李貞明 余 苗 馬現(xiàn)永 容 庭 崔藝燕 李書宏 劉志昌*

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所，農(nóng)業(yè)部華南動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，畜禽育種國家重點實驗室，廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點實驗室，廣東省畜禽肉品質(zhì)量安全控制與評定工程技術(shù)研究中心，廣州 510640；2.清遠市龍發(fā)種豬有限公司，英德 511500)

在規(guī)?；笄蒺B(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中，畜禽在屠宰前須經(jīng)歷一系列的宰前應(yīng)激，運輸應(yīng)激便是其中一種。運輸應(yīng)激是多種應(yīng)激源(抓捕、裝籠、運輸、卸載和環(huán)境變化等)共同作用的結(jié)果[1]。研究表明，運輸應(yīng)激嚴(yán)重影響畜禽的生產(chǎn)性能、代謝水平、免疫力、抗氧化功能和肉品質(zhì)等[2-4]。運輸應(yīng)激降低了動物福利，而動物福利一直備受關(guān)注，因此，提高動物福利，緩解運輸應(yīng)激對畜禽的影響尤為重要。飼糧中添加抗應(yīng)激產(chǎn)品是解決運輸應(yīng)激的有效措施，目前抗應(yīng)激產(chǎn)品主要有維生素類、礦物質(zhì)和植物提取物等[5]。其中植物提取物抗應(yīng)激產(chǎn)品具有綠色、安全和無殘留等優(yōu)點，是當(dāng)前研究的熱點。大量研究表明，植物提取物可作為抗應(yīng)激產(chǎn)品緩解運輸應(yīng)激等應(yīng)激源對動物機體的影響[6-8]。

據(jù)國家統(tǒng)計局統(tǒng)計，2019年全國柑橘種植面積達26 173 km2，產(chǎn)量達4 584.54萬t，是種植面積最大、產(chǎn)量最多的國家。柑橘提取物富含黃酮類、多糖和有機酸等活性物質(zhì)，具有抗菌、抗病毒和抗氧化等功能[9-11]。研究前期發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加柑橘提取物可改善黃羽肉雞運輸后機體的代謝水平，調(diào)控激素分泌，提高抗氧化能力[2]。但對于飼糧中添加柑橘提取物是否可減少黃羽肉雞運輸后的體重?fù)p失、改善屠宰性能、提高肌肉抗氧化能力和肉品質(zhì)還不得而知。鑒于此，本試驗通過在飼糧中添加柑橘提取物，研究其對黃羽肉雞運輸后體重?fù)p失、屠宰性能、肌肉抗氧化能力和肉品質(zhì)的影響，旨在為柑橘提取物在肉雞運輸應(yīng)激的防治中提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

試驗選取1日齡快速型黃羽肉雞母雞360只，隨機分成2組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)30只雞。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，柑橘提取物組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加10 mg/kg柑橘提取物(柑橘提取物由潤森公司提供，是柑橘汁、檸檬汁、甘油和水的復(fù)合果汁，其中果汁含量為50%，經(jīng)檢測其主要有效成分為總黃酮2.48%、有機酸2.38%、多糖1.20%)的試驗飼糧?；A(chǔ)飼糧參照NRC(1994)營養(yǎng)需要進行配制，制成顆粒料，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗期63 d，期間肉仔雞自由采食和飲水，按正常飼養(yǎng)程序和免疫程序進行飼養(yǎng)管理和免疫接種。于63日齡時，試驗雞禁食不禁水12 h后，采用2×3因子試驗設(shè)計，每個重復(fù)選6只雞進行運輸應(yīng)激試驗，分別運輸0、2和4 h，運輸條件參照前期發(fā)表的文章[2]，即：雞籠尺寸(90 cm×60 cm×40 cm)，內(nèi)裝6只雞，運輸當(dāng)天環(huán)境溫度為11～21 ℃，車廂內(nèi)的溫度為20 ℃，相對濕度為70%，選用小型開放式運輸車連續(xù)運輸，運輸路面均為柏油路，坡度少，平均車速約為60 km/h。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items1～21日齡 1 to 21 days of age22～42日齡 22 to 42 days of age43～63日齡 43 to 63 days of age合計 Total100.00100.00100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)粗蛋白質(zhì) CP20.9619.2117.49鈣 Ca1.000.900.81總磷 TP0.680.640.57有效磷 AP0.450.400.34賴氨酸 Lys1.100.950.85蛋氨酸 Met0.550.480.40代謝能 ME/(MJ/kg)12.1312.5512.97

