龔建英，王華新，汪小玉，梁 萍，覃 榮，唐遒冥，陳寶玲，蘇莉花

（1.廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院，廣西南寧 530002；2.廣西國有高峰林場，廣西南寧 530001）

‘綠瑩’石斛（Dendrobium'Lyuying'）為筆者研究團隊通過自主培育獲得的石斛屬新品種。該品種具有花朵數量多、色彩分明、有花香、四季常綠和適應性強等優(yōu)點，有良好的市場應用前景。無菌播種培育的‘綠瑩’石斛種苗，株型緊湊，花色穩(wěn)定，一次成苗量大，能快速滿足市場需求。但‘綠瑩’石斛無菌播種苗存在萌芽率低、開花時間參差不齊、著花假鱗莖偏少和開花株培育周期長等問題，制約了‘綠瑩’石斛的規(guī)模化和產業(yè)化發(fā)展。目前，關于石斛屬植物萌芽及開花方面的研究，主要是以石斛無菌播種苗或外植體為對象，利用外源激素開展組織培養(yǎng)或試管誘導，加快種苗繁育，縮短育種進程[1-5]。外源激素在調節(jié)植物萌芽、生根和開花等方面具有用量少、速度快和效益高等優(yōu)點，被廣泛應用于大田作物、經濟作物、林木、蔬菜及花卉等的萌芽和生根試驗中。赤霉素（GA3）可誘導錦繡杜鵑（Rhodo?dendron pulchrum）[6]、鐵線蓮（Clematis florida）[7]和碗蓮（Nelumbo nucifera）[8]等觀賞植物開花，使花期提前或延遲，提高花朵質量；奈乙酸（NAA）可提高唐菖蒲（Gladiolus gandavensis）[9]和墨蘭（Cymbidium Si?nense）[10]等植物的開花品質和數量，開花整齊度提高，花期較集中；茉莉酸（JA）可誘導水稻（Oryza sati?va）和小麥（Triticum aestivum）等多種農作物的穎花提前或集中開放，改善開花品質，提高制種效率[11]；6-芐氨基嘌呤（6-BA）能有效促進蝴蝶蘭（Phalae?nopsis aphrodite）[12]和春石斛（DendrobiumNobile-Typ）[13]的花芽分化，提高抽梗率、雙梗率和開花率。本研究選用以上4 種外源激素，探索其對‘綠瑩’石斛無菌播種苗萌芽和開花的影響，以期篩選出適宜的外源激素種類和濃度，促使‘綠瑩’石斛快速成苗，縮短初花所需時間，提高新芽數、產花量和開花整齊度，為‘綠瑩’石斛的產業(yè)化發(fā)展提供依據，并為其他種類石斛的開花誘導提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料為3年生‘綠瑩’石斛無菌播種大苗，由廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院國家石斛屬種質資源庫提供。外源激素GA3、JA、NAA 和6-BA 購自上海國藥。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設計

采用隨機區(qū)組試驗設計，每個激素設置3個濃度，分別為GA3（5、10 和20 mg/L）、JA（5、10 和20 mg/L）、NAA（5、15 和30 mg/L）和6-BA（25、50 和100 mg/L），以清水為對照（CK）；共13個處理，每處理9盆，重復3 次。2018年1月1日開始試驗，每10 天灌根結合葉面噴施激素溶液1 次，連續(xù)施用6 次，2018年2月28日結束試驗。

1.2.2 試驗條件及管理

將‘綠瑩’石斛無菌播種苗種于2.5 寸營養(yǎng)杯內，每株約5 個假鱗莖，置于溫室大棚內，根據基質干濕情況每7～10 天澆水1 次。溫室大棚內的栽培環(huán)境為溫度15～27 ℃，光照強度5 000～8 000 lx，空氣相對濕度70%～80%。

1.2.3 指標觀測

觀測并記錄萌芽時間、萌芽數、新芽高、新芽粗、開花株數、抽花芽時間、顯花蕾時間、始花時間、末花時間和開花重復數（觀測每個重復中是否有植株開花），統(tǒng)計從試驗開始（2018年1月1日）至抽花芽所需天數、至顯花蕾所需天數、至始花所需天數和至末花所需天數及花芽至末花天數和始花至末花天數，計算開花率和開花重復比例。對每個重復均能開花的處理，記錄花橫徑、花縱徑、花序數、單花序花朵數和單株開花總量。

