王斐然 何雅琴 王富偉,2 鄭宇慧 蘇華維* 李勝利*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京市生鮮乳質(zhì)量安全工程技術(shù)研究中心，北京 100193；2.北京首農(nóng)畜牧發(fā)展有限公司，北京 100076)

泌乳早期奶牛對(duì)能量的需求快速增加，而采食量卻上升緩慢，從而使奶牛能量攝入不足，出現(xiàn)嚴(yán)重的能量負(fù)平衡(NEB)[1]。目前的解決方法主要集中在泌乳早期飼喂高代謝蛋白質(zhì)(MP)和產(chǎn)奶凈能(NEL)的飼糧，以提高產(chǎn)奶量，同時(shí)避免體況的過度損失及代謝和繁殖問題[2]。近些年的研究?jī)A向于通過添加脂肪提高飼糧能量水平，改善泌乳早期奶牛生產(chǎn)性能和緩解能量負(fù)平衡狀況[3-4]。膨化全脂大豆(ESB)不僅脂肪含量高(17%～20%)，而且是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)飼料(36%～40%)，含有大量奶牛必需氨基酸，在提高飼糧能量水平的同時(shí)，還可以有效緩解由于能量負(fù)平衡而導(dǎo)致的負(fù)氮平衡[5]。已有研究表明，在飼糧中添加亞麻籽和ESB，提高了牛奶產(chǎn)量并改變了乳成分[6]。Zhang等[7]研究結(jié)果表明在泌乳早期補(bǔ)飼1.5 kg/d ESB可以提高整個(gè)泌乳期產(chǎn)奶量。然而，該研究?jī)H設(shè)置了1個(gè)ESB補(bǔ)飼水平，不一定是最佳飼喂水平。因此，本研究旨在探討泌乳早期奶牛補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)奶牛生產(chǎn)性能、瘤胃發(fā)酵、消化代謝和血液指標(biāo)的影響，并判斷ESB對(duì)緩解奶牛能量負(fù)平衡的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和飼糧

選擇4頭體重[(587±46) kg]、體況評(píng)分(2.95±0.08)和泌乳日齡[(23.6±4.4) d]相近，裝有永久性瘤胃瘺管的泌乳早期健康奶牛，采用4×4拉丁方設(shè)計(jì)，在全混合日糧(TMR)的基礎(chǔ)上分別補(bǔ)飼不同水平的ESB：0(對(duì)照)、1.0、2.0和3.0 kg/d。ESB購自某飼料廠。飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期從產(chǎn)后第22天開始，共分為4期，每期21 d，其中包括調(diào)整適應(yīng)期14 d，采樣期7 d。試驗(yàn)牛為栓系飼養(yǎng)，手工配制TMR，分別于每天的05:30和17:30各飼喂1次，全天自由飲水。記錄每天的采食量，剩料量控制在飼喂量的5%～10%。

1.3 樣品采集與分析

1.3.1 飼料樣品的采集與分析

試驗(yàn)期內(nèi)每周采集1次飼料樣品，包括青貯、羊草、苜蓿、ESB、精料混合料、TMR以及剩料，于60 ℃烘箱內(nèi)烘干48 h制備風(fēng)干樣，粉碎后保存待測(cè)。根據(jù)AOAC(1990)[8]所描述的方法測(cè)定飼料中的干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)、酸性洗滌纖維(ADF)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、鈣(Ca)和磷(P)等常規(guī)指標(biāo)含量，中性洗滌纖維(NDF)含量根據(jù)Van Soest等[9]的方法測(cè)定。

1.3.2 瘤胃液的采集與分析

采樣期內(nèi)每天于采食后第0、4、8、12、16、20和24 h采集瘤胃液，用4層紗布過濾后，立即測(cè)定pH；然后再以5 000 r/min的速度離心，收集上清液，并分裝于2個(gè)塑料瓶中，-20 ℃冷凍保存。其中一瓶根據(jù)Broderick等[10]描述的方法，用分光光度計(jì)測(cè)定氨態(tài)氮(NH3-N)含量。另一瓶用25%偏磷酸酸化后，用Agilent 6890N氣相色譜儀測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸(VFA)含量[11]。