1.2 試驗儀器

HI8424型pH計(北京Hanna儀器科學(xué)技術(shù)有限公司)，CR-410型色差儀(日本美能達公司)，Instron 4411型嫩度儀(美國英斯特朗公司)，HH-4型恒溫水浴鍋(金壇市杰瑞爾電器有限公司)。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 體重?fù)p失

運輸前，稱量每只雞的活體重。運輸2和4 h后，再稱量每只雞的活體重。

體重?fù)p失=運輸前的活體重(始重)-
運輸后的活體重(末重)。

1.3.2 屠宰性能

屠宰性能相關(guān)指標(biāo)的測定參照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T 823—2004)。

1.3.3 肌肉抗氧化指標(biāo)

肉雞運輸后頸靜脈放血致死，取左側(cè)胸肌用于測定肌肉抗氧化指標(biāo)。樣品處理方法與李貞明等[11]的一致，即：取部分胸肌樣品，加10倍體積(m/V)的4 ℃生理鹽水，在冰浴下勻漿，隨后于4 000 r/min條件下離心，取上清，置于-80 ℃冰箱中保存，待測。按照試劑盒說明檢測肌肉中總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.3.4 肉品質(zhì)指標(biāo)

運輸試驗結(jié)束后，肉雞進行屠宰，完整剝離左側(cè)胸肌，去除周圍脂肪組織等，分別測定pH、肉色、滴水損失和嫩度。具體操作步驟參照李貞明等[11]的方法。

pH：宰后45 min和24 h(4 ℃條件下保存)，選擇3個相同部位，用pH計測定胸肌pH。

肉色：宰后45 min和24 h(4 ℃條件下保存)，選擇3個相同部位，用色差儀測定胸肌亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)。

滴水損失：取長×寬×厚約4 cm×3 cm×2 cm的肉塊，稱滴水前重，用鐵絲勾住一端吊在吹氣袋中。4 ℃條件儲存，24 h后拭去肉塊表面的水分，稱滴水后重。用以下公式計算滴水損失。

滴水損失(%)=[(滴水前重-滴水后重)/
滴水前重]×100。

嫩度：取胸肌樣品，4 ℃條件儲存24 h后，將溫度計插入胸肌樣品中心處。置于80 ℃的恒溫水浴鍋中，待胸肌樣品中心溫度達到70 ℃，取出后，流水冷卻。隨后按肌纖維方向取直徑約1 cm的肉條。用嫩度儀測定嫩度值。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

體重?fù)p失、屠宰性能、肌肉抗氧化能力和肉品質(zhì)的結(jié)果數(shù)據(jù)以單一雞個體為統(tǒng)計單位，采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件中GLM過程Univariate進行方差分析，采用Duncan氏法進行多重比較檢驗，數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P<0.05表示差異顯著。其中全模型包括飼糧處理(dietary treatment，DT)和運輸時間(transportation time，TT)2個固定效應(yīng)及二者互作效應(yīng)(TT×DT)。

2 結(jié) 果

2.1 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后體重?fù)p失的影響

由表2可知，飼糧處理與運輸時間對快速型黃羽肉雞的體重?fù)p失存在顯著交互作用(P<0.05)；與對照組相比，運輸2和4 h后柑橘提取物組的體重?fù)p失顯著降低(P<0.05)；運輸時間顯著影響體重?fù)p失(P<0.05)，隨著時間的延長，體重?fù)p失越來越大(P<0.05)。不同飼糧處理和運輸時間對快速型黃羽肉雞的始重和末重均無顯著影響(P>0.05)。

2.2 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后屠宰性能的影響

由表3可知，與對照組相比，運輸0、2和4 h后柑橘提取物組快速型黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率均顯著升高(P<0.05)。不同飼糧處理和運輸時間對快速型黃羽肉雞的腹脂率無顯著影響(P>0.05)。

表2 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后體重?fù)p失的影響

表3 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后屠宰性能的影響

2.3 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后肌肉抗氧化能力的影響

由表4可知，與對照組相比，運輸0、2和4 h后柑橘提取物組快速型黃羽肉雞胸肌中的MDA含量顯著降低(P<0.05)；運輸時間顯著影響胸肌中的MDA含量(P<0.05)，隨著時間的延長，MDA含量顯著升高(P<0.05)。與對照組相比，運輸2和4 h后柑橘提取物組快速型黃羽肉雞胸肌中的GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)；運輸時間顯著影響胸肌中的GSH-Px活性(P<0.05)，隨著時間的延長，GSH-Px活性顯著降低(P<0.05)。不同飼糧處理和運輸時間對快速型黃羽肉雞胸肌中的T-SOD活性和T-AOC均無顯著影響(P>0.05)。

