王自然，郭 俊，楊建東，毛加梅，李進學(xué)，高俊燕，岳建強

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶亞熱帶經(jīng)濟作物研究所，云南德宏，678600)

果蔬灰霉病是由灰葡萄孢菌Botrytiscinerea引起的一種真菌性病害，在美國、英國、法國、中國、埃及、新西蘭等[1]世界大部分國家都有灰霉病發(fā)生。新西蘭曾在溫州蜜柑、桔、桔柚雜柑和檸檬上觀察到一種主要侵染花和幼果的病害，在花瓣和花萼上形成“灰霉?fàn)睢?，造成落果增加，并影響幼果生長，致果實畸形，果面疤痕的病害，隨后證實在檸檬上的病原為B.cinerea[2]?；颐共】晌：Ω探鄣男≈Α⑷~片、樹皮和果實[3]。我國有關(guān)柑桔灰霉病的報道較少[4-6]，并且灰霉病誘導(dǎo)柑桔果面疤痕問題一直未得到認可和重視。

檸檬鮮銷產(chǎn)量占其總產(chǎn)量的2/3以上[7]。鮮銷檸檬的外觀品質(zhì)要求果形佳，果皮細膩，果色均勻，果面疤痕面積在整個果面的5%以下。引起檸檬果面疤痕的因素很多，有瘡痂病、潰瘍病、流膠病、黑斑病和炭疽病等病害侵染造成的疤痕，有薊馬、銹壁虱等昆蟲為害造成的疤痕，有檸檬枝、葉與幼果摩擦、田間農(nóng)事操作等機械損傷和藥害等造成的果面疤痕[8-9]。在美國、新西蘭和日本，已證實柑桔花期花瓣受灰葡萄孢菌B.cinerea感染而腐爛的花瓣粘附在幼果表面，可傷及幼果果皮，最終在果皮上形成各種難看的疤痕，稱之為葡萄孢菌誘導(dǎo)的疤痕或病害[2]。朱麗等[3，10]在對B.cinerea侵染柑桔誘導(dǎo)果面疤痕的研究中發(fā)現(xiàn)，溫州蜜柑、桔、檸檬等柑桔果面均會受到灰霉病菌的侵染，誘導(dǎo)果面疤痕出現(xiàn)。筆者跟蹤調(diào)查了檸檬灰霉病的發(fā)病期、灰霉病誘導(dǎo)的檸檬果面病斑變化以及發(fā)病期與溫濕度和氣象因子的相關(guān)性，以期為灰霉病誘導(dǎo)的檸檬果面病斑的識別以及病害防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查地點與調(diào)查對象調(diào)查地為云南省德宏州瑞麗市檸檬主產(chǎn)區(qū)勐典基地。該基地屬于典型的熱帶亞熱帶氣候類型。灰霉病主要在檸檬開花期發(fā)病，侵染檸檬的花器和幼果。調(diào)查選擇2009年定植、植株生長健康、開花掛果性好、連續(xù)3年以上穩(wěn)產(chǎn)的“云檸1號”檸檬種植園。

1.2 花期灰霉病為害癥狀觀察在檸檬種植基地，從檸檬花蕾期開始至第二次生理落果期結(jié)束，定點觀察檸檬花上灰霉病的為害癥狀，文字描述并拍照記錄。

1.3 灰霉病侵染所致的果面疤痕觀察在檸檬春花開花末期，隨機選定20枝灰霉病為害花枝掛吊牌標(biāo)記。從檸檬第一次生理落果開始，每周觀察1次，直至檸檬果實成熟(采摘期)結(jié)束觀察。觀察灰霉果的癥狀，文字描述并拍照記錄。同時，采摘不同癥狀的果實帶回實驗室進行病原的常規(guī)分離鑒定，確定病原為灰葡萄孢菌。