1.3.3 尿樣的收集與分析

在每個(gè)試驗(yàn)期的采樣期內(nèi)，采用Cao等[12]描述的方法，連續(xù)3 d全收糞尿。將每天所收集的糞樣混合均勻后，準(zhǔn)確稱取總糞量的2%，加入1/4糞重的10%濃度的酒石酸，混合均勻并于60 ℃烘干回潮，粉碎后保存待測(cè)，糞樣中的各種營(yíng)養(yǎng)成分的分析指標(biāo)和方法同飼料樣品。為防止尿樣的腐敗分解，在集尿桶中預(yù)加入200 mL 10%的稀硫酸以使pH<3.0，每天取總尿量的2%，用4層紗布過濾后，分裝于2個(gè)塑料品，于-20 ℃冷凍保存。其中一瓶按照凱氏定氮法測(cè)定總氮含量[8]，另一瓶采用試劑盒的方法測(cè)定尿素氮含量[13]。

1.3.4 血樣采集與檢測(cè)

在每個(gè)試驗(yàn)期的采樣期內(nèi)于最后1 d晨飼后4 h，使用肝素抗凝一次性真空采血管，通過尾靜脈采集血樣10 mL，4 000 r/min的速度離心分離血漿，分裝于1.5 mL離心管中，于-20 ℃保存待檢。血漿中葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、非酯化脂肪酸(NEFA)、β-羥基丁酸(BHBA)和尿素氮(UN)含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性使用全自動(dòng)生化分析儀(Technicon Instruments Corp.，Chauncey，美國(guó))測(cè)定；血漿瘦素(Leptin)、胰島素(Ins)、胰高血糖素(GLN)含量使用放射性免疫試劑盒(Linco Research，Inc.，St. Charles，美國(guó))測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

本試驗(yàn)按照拉丁方設(shè)計(jì)，用SAS 9.1的GLM過程進(jìn)行分析。瘤胃發(fā)酵參數(shù)采用以下數(shù)學(xué)模型：

Yijk=μ+Ti+Pj+Ck+Sl+Ti×Sl+eijkl。

式中：Yijk為試驗(yàn)牛在不同飼糧處理下的因變量值；μ為均值；Ti為飼糧處理效應(yīng)；Pj為試驗(yàn)期效應(yīng)；Ck為試驗(yàn)牛的隨機(jī)影響(k=1～4)；Sl為采樣時(shí)間(l=0、4、8、12、16、20、24 h)；Ti×Sl為處理與采樣時(shí)間的互作；eijkl為誤差項(xiàng)。

其他數(shù)據(jù)采用SAS 9.1的GLM方差分析程序進(jìn)行分析，均值采用Tukey檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P<0.05表示差異顯著，P<0.10作為有差異的趨勢(shì)來討論。

2 結(jié)果與分析

2.1 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛干物質(zhì)采食量和泌乳性能的影響

由表2可知，泌乳早期補(bǔ)飼ESB有提高奶牛產(chǎn)奶量(P=0.070)和ECM (P=0.068)的趨勢(shì)。隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，乳尿素氮含量顯著增加(P<0.05),乳脂率有降低的趨勢(shì)(P=0.081)，而非脂乳固體和乳尿素氮含量顯著增加(P<0.05)，脂蛋比顯著降低(P<0.05)。

2.2 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響

由表3可知，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，泌乳早期奶牛瘤胃pH有下降的趨勢(shì)(P=0.062)；NH3-N含量顯著增加(P<0.05)；丙酸、戊酸和異戊酸含量顯著升高(P<0.05)；ESB補(bǔ)飼水平為2.0 kg/d時(shí)，乙酸/丙酸顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

2.3 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表4可知，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，CP、EE攝入量和糞中EE排出量顯著增加(P<0.05)；CP和EE表觀消化率顯著提高(P<0.05)，DM表觀消化率有增加的趨勢(shì)(P=0.061)。

表2 泌乳早期補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)奶牛泌乳性能的影響

表3 泌乳早期補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響

表4 泌乳早期補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)奶牛養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.4 泌乳早期奶牛補(bǔ)飼ESB對(duì)氮代謝的影響

由表5可知，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，總攝入氮、尿氮和尿中尿素氮排泄量、糞尿氮總排泄量、尿氮占總攝入氮的比例以及氮沉積顯著增加(P<0.05)，而糞氮占總攝入氮的比例顯著下降(P<0.05)；尿素氮占總尿氮的比例有下降的趨勢(shì)(P=0.063)。