表4 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后肌肉抗氧化能力的影響

2.4 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后肉品質(zhì)的影響

表5 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后肉品質(zhì)的影響

續(xù)表5項目Items0 hCCE2 hCCE4 hCCEP值 P-valueTTDTTT×DT45 min紅度a?45 min12.72±0.13a13.53±0.52a11.27±0.45b13.16±0.34a9.42±0.51c12.83±0.45a<0.010<0.0100.01524 h紅度a?24 h12.41±0.2812.24±0.2312.68±0.1812.32±0.2512.46±0.3312.52±0.230.7430.4530.72145 min黃度b?45 min17.10±0.6017.52±0.9117.39±0.7018.01±0.6617.13±0.8117.73±0.850.8750.3880.99124 h黃度b?24 h19.45±0.8921.49±0.9921.14±0.6621.20±0.6020.38±0.7421.22±0.550.6510.1240.426

3 討 論

3.1 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后體重?fù)p失的影響

運輸應(yīng)激會導(dǎo)致動物生產(chǎn)性能下降[12-13]。運輸過程中，在各種應(yīng)激源的作用下，動物機體的神經(jīng)、內(nèi)分泌和代謝水平均會發(fā)生變化，使其處于一種緊張興奮、耗氧量和產(chǎn)熱量增加的狀態(tài)，一方面提高動物機體的適應(yīng)性和抗應(yīng)激能力，另一方面卻使動物機體的體重下降和體溫升高[14]。Gou等[3]研究發(fā)現(xiàn)，運輸應(yīng)激嚴(yán)重影響肉雞的生長性能，運輸時間越長，體重?fù)p失越大。Karaman[15]研究也發(fā)現(xiàn)，運輸時間與肉雞的體重?fù)p失呈正相關(guān)。本試驗結(jié)果顯示，對照組和柑橘提取物組肉雞的體重?fù)p失與運輸時間呈正相關(guān)，這與Gou等[3]和Karaman[15]的研究結(jié)果相一致。前期研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加柑橘提取物可改善運輸應(yīng)激后肉雞機體的代謝水平，可調(diào)控運輸應(yīng)激后肉雞機體的激素分泌[2]。本試驗結(jié)果顯示，運輸2和4 h后，對照組快速型黃羽肉雞的體重?fù)p失顯著高于柑橘提取物組，可能是因為飼糧中添加柑橘提取物使肉雞機體內(nèi)的代謝水平和激素分泌處于一個穩(wěn)定平衡的狀態(tài)，提高了肉雞機體的抗應(yīng)激能力，降低了運輸應(yīng)激的影響。

3.2 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后屠宰性能的影響

屠宰性能是反映肉雞生長性能的重要指標(biāo)，可直接反映肉雞可食部分的比例，其中胸肌率和腿肌率在肉雞生產(chǎn)中占有重要地位。本試驗結(jié)果顯示，柑橘提取物組快速型黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率顯著高于對照組，說明飼糧中添加柑橘提取物可改善黃羽肉雞的屠宰性能，這與試驗前期的研究結(jié)果[11]一致。本研究中，隨著運輸時間的延長，快速型黃羽肉雞的體重?fù)p失增加。黃羽肉雞的總體重?fù)p失主要包括身體本身的損失和排泄物的排放。排泄物造成的體重?fù)p失主要與禁食時間有關(guān)，本試驗禁食12 h，因此，可排除這一因素。此外，運輸應(yīng)激對黃羽肉雞的胸肌率、腿肌率和腹脂率無顯著影響，這與Gou等[3]和Zhang等[16]的研究結(jié)果一致。由此可知，體重?fù)p失的部分可能是肉雞機體的非胴體部分，也許與脫水有關(guān)。