1.4 不同開花期灰霉病發(fā)病調(diào)查2016年結(jié)合檸檬花期情況，跟蹤調(diào)查了檸檬園整周年4個開花期、8個時間段的檸檬灰霉病發(fā)生情況。在瑞麗勐典基地選定10株，采用肉眼直接觀察法，在檸檬春花期、夏花期、秋花期和冬花期每株在5個方位(東、西、南、北、中)各隨機選1個花枝進行調(diào)查，每個開花期調(diào)查2次(1/3謝花，2/3謝花)，每次調(diào)查50個花枝。統(tǒng)計病枝數(shù)和每個花枝的病級，計算病枝率和病情指數(shù)。檸檬花枝灰霉病分級標(biāo)準：0級，花無灰霉癥狀；1級，灰霉花占單個花枝總花的5%以下；3級，灰霉花占單個花枝總花的6%～10%；5級，灰霉花占單個花枝總花的11%～25%；7級，灰霉花占單個花枝總花的26%～50%；9級，灰霉花占單個花枝總花的50%以上。

1.5 春花期灰霉病發(fā)病與園內(nèi)溫濕度關(guān)系觀察2017年在檸檬春花期從始花期開始調(diào)查，至謝花結(jié)束停止調(diào)查。期間每周調(diào)查1次灰霉病發(fā)病情況。按五點取樣法隨機選植株，每點2株，共調(diào)查10株。每株在東、南、西和北4個方位各隨機選2個花枝，調(diào)查花枝發(fā)病情況。按照病級分級標(biāo)準調(diào)查，計算病株率、病枝率和病情指數(shù)。園內(nèi)溫濕度變化采用溫濕度記錄儀記錄。將記錄儀懸掛在檸檬植株的中上部，設(shè)置記錄儀每6個小時記錄1次溫度、濕度。

2 結(jié)果與分析

2.1 花期灰霉病為害癥狀檸檬灰霉病主要在檸檬開花期發(fā)生。在盛花期，少數(shù)花瓣受灰霉菌感染，變褐色腐爛，并在花瓣上產(chǎn)生大量的灰褐色霉層。隨著謝花期的到來，大量花瓣凋萎，灰褐色腐爛的花瓣不斷增多。腐爛花瓣一般不容易脫落，天氣潮濕時，花瓣粘附在花萼上，或包裹幼果；天氣干燥時，部分花瓣脫落，但大部分花瓣仍粘附在花萼和幼果上?；ò晟献躺罅炕液稚?fàn)钗?。揭開霉?fàn)€的花瓣，可見萼片和幼果表明生有黑褐色、大小不等、略凹陷的小斑點或斑塊。

圖1 檸檬開花期灰霉病為害癥狀

2.2 灰霉病誘導(dǎo)的果面疤痕在檸檬果實整個發(fā)育期間，均伴有灰霉病誘導(dǎo)的疤痕果出現(xiàn)。果面疤痕主要表現(xiàn)為脊?fàn)詈湾F狀凸起；有的果面出現(xiàn)網(wǎng)狀花斑，嚴重的為塊狀斑塊。感染灰霉病的花瓣粘附在幼果上，揭開霉?fàn)€的花瓣，幼果表面生有黑褐色、大小不等、略凹陷的小斑點或斑塊。受害嚴重的幼果，從近果柄處開始發(fā)黃，很快便脫落。第二次生理落果期開始，受感染而未脫落的幼果，在感染處形成顆粒狀、脊?fàn)罨驂K狀等大小、形式不一的凸起，凸起組織表面細胞木栓化，呈灰白色、褐色至紅褐色，或褐色和灰白色相間的斑塊。隨著果實的進一步膨大(果實膨大期)，凸起處因表面細胞木栓化而膨大受阻，凸起部分逐漸被拉平(見圖2)。果實成熟期，果面疤痕處，因木栓化表皮下的細胞生長受阻而微微凹陷，疤痕處表面粗糙，常伴有細微裂紋。

圖2 檸檬灰霉病侵染所致的果面疤痕

2.3 不同開花期灰霉病發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果表明，灰霉病主要侵染春花，其次為冬花，再次為秋花，夏花幾乎不被侵染。檸檬灰霉病發(fā)病最為嚴重的時期分別為春花2/3謝花期(4月上中旬)、春花1/3謝花期(3月)和冬花2/3謝花期(12月)，病枝率分別為76.00%、54.00%和28.00%，病情指數(shù)分別為25.78、9.56和4.00(見表1)。