表5 泌乳早期補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)奶牛氮代謝的影響

續(xù)表5項(xiàng)目 ItemsESB補(bǔ)飼水平 ESB supplemental level/(kg/d)0 (對(duì)照 Control)1.0 2.0 3.0SEMP值P-value尿素氮占總尿氮的比例Ratio of urea N to total urinary N/% 59.8754.4057.6257.460.730.063沉積氮 N retention/(g/d)3)91.02a117.04ab117.71ab134.58b5.400.034

2.5 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛血液指標(biāo)的影響

由表6可知，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，泌乳早期奶牛血漿尿素氮含量顯著增加(P<0.05)，而當(dāng)ESB補(bǔ)飼水平為2.0 kg/d時(shí)，血漿總膽紅素含量有下降的趨勢(shì)(P=0.072)。

表6 泌乳早期補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)奶牛血液指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛干物質(zhì)采食量和泌乳性能的影響

本試驗(yàn)中補(bǔ)飼不同水平的ESB對(duì)泌乳早期奶牛的干物質(zhì)采食量沒有顯著影響，產(chǎn)奶量提高，但乳脂率有下降的趨勢(shì)，這與前人研究報(bào)道結(jié)果[14-15]基本一致。Yan等[16]研究表明，在不同玉米青貯、苜蓿青貯條件下，添加或不添加膨化大豆，對(duì)干物質(zhì)采食量、乳蛋白、乳脂和乳糖含量均沒有影響。紀(jì)鵬等[17]研究表明，在以羊草和玉米青貯為粗飼料的泌乳初期奶牛飼糧中，用膨化大豆替代部分精料使飼糧脂肪含量在5%左右，對(duì)干物質(zhì)采食量沒有顯著影響，可以提高飼糧養(yǎng)分表觀消化率，并且增加產(chǎn)奶量，但是對(duì)乳脂的生成有一定程度的抑制作用。Kennelly等[18]和Dhiman等[19]的研究結(jié)果表明，當(dāng)飼糧脂肪含量小于6%時(shí)，添加脂肪的種類和數(shù)量對(duì)泌乳牛干物質(zhì)采食量都不會(huì)有顯著影響[20]。但也有研究表明，添加油脂對(duì)奶牛干物質(zhì)采食量有一定的抑制作用，其抑制程度可能與油脂添加量和飼糧結(jié)構(gòu)有關(guān)[21-22]。本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼ESB的奶牛干物質(zhì)采食量更高，可能是因?yàn)檠a(bǔ)飼ESB導(dǎo)致能量和蛋白質(zhì)攝入量增加[23]。

在各組干物質(zhì)采食量無顯著差異的情況下，補(bǔ)飼ESB組產(chǎn)奶量有提高的趨勢(shì)。一方面可能是因?yàn)镋SB增加了飼糧中脂肪含量，提高了飼糧能量水平及養(yǎng)分的消化率，從而促進(jìn)了泌乳，這與Meignan等[24]研究結(jié)果一致。另一方面，膨化處理后抑制了大豆中抗?fàn)I養(yǎng)因子活性并增加了大豆過瘤胃蛋白的比例，從而為小腸段消化提供了更多的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)和必需氨基酸，促進(jìn)了泌乳潛力的發(fā)揮[25]。試驗(yàn)組較高的乳蛋白、乳糖和SNF產(chǎn)量則可能是由于較高的產(chǎn)奶量和飼糧養(yǎng)分消化率所致。本試驗(yàn)中，補(bǔ)飼ESB后乳脂率有降低的趨勢(shì)，與Zhang等[7]的報(bào)道結(jié)果一致。這一方面可能與較多的產(chǎn)奶量對(duì)乳成分的稀釋作用有關(guān)，另一方面可能與補(bǔ)飼ESB后瘤胃中乙酸/丙酸降低有關(guān)。乙酸是合成乳脂重要的前體物，乙酸和丙酸之間存在適當(dāng)?shù)谋壤?。因?yàn)橐宜岷铣芍舅璧倪€原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)主要是由GLU經(jīng)磷酸戊糖途徑生成，當(dāng)細(xì)胞質(zhì)中NADPH的含量不足時(shí)，會(huì)限制乙酸的利用；而丙酸是反芻動(dòng)物GLU異生的主要前體物質(zhì)，所以只有乙酸/丙酸適當(dāng)，才能保證乙酸的充分利用，進(jìn)而保證一定的乳脂率。Dawod等[6]報(bào)道，泌乳牛飼糧中添加膨化亞麻籽和ESB可以提高產(chǎn)奶量，但降低乳脂率。這可能是因?yàn)樵谌橄偌?xì)胞中，外源性的脂肪酸與從頭合成的短鏈脂肪酸在脂化過程中發(fā)生相互競(jìng)爭(zhēng)，外源性的脂肪酸可對(duì)產(chǎn)脂酶發(fā)生負(fù)反饋?zhàn)饔茫种屏酥舅岬膹念^合成，從而降低了乳脂中短鏈脂肪酸的含量。另外，還有大量研究表明，飼糧添加未保護(hù)脂肪會(huì)在一定程度上抑制微生物尤其是纖維分解菌的活性，進(jìn)而降低纖維消化，減少乙酸生成，從而降低乳脂率。膨化處理使含脂量很高的大豆中脂肪暴露出來，這有可能是導(dǎo)致試驗(yàn)組奶牛乳脂率降低的主要原因。除脂肪因素外，ESB中較高的蛋白質(zhì)含量也可能是產(chǎn)奶量和乳成分的重要影響因子。Depeters等[26]認(rèn)為，飼糧CP水平對(duì)奶牛的產(chǎn)奶量以及乳成分的作用是通過影響CP攝入量、CP與飼糧能量間的互作實(shí)現(xiàn)的。