3.3 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后肌肉抗氧化能力的影響

在運輸過程中，黃羽肉雞處于應(yīng)激狀態(tài)下，其機體內(nèi)呼吸作用加強，代謝紊亂，活性氧(reactive oxygen species，ROS)增多，ROS在線粒體內(nèi)膜和基質(zhì)中被進一步轉(zhuǎn)化成氧化自由基[17]。一般情況下，黃羽肉雞機體內(nèi)的氧化自由基會被抗氧化酶等清除，但在運輸應(yīng)激狀態(tài)下，黃羽肉雞機體內(nèi)氧化自由基產(chǎn)生與清除之間的動態(tài)平衡遭到破壞，多余的氧化自由基在機體內(nèi)積累，對黃羽肉雞的機體造成氧化損傷[18-19]。MDA是脂質(zhì)過氧化的結(jié)果，其含量直接反映了氧化損傷的程度；GSH-Px是動物機體內(nèi)過氧化氫等的清除劑，其活性直接反映了動物機體的抗氧化能力[20-21]。本試驗結(jié)果顯示，運輸應(yīng)激提高了快速型黃羽肉雞機體內(nèi)的MDA含量，并降低了GSH-Px活性，也就是說，運輸應(yīng)激嚴(yán)重影響了黃羽肉雞機體的抗氧化能力。這與Zhang等[22]的研究結(jié)果一致。此外，本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加柑橘提取物可降低快速型黃羽肉雞機體內(nèi)的MDA含量，并提高GSH-Px活性，因此，柑橘提取物可提高黃羽肉雞機體的抗氧化能力。研究表明，黃酮類、有機酸和多糖類物質(zhì)具有較強的抗氧化能力[23-24]。而柑橘提取物中富含黃酮類、有機酸和多糖類等活性物質(zhì)。也就是說，柑橘提取物提高黃羽肉雞機體的抗氧化能力可能與其富含的黃酮類、有機酸和多糖類等活性物質(zhì)有關(guān)，但具體作用機制還有待進一步研究。

3.4 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運輸應(yīng)激后肉品質(zhì)的影響

滴水損失、剪切力、pH和肉色等指標(biāo)是反映肉品質(zhì)的重要指標(biāo)。剪切力是肌肉嫩度的直觀指標(biāo)，兩者呈負(fù)相關(guān)。本試驗結(jié)果顯示，運輸應(yīng)激提高了快速型黃羽肉雞胸肌的剪切力，降低了肌肉的嫩度?？赡苁且驗樵趹?yīng)激狀態(tài)下，黃羽肉雞的呼吸作用加強，肌細胞內(nèi)的能量消耗巨大，肌動蛋白和肌球蛋白合成的肌動球蛋白無法分開，導(dǎo)致黃羽肉雞的肌肉收縮，剪切力加大，嫩度降低[25]。研究表明，多糖類物質(zhì)可提高動物肝糖原的含量[26]。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加柑橘提取物可降低快速型黃羽肉雞胸肌的剪切力，提高肌肉的嫩度?？赡苁且驗楦涕偬崛∥锔缓嗵穷愇镔|(zhì)，提高了黃羽肉雞肝糖原的含量，為應(yīng)激狀態(tài)下的黃羽肉雞提供了大量的能量，緩解了運輸應(yīng)激對肌肉嫩度的影響[26]。

在本試驗中，3個階段基礎(chǔ)飼糧的價格分別約為3.12、3.09和3.01 元/kg，飼糧添加10 mg/kg的柑橘提取物，使基礎(chǔ)飼糧的價格約提高了0.02元/kg。根據(jù)前期試驗結(jié)果可知，對照組3個階段的料重比分別約為2.04、2.25和3.44；柑橘提取物組3個階段的料重比分別約為1.93、2.16和2.84。由上可知，一只肉雞生長1 kg，1～21日齡，對照組約花6.36元，柑橘提取物組約花6.06元；22～42日齡，對照組約花6.95元，柑橘提取物組約花6.72元；43～63日齡，對照組約花10.35元，柑橘提取物組約花8.60元。因此，飼糧中添加10 mg/kg柑橘提取物并不會降低黃羽肉雞的經(jīng)濟效益，可作為抗應(yīng)激產(chǎn)品應(yīng)用于肉雞生產(chǎn)中。

4 結(jié) 論

① 運輸時間與體重?fù)p失成正相關(guān)，運輸時間越長，體重?fù)p失越大；飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著降低黃羽肉雞的體重?fù)p失。

② 飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著提高黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率。

③ 運輸應(yīng)激顯著降低黃羽肉雞機體的抗氧化能力；飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著提高黃羽肉雞機體的抗氧化能力。

④ 運輸應(yīng)激顯著影響黃羽肉雞的肉品質(zhì)；飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著改善黃羽肉雞的肉品質(zhì)。