表1 檸檬4個開花期灰霉病發(fā)生情況

2.4 春花期灰霉病發(fā)病與園內(nèi)溫濕度的關(guān)系田間觀察結(jié)果顯示，檸檬春花期灰霉病的發(fā)生與果園溫度、空氣濕度均存在一定的相關(guān)性。2017年檸檬春花期灰霉病發(fā)生出現(xiàn)3個高峰期，第1個高峰期為3月15日，第2個高峰期為3月29日，第3個高峰期為4月27日，病情指數(shù)分別為48.61、52.78和58.61。在灰霉病發(fā)生高峰期，果園最高溫度降低并接近平均溫度和最低溫度，果園最小濕度接近平均濕度和最大濕度，即與灰霉病高發(fā)相伴的是果園的低溫、高濕天氣。這3個發(fā)病高峰期，檸檬園24 h的平均空氣相對濕度為98%～100%，平均溫度為17.6～18.9 ℃(見圖3)。進一步調(diào)查發(fā)現(xiàn)，檸檬花期連續(xù)2～3 d以上出現(xiàn)低溫、高濕天氣，灰霉病侵染比較嚴重，所以在檸檬花期遇低溫、連續(xù)陰雨天氣利于灰霉病發(fā)生。

圖3 云南檸檬春花期果園溫濕度變化與灰霉病發(fā)病情況(2017年)

3 討論

檸檬灰霉病是由灰葡萄孢菌Botrytiscinerea侵染所致的一種真菌性病害?；移咸焰呔谧匀唤缰袕V泛存在，寄主范圍很廣。本試驗發(fā)現(xiàn)，灰葡萄孢菌侵染檸檬的花器和幼果，造成檸檬畸形果，果面出現(xiàn)顆粒狀、脊?fàn)罨驂K狀等大小形式不一的凸起，以及網(wǎng)狀或塊狀的疤痕。這與新西蘭在檸檬上觀察到的灰霉病危害癥狀相似[2]。在日本，被認為由灰葡萄孢菌引起的果面灰霉病傷是影響果面外觀品質(zhì)的重要因素[11]。在國內(nèi)，灰霉病侵染花瓣誘導(dǎo)果面?zhèn)挠^點一直未被認可，認為是薊馬、瘡痂病和機械損傷所致。本研究跟蹤觀察了檸檬花期受灰霉病感染后檸檬果面的變化，發(fā)現(xiàn)檸檬花瓣受灰霉病侵染，會有腐爛的花瓣粘附在幼果上，重者引起落果，輕者引起果面疤痕，產(chǎn)生疤痕成熟果實。這與朱麗等[10]報道的灰霉病菌誘導(dǎo)的柑桔果面疤痕癥狀相似。云南檸檬灰霉病主要在檸檬春花期和冬花期發(fā)病，夏花期和秋花期幾乎不發(fā)病，這與當(dāng)?shù)貦幟什煌_花期天氣情況存在一定關(guān)系。

柑桔灰霉病一般不會發(fā)生流行，除非遇長時間雨霧天氣或濕度較大，且溫度較低(18 ℃左右)[12]，本研究與此相符。檸檬灰霉病主要發(fā)生在開花期，低溫、高濕天氣是其暴發(fā)的誘因。檸檬春花果開花期灰霉病發(fā)生高峰期，檸檬園24 h平均空氣相對濕度為98%～100%，平均溫度為17.6～18.9 ℃。在檸檬盛花期至第一次生理落果期，果園連續(xù)2～3 d以上出現(xiàn)低溫、高濕天氣，檸檬灰霉病侵染比較嚴重。在云南檸檬生產(chǎn)中，檸檬春花和秋花開花期是防控灰霉病的關(guān)鍵時期，遇低溫、高濕或連續(xù)陰雨天氣時，必須及時使用50%異菌脲、32%戊唑醇·嘧菌酯等藥劑加強防控，降低灰霉病疤痕果的產(chǎn)生。