另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，泌乳早期奶牛乳尿素氮含量顯著增加，這可能是由于ESB中蛋白質(zhì)含量較高，補(bǔ)飼奶牛的氮攝入量明顯增加造成的。與Giallongo等[27]結(jié)果一致。Dawod等[6]研究表明，在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上，按13∶3的比例添加膨化亞麻籽和膨化大豆可以顯著提高乳尿素氮和血漿尿素氮含量。Harper等[14]用ESB替代溶劑提取豆粕飼喂泌乳奶牛發(fā)現(xiàn)對(duì)乳尿素氮含量沒有顯著影響。Webb等[28]在評(píng)價(jià)棉籽粕完全替代豆粕飼喂泌乳奶牛的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，飼喂棉籽粕的奶牛乳尿素氮含量降低，即豆粕使乳尿素氮含量增加。前人在統(tǒng)計(jì)大量的研究結(jié)果后發(fā)現(xiàn)，飼糧CP水平與乳尿素氮含量顯著相關(guān)，飼糧CP水平是影響乳尿素氮含量程度最大的營(yíng)養(yǎng)因素。Nousiainen等[29]認(rèn)為乳尿素氮含量與攝入氮和飼糧CP水平高度相關(guān)，乳尿素氮含量可以用來預(yù)測(cè)奶牛飼糧CP水平。

3.2 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響

大量試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加脂肪對(duì)瘤胃的pH變化影響不大，但對(duì)揮發(fā)性脂肪酸含量和比例、NH3-N的含量及微生物的組成和比例有不同程度的影響[30-31]。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，泌乳早期奶牛瘤胃pH有下降的趨勢(shì)，NH3-N含量顯著增加，丙酸、戊酸和異戊酸含量顯著升高，當(dāng)ESB補(bǔ)飼水平為2.0 kg/d時(shí)，乙酸/丙酸顯著低于對(duì)照組。ESB中除含有較多脂肪外，還含有豐富的蛋白質(zhì)和部分碳水化合物，這可能是與直接添加脂肪對(duì)瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生影響的主要原因。Van Houtert[32]認(rèn)為，瘤胃微生物達(dá)到最大生長(zhǎng)速度的適宜pH在5.7以上。因?yàn)椋鑫竝H決定著瘤胃微生物對(duì)底物的利用效率。當(dāng)瘤胃pH<6.2時(shí)微生物合成蛋白質(zhì)的效率下降[25]。本試驗(yàn)中，當(dāng)ESB補(bǔ)飼水平為2.0和3.0 kg/d時(shí)，瘤胃平均pH低于6.2，表明在此添加水平下，瘤胃微生物蛋白合成效率降低。

