濃度,溫度處理采用-18℃、3℃、30℃、35℃、40℃、室溫(15℃)對照;赤霉素溶液濃度采用0(超純水對照)、50 mg/L、100 mg/L、150mg/L、200mg/L。在培養(yǎng)皿中,加入約10mL 對應各濃度的赤霉素溶液,或放入對應溫度的變溫箱中,持續(xù)處理12h 后取出,每種處理設置3 次重復。放入溫度設置20~25℃,光照12h 的人工氣候箱培養(yǎng),人工氣候箱為MGC-35HP,由上海一恒科學儀器有限公司出產。
1.2.2 室外組。設置種子預處理溫度和赤霉素溶液濃度,溫度處理采用30℃、35℃、40℃、常溫對照;赤霉素溶液濃度采用0(超純水對照)、50mg/L、100mg/L、150mg/L。在對應培養(yǎng)皿中,加入10mL 的對應各濃度赤霉素溶液,或放入對應溫度的變溫箱中,持續(xù)處理12h后取出,每種處理設置3 次重復,放入室外培養(yǎng)。
1.2.2 赤霉素和低溫共同處理。赤霉素和低溫組合分別 為 :(50,-18)、(50,3)、(50,18)、(100,-18)、(100,3)、(100,18)、(150,-18)、(150,3)、(150,18)、(200,-18)、(200,3)、(200,18)/(mg/L,℃),共12 個組合。在對應培養(yǎng)皿中,加入約10mL 對應各濃度的赤霉素溶液,并放入對應溫度的變溫箱中,持續(xù)處理12h 后取出,每種處理設置3 個重復組,放入溫度設置20~25℃,光照12h 的人工氣候箱培養(yǎng)。
種子室外出苗試驗期間氣象條件概況(見表1),數據來自于國家氣象信息中心。
表1 試驗期間氣象概況
由于第7d 的萌發(fā)數急劇減少,并且幼苗在人工氣候箱的生長速度較快,容易徒長。所以,設定催芽天數為6d,每天記錄發(fā)芽數、霉腐數,長有根毛的胚根數和長度大于2mm 的胚軸數。計算5d 內的發(fā)芽勢,6d 內的發(fā)芽率、發(fā)芽指數。
種子發(fā)芽勢(%)=(第5d 種子發(fā)芽總數/試驗種子總數)×100;種子發(fā)芽率(%)=(第6d 種子發(fā)芽總數/試驗種子總數)×100;
Gt 為發(fā)芽試驗終期內每日發(fā)芽數,Dt 為發(fā)芽日數,∑為總和。
使用Microsoft Excel 2010 軟件整理數據,使用IBM SPSS Statistics 21.0 軟件分析數據。試驗所得數據采用單因素方差分析法、LSD 顯著性檢驗方法和Duncan 氏多重比較檢驗法進行檢驗和比較。
由圖1、表2 可知,恒溫氣候箱中培養(yǎng)的不同溫度梯度預處理的楓香種子,其整體發(fā)芽率、發(fā)芽勢處于較高水平,但無顯著性差異;發(fā)芽指數顯著性差異,種子預處理溫度呈正相關,當預處理溫度高于30℃時達到峰值,且再升高溫度無顯著性差異。
圖1 室內不同溫度預處理發(fā)芽進程
表2 不同溫度預處理下楓香種子的室內發(fā)芽情況
由圖2、表3 可知,在室外培養(yǎng)不同溫度梯度預處理的楓香種子,種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢無顯著差異,發(fā)芽勢與出苗率最高水平出現于30℃處理的種子。15℃空白處理組發(fā)芽指數高于其余經過高溫預處理組。
圖2 室外不同溫度預處理發(fā)芽進程
表3 不同溫度預處理下楓香種子的室外出苗情況
綜合以上數據,表明高溫和低溫預處理對楓香種子活性具有一定影響,低溫預處理對種子的活性有抑制作用,當預處理溫度達到30℃時,對種子活性有促進作用。室外培養(yǎng)的不同梯度預處理發(fā)芽指數有顯著區(qū)別,因為室外溫度在13~29℃,浮動范圍較大,對萌發(fā)中的種子活性造成不利影響。