采用游標卡尺測量新芽高、新芽粗、花橫徑和花縱徑（精確至0.01 mm）。

1.3 數據處理

采用Excel 2007 軟件進行統(tǒng)計分析；采用DPS V9.01 軟件進行差異顯著性檢測（Duncan’s 多重比較）。

2 結果與分析

2.1 不同處理對‘綠瑩’石斛萌芽的影響

不同濃度GA3和JA 處理的萌芽時間最早（3月6日），比CK 處理提前了20 天；不同濃度6-BA 處理的萌芽時間與CK處理一樣（3月26日）；不同濃度NAA 處理的萌芽時間最晚（6月2日），比CK 處理延遲67天（表1）。不同處理的萌芽數和新芽高差異顯著（P< 0.05），新芽粗差異不顯著。6-BA 100 mg/L處理的萌芽數最多（6.9 個），顯著多于CK 處理（3.9個）（P< 0.05）；其次為6-BA 25 和50 mg/L 處理，萌芽數與CK 處理一樣，均為3.9 個；其他處理的萌芽數均少于CK處理。不同激素處理的新芽均高于CK處理；6-BA 25和50 mg/L處理的新芽最高（31.1 cm），與CK 處理差異顯著（P<0.05）；其次為不同濃度JA處理，新芽高分別為28.9、28.3 和28.2 cm，均與CK處理差異顯著（P< 0.05）；6-BA 100 mg/L 處理的新芽最矮（18.2 cm），與CK處理差異不顯著。

表1 不同處理對‘綠瑩’石斛萌芽的影響Tab.1 Effects of different treatments on germination of D.'Lyuying'

2.2 不同處理對‘綠瑩’石斛花期的影響

GA35 mg/L 處理的花芽至末花天數為32 天，始花至末花天數為8天，始花所需時間為124天，比CK處理延遲15 天；GA310 和20 mg/L 處理的植株均未能開花（表2）。JA 5 和10 mg/L 處理的花芽至末花天數分別為42 和20 天，始花至末花天數分別為10和7 天，始花所需時間分別為106 和120 天，分別比CK 處理提前3 天和延遲11 天；JA 20 mg/L 處理的植株未能開花。不同濃度NAA 處理均能使植株開花；5 和15 mg/L 兩個濃度處理間差別不大，花芽至末花天數分別為40和39天，始花至末花天數分別為9和8 天，始花所需時間分別為107 和105 天，分別比CK處理提前2 和4 天；30 mg/L 處理的花芽至末花天數為33 天，始花至末花天數為9 天，始花所需時間為115 天，比CK 處理延遲6 天。不同濃度6-BA 處理均能使植株開花；不同濃度間差別不大，花芽至末花天數為43～45 天，始花至末花天數為8～10 天，始花所需時間為109～112天，與CK處理基本一致。

表2 不同處理對‘綠瑩’石斛花期的影響Tab.2 Effects of different treatments on flowering period of D.'Lyuying'

續(xù)表2 Continued

2.3 不同處理對‘綠瑩’石斛開花效果的影響

不同處理的開花株數和開花率差異顯著（P<0.05）（表3）。不同濃度6-BA 處理的開花株數較多，開花率較高，3 個處理間差異不顯著，均顯著高于CK 處理（P<0.05），開花株數為5.0～6.0株，開花率為55.6%～66.7%。不同濃度GA3、JA 和NAA 處理的開花株數和開花率均與CK 處理差異不顯著；其中，GA35 mg/L、JA 10 mg/L 和NAA 30 mg/L 處理的開花株數和開花率與CK 處理相同。不同濃度6-BA 處理的開花重復數均為3 個，開花重復比例均為100%，即每個重復均能誘導開花，開花效果最穩(wěn)定。不同濃度NAA 處理的開花重復數為1～3 個，開花重復比例為33.3%～100.0%，適宜濃度的每個重復均能誘導開花，濃度過低或過高開花重復少；GA3和JA處理均只有1～2種濃度能誘導開花，開花效果不穩(wěn)定。

表3 不同處理對‘綠瑩’石斛開花效果的影響Tab.3 Effects of different treatments on flowering effect of D.'Lyuying'

2.4 不同激素處理對‘綠瑩’石斛開花品質的影響

13 個處理中，每個重復均能開花的僅4 個處理（NAA 15 mg/L 和不同濃度6-BA 處理）。4 個處理間，花橫徑、花縱徑和單花序花朵數差異不顯著，花間距、花序數和單株開花總量差異顯著（P< 0.05）（表4）。NAA 15 mg/L處理的花間距最大（0.80 cm），與其他處理差異顯著（P<0.05），其他處理間差異不顯著。6-BA 25 mg/L 處理的花序數最多（3.5枝），其次為6-BA 50 mg/L 處理（3.1 枝），兩者間差異不顯著，均與其他兩個處理差異顯著（P< 0.05）。6-BA 25 mg/L 處理的單株開花總量最高（74.0 朵），其次為6-BA 50 mg/L 處理（60.3朵），兩者間差異不顯著，均與其他兩個處理差異顯著（P<0.05）。總體上，不同濃度6-BA處理的開花品質較好。

表4 不同激素處理對‘綠瑩’石斛開花品質的影響Tab.4 Effects of different hormone treatments on flowering quality of D.'Lyuying'

3 討論與結論

3.1 討論

外源激素在調節(jié)植物生長、促進開花及提高開花品質等方面有重要作用，激素種類主要有6-BA、NAA、GA3、JA、多效唑（PP333）、噻苯?。═DZ）和乙烯利（ETH）等，其效果因植物種類、作用方式和濃度等不同而不同[11，14-18]。生長方面，6-BA 100 mg/L 處理的‘綠瑩’石斛萌芽數最多，顯著高于CK 處理，新芽高和粗與CK 處理差異不顯著；不同濃度GA3、JA 和NAA 處理的萌芽數均少于CK 處理，新芽均顯著高于CK 處理，與李振堅等[19]的研究結論一致，與田高飛等[20]關于大紅三角梅（Bougainvillea spectabilis'Crimsonlake'）的研究結果不同，可能是因為石斛與三角梅不同屬，生物特性差異較大。開花方面，不同濃度6-BA 處理的‘綠瑩’石斛開花率均顯著高于CK處理，開花品質均較好，其中25 mg/L處理的單株開花總量達到74.0 朵，說明6-BA 對‘綠瑩’石斛開花率和開花量作用明顯；呂秉韜等[12]的研究中，不同濃度6-BA 處理能顯著增加蝴蝶蘭的花葶數，促進花葶生長，并增加蝴蝶蘭的花朵數與花朵直徑，與本研究結果一致。本研究中，不同濃度6-BA 處理的‘綠瑩’石斛花期與CK處理基本一致；黎維詩等[13]的研究表明，不同濃度6-BA 處理的春石斛花期與CK 處理差異不明顯；孔德政等[8]的研究表明，50 和100 mg/L 6-BA 處理的碗蓮花期與CK 處理一樣；楊鳳璽等[21]研究表明，不同濃度6-BA 處理的建蘭（Cymbidium ensifolium）初花期與CK處理基本一致。

相對于單激素處理，激素混合使用的效果更佳。陳娟等[6]研究表明，不同濃度GA3、6-BA、KT、GA3+ 6-BA 和GA3+ KT 處理均可使錦繡杜鵑的花蕾發(fā)育進程顯著加快，開花期提前，花朵體積增大，其中GA3+KT處理的效果最好。楊鳳璽等[21]的研究中，6-BA 100 mg/L + GA350 mg/L 處理對建蘭開花的促進效果最佳，初花期提前9天，花朵數量增加1倍多。王磊等[18]的研究中，60 mg/L 6-BA+150 mg/L GA3+20 mg/L NAA 處理的換錦花（Lycoris sprengeri）花期推后，花的品質得到改善。章金輝等[22]以春石斛品種‘Carmen’為試材，上山處理加噴施植物生長調節(jié)劑（GA3、TDZ 和PP333），顯著提高了花芽株誘導率、開花節(jié)數和單株開花朵數。本研究采用單一外源激素進行處理，激素組合處理對‘綠瑩’石斛生長和開花效果的影響有待進一步研究。

3.2 結論

不同濃度6-BA 處理均能促進‘綠瑩’石斛萌芽，其中100 mg/L 處理的萌芽數最多。不同濃度GA3處理下，只有5 mg/L 處理的植株能開花；不同濃度JA 處理下，5 和10 mg/L 處理的植株能開花；不同濃度NAA 處理的植株均能開花；不同濃度6-BA 處理的植株均能開花，且花期均與CK 處理差別不大。不同濃度6-BA 處理的開花株數、開花率和開花重復比例均較高，開花效果最穩(wěn)定。6-BA 25 mg/L 處理的‘綠瑩’石斛開花效果較好，開花品質最佳，開花率為55.6%，花橫徑為3.6 cm，花序數為3.5 枝，花朵數為21.0 朵，單株開花總量為74.0 朵。適宜濃度的6-BA 在促進‘綠瑩’石斛萌芽、提高花量和品質等方面效果顯著。