瘤胃NH3-N主要來源于食糜中的蛋白質(zhì)和非蛋白氮(NPN)的降解，瘤胃NH3-N含量的高低在一定程度上反映了蛋白質(zhì)降解與合成間所達(dá)到的平衡狀況。瘤胃內(nèi)NH3-N作為纖維分解菌的必需氮源、非纖維分解菌的部分氮源，是影響微生物活力的一項(xiàng)重要指標(biāo)。關(guān)于微生物最佳生長(zhǎng)的NH3-N含量，Satter等[33]試驗(yàn)結(jié)果表明，NH3-N含量小于5 mg/dL時(shí)發(fā)酵的“解偶聯(lián)”作用引起微生物的產(chǎn)量降低，生產(chǎn)效率下降，該值被廣泛用作瘤胃最低NH3-N含量的標(biāo)準(zhǔn)。Preston等[34]報(bào)道微生物生長(zhǎng)對(duì)NH3-N含量耐受的臨界范圍為6～30 mg/dL。本試驗(yàn)中各組奶牛瘤胃NH3-N含量均在適宜范圍之內(nèi)，但是隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，瘤胃NH3-N含量顯著增加，這可能是因?yàn)镋SB中的瘤胃降解蛋白質(zhì)含量較高造成的。因此，如果ESB補(bǔ)飼水平過大，有可能會(huì)導(dǎo)致瘤胃能氮不平衡，微生物無法有效利用合成微生物蛋白而造成氮損失。

反芻動(dòng)物的消化能60%～80%由瘤胃揮發(fā)性脂肪酸提供，揮發(fā)性脂肪酸為奶牛的代謝過程和牛奶合成提供了大部分的能量前體[35]，同時(shí)，揮發(fā)性脂肪酸也是奶牛乳成分的重要合成原料，其中乙酸是乳脂合成前體，而丁酸對(duì)乳脂合成也有正效應(yīng)，丙酸則有利于乳糖的合成且降低乳脂率。Woodford等[36]研究表明，乙酸/丙酸大于2.5時(shí)可維持正常的乳脂合成。本試驗(yàn)中各組奶牛瘤胃中乙酸/丙酸在3.0～3.6，因此均能維持奶牛正常合成乳脂的需要。但是隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，丙酸含量顯著升高，ESB補(bǔ)飼水平為2.0 kg/d時(shí)，乙酸/丙酸顯著低于對(duì)照組。這可能是因?yàn)橹参镉椭械牟伙柡椭舅釋?duì)瘤胃微生物所產(chǎn)生的毒害作用，對(duì)瘤胃的發(fā)酵產(chǎn)生了一定的負(fù)面影響[37]。有研究表明，大豆油籽中的多不飽和脂肪酸影響瘤胃發(fā)酵模型，降低了乙酸/丙酸[13,38]。

3.3 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛養(yǎng)分表觀消化率和氮代謝的影響

很多研究結(jié)果表明，當(dāng)添加過多的油脂或者改變飼糧中的油脂比例，可能會(huì)對(duì)瘤胃微生物產(chǎn)生毒害作用，進(jìn)而影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率[39-40]。本試驗(yàn)中隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，NDF和ADF表觀消化率雖然有所降低，但差異不顯著。推測(cè)可能是因?yàn)橛椭诹鑫钢醒杆籴尫牛瑥亩种屏鑫肝⑸飳?duì)纖維的降解[41]。但Harper等[14]在比較奶牛對(duì)ESB和溶劑提取豆粕(SSB)消化率發(fā)現(xiàn)，即使ESB的EE含量比SSB高23%～25%，對(duì)全腸道消化率并沒有影響。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，CP和EE表觀消化率顯著增加，DM表觀消化率有增加的趨勢(shì)，與紀(jì)鵬等[17]的研究結(jié)果一致。但胡志勇等[42]發(fā)現(xiàn)，在高粗料奶牛飼糧(精粗比為40∶60)中，添加4%豆油、4%胡麻油及2%豆油+2%胡麻油后，對(duì)奶牛干物質(zhì)采食量、瘤胃發(fā)酵、有機(jī)物質(zhì)和纖維物質(zhì)瘤胃及其全腸道消化率沒有顯著影響。Giallongo等[27]研究結(jié)果表明，飼糧添加ESB與SSB相比，對(duì)所有養(yǎng)分的消化率增加或有增加的趨勢(shì)。