由圖3、表4 可知,恒溫氣候箱中培養(yǎng)的不同赤霉素梯度預處理的楓香種子,總體而言,經赤霉素處理的種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數高于清水處理組種子。表明赤霉素預處理對楓香種子發(fā)芽可能有促進作用,但對其促進效果并不顯著。
表4 不同赤霉素(GA3)濃度預處理下楓香種子的室內發(fā)芽情況
圖3 室內不同赤霉素預處理發(fā)芽進程
由圖4、表5 可知,室外培養(yǎng)的不同赤霉素梯度預處理的楓香種子,總體而言,經赤霉素處理的種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數與空白處理組種子無顯著差異。
圖4 室外不同赤霉素預處理發(fā)芽進程
表5 不同赤霉素(GA3)濃度預處理下楓香種子的室外出苗情況
綜合以上數據,表明在0~15mg/L GA3處理下,赤霉素對楓香種子的萌發(fā)的影響不大;主要在于室內與室外發(fā)芽的區(qū)別,室外組在發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數上均表現較低水平,表明環(huán)境溫度大幅度變化對種子萌發(fā)具有顯著的不利影響。
由圖5、圖6、圖7 可知,恒溫氣候箱中培養(yǎng)的赤霉素與低溫預處理共同作用,對楓香種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢無顯著變化;組合(100,3)在發(fā)芽勢上顯著最高,在3℃預處理下,浸泡mg/L 的赤霉素溶液可提高發(fā)芽勢,使出苗更整齊。
圖5 赤霉素及低溫共同作用對發(fā)芽率的影響
圖6 赤霉素及低溫共同作用對發(fā)芽指數的影響
圖7 赤霉素及低溫共同作用對楓香種子發(fā)芽勢的影響
不同溫度預處理對楓香種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢無顯著影響,同時,韋美華等[8]試驗表明,溫度對楓香種子發(fā)芽率影響或不顯著。但在胡文杰等[9]的研究中,在探究楓香種子萌發(fā)與環(huán)境溫度的關系相關試驗采取了更為細分的溫度梯度,并能得出顯著相關數據,說明溫度應與楓香種子萌發(fā)存在關聯性。
適量的赤霉素濃度浸種可以促進種子的萌發(fā),不同的植物種子效果不同[10-12],在0~150mg/L GA3赤霉素處理下,對楓香種子的萌發(fā)無顯著影響。黃寧等[13]研究對比發(fā)現,赤霉素處理時間和楓香種子種源不同,可能會影響結果。何慶海[14]研究表明,楓香種子表型性狀平均變異系數高達15.83%,不同種源內變異差別明顯,木本植物種子萌發(fā)研究中的赤霉素溶液濃度設計,上限可設置至400mg/L[15],各濃度梯度間距可設置為25mg/L或50mg/L[16]。同時,成仿云等[17]的研究表明,低溫處理可改變幼苗對GA3的相應能力,史小華[18]等人采用多種溫度與外源激素復數的預處,提高蘭香草種子萌發(fā)率,縮短種子萌發(fā)周期。后續(xù)試驗研究可調整溫度、赤霉素濃度,以探究楓香種子萌發(fā)與赤霉素預處理之間的關系。李莉等[19]采用不同pH 值、高錳酸鉀、吲哚乙酸、過氧化氫進行連翹種子萌發(fā)的預處理試驗,獲得理想結果,可考慮改用相同方法處理試驗。
因此,本試驗中土壤也是可能的影響因素之一。由繆建華等[20]的調查研究表明,楓香種子播種以土層深厚、土壤疏松、pH 值5.5~6.0 砂壤土為最佳基質,且為適應楓香生理特性,其種植苗地應及時排水[21]。