章海燕 張祖宏

（南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科，江蘇 南京 210000）

心血管疾病，特別是冠狀動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的一個重要因素就是血脂異常[1]。既往研究中認(rèn)為低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平與動脈粥樣硬化性心血管疾?。╝therosclerosis cardiovascular disease，ASCVD）之間關(guān)系密切[2]。而最新的大規(guī)模人群研究發(fā)現(xiàn)，三酰甘油（triglyceride，TG）水平與ASCVD發(fā)生同樣也是密切相關(guān)的[3]。TG每增加1 mmol/L，ASCVD的發(fā)病率增加22%。多不飽和脂肪酸是體內(nèi)重要的脂類物質(zhì)，一般通過天然食物攝入，根據(jù)第一個雙鍵出現(xiàn)在甲基端碳原子的位置不同，主要分為ω-3族和ω-6族不飽和脂肪酸。有研究發(fā)現(xiàn)，增加ω-3族不飽和脂肪酸攝入，可以通過降低三酰甘油酶表達(dá)下降，抑制肝臟三酰甘油合成關(guān)鍵酶