氮代謝是動(dòng)物氮需要量的研究基礎(chǔ)，深入了解動(dòng)物的氮代謝有助于保證滿足動(dòng)物氮的營(yíng)養(yǎng)需要，在發(fā)揮最大生產(chǎn)性能的同時(shí)又能盡量減少氮的排泄量。在本試驗(yàn)中，尿氮排出量隨氮的攝入量增加而顯著增加，而糞氮排出量比較穩(wěn)定。Tamminga等[43]指出，年單產(chǎn)為6 250 kg鮮乳的荷斯坦奶牛，氮的采食量在175 kg/年，僅有20%的氮轉(zhuǎn)化為牛奶或沉積到體組織，而28.5%以糞氮形式排出，50.3%以尿氮形式排出。有研究表明，增加飼糧CP攝入量能夠?qū)е履虻判沽垦杆僭黾覽44]，超過動(dòng)物蛋白質(zhì)需要量的幾乎所有的氮都是通過尿液排出體外[45]。因此，糞氮排泄量相當(dāng)穩(wěn)定，與干物質(zhì)采食量呈一定比例。大多數(shù)奶牛飼糧氮消化率很高，微生物蛋白消化率也很高，提高奶牛氮消化率可能性不大[44]。這可能是本試驗(yàn)和以往研究中糞氮排泄量未顯著受到飼糧CP水平影響的主要原因。Mulligan等[46]的研究表明，奶牛氮攝入量與糞氮、尿氮及總氮排泄量呈正相關(guān)關(guān)系。本試驗(yàn)中，隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，也發(fā)現(xiàn)了相似的結(jié)果，這可能是因?yàn)镋SB中CP含量較高，補(bǔ)飼ESB后奶牛攝入氮顯著增加，被動(dòng)物機(jī)體消化吸收后不被利用的部分主要以尿素的形式排放于尿液中。但也有研究表明奶牛糞、尿氮排泄量不隨氮攝入量的增加而增加[14,26]。

多數(shù)學(xué)者認(rèn)為當(dāng)奶牛飼糧中CP水平在一定水平時(shí)，產(chǎn)奶量和乳蛋白產(chǎn)量最大，而奶牛氮的排泄量相對(duì)較低，如果CP水平超過這個(gè)值，產(chǎn)奶量下降或者沒有影響，說明飼糧CP水平過高。本試驗(yàn)中當(dāng)ESB補(bǔ)飼水平達(dá)到2.0 kg/d以上時(shí)，產(chǎn)奶量增幅很小，表明在本試驗(yàn)條件下，當(dāng)飼糧CP達(dá)到這個(gè)水平時(shí)(17.13%)已滿足或超過奶牛泌乳和維持需要。Groff等[47]的研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于35.5～40.0 kg/d產(chǎn)奶量的奶牛來說，飼糧15%～17% CP水平對(duì)維持產(chǎn)奶有益，超過17%后對(duì)生產(chǎn)性能無益。另外，由于受反芻動(dòng)物瘤胃影響，奶牛氮代謝過程不易量化，但通過對(duì)乳尿素氮和血漿尿素氮含量的檢測(cè)，可以從側(cè)面了解奶牛機(jī)體氮代謝狀況，從而評(píng)估奶牛的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)狀況和飼糧中CP與能量攝入平衡情況。Carder等[48]也認(rèn)為，泌乳早期補(bǔ)充MP或氨基酸對(duì)生產(chǎn)性能產(chǎn)生的影響可以是短期的(產(chǎn)奶量)，也可以是長(zhǎng)期的(乳成分)。

3.4 泌乳早期補(bǔ)飼ESB對(duì)奶牛血液指標(biāo)的影響

血漿尿素氮大部分是氨基酸在肝臟代謝而產(chǎn)生或從大腸吸收的氨合成的，因此血漿尿素氮含量可反映動(dòng)物蛋白質(zhì)代謝狀況，作為機(jī)體蛋白質(zhì)沉積的一個(gè)指標(biāo)。本研究中隨著ESB補(bǔ)飼水平的增加，泌乳早期奶牛血漿尿素氮含量顯著增加。這可能主要是由于補(bǔ)飼ESB后，飼糧CP水平顯著增加，奶牛攝入氮增加造成的。有研究表明，血漿尿素氮與蛋白質(zhì)攝入量呈正相關(guān)[49]，血漿中尿素含量高主要來源于飼糧中高含量的蛋白質(zhì)降解產(chǎn)物。根據(jù)Whitelaw等[50]的研究，血漿尿素氮與瘤胃NH3-N含量存在線性相關(guān)。因此本試驗(yàn)中補(bǔ)飼ESB后，奶牛瘤胃NH3-N含量顯著增加，也是血漿尿素氮含量增加的重要原因。另外，由于尿素是小分子物質(zhì)，血液中的尿素氮通過向乳中擴(kuò)散，隨著牛奶排出體外，同時(shí)乳和血液中的尿素氮含量也保持著一定的動(dòng)態(tài)平衡，二者緊密正相關(guān)。Baker等[51]研究表明，血漿尿素氮含量具有在1 d中的變化幅度較大的特點(diǎn)，不利于不同試驗(yàn)結(jié)果的比較，其在奶牛營(yíng)養(yǎng)中的應(yīng)用受到了很大的限制，而乳尿素氮含量能代表1 d中血漿尿氮含量的平均水平，因此乳尿素氮含量可以更準(zhǔn)確地反映機(jī)體氮代謝的情況。再加上測(cè)定乳尿素氮含量的取樣簡(jiǎn)單方便，測(cè)定容易、準(zhǔn)確，這使得乳尿素氮含量測(cè)定在奶牛生產(chǎn)中的應(yīng)用越來越廣泛。

膽紅素是血液循環(huán)中衰老紅細(xì)胞在肝臟、脾臟及骨髓的單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中分解和破壞的產(chǎn)物。血液中的膽紅素有80%～85%來源于紅細(xì)胞中血紅蛋白的分解，其余15%～20%來自骨髓內(nèi)紅細(xì)胞前體細(xì)胞的破壞及其他組織中的血紅素蛋白，進(jìn)入血液中的膽紅素與白蛋白結(jié)合后輸送到肝臟代謝，經(jīng)肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化后排入毛細(xì)膽管并隨膽汁排出，若機(jī)體內(nèi)生成膽紅素過多超過了肝細(xì)胞的處理能力，或者肝細(xì)胞處理膽紅素的能力下降，以及膽紅素排泄障礙等均可使血中膽紅素含量增高。膽紅素含量是反映肝功能的指標(biāo)之一[52]。如果肝細(xì)胞發(fā)生脂變性，血中的膽紅素就不易進(jìn)入肝臟，這樣形成的大分子物質(zhì)就很難進(jìn)入肝細(xì)胞。血中膽紅素含量升高幅度不明顯時(shí)，其對(duì)肝細(xì)胞損害就不是一個(gè)靈敏的指標(biāo)，但肝臟疾病中膽紅素含量明顯增高，常反映出肝細(xì)胞有嚴(yán)重的損害。本試驗(yàn)中，當(dāng)ESB補(bǔ)飼水平為2.0 kg/d時(shí)，血漿總膽紅素含量有下降的趨勢(shì)，與Zhang等[7]研究結(jié)果一致。這表明泌乳早期奶牛補(bǔ)飼ESB后改善了能量平衡，減輕了肝臟負(fù)荷，從而引起血漿總膽紅素含量的降低。

4 結(jié) 論

泌乳早期奶牛補(bǔ)飼ESB后，CP、EE和DM的表觀消化率以及氮沉積量增加，但乳脂率有下降趨勢(shì)。當(dāng)ESB補(bǔ)飼水平為2.0 kg/d時(shí)，血漿總膽紅素含量有下降的趨勢(shì)；當(dāng)補(bǔ)飼水平為2.0和3.0 kg/d時(shí)，瘤胃液丙酸含量顯著升高，可促進(jìn)肝糖原異生，增加泌乳早期奶牛的能量供給，但可能會(huì)導(dǎo)致瘤胃微生物蛋白合成效率降低。隨ESB的補(bǔ)飼水平增加，尿氮排出量增加，而糞氮排出量比較穩(wěn)定，同時(shí)乳尿素氮和血漿尿素氮含量顯著提高。綜合考慮，在本試驗(yàn)條件下，泌乳早期奶牛補(bǔ)飼1.0～2.0 kg/d ESB，有利于緩解能量負(fù)平衡并提高生產(chǎn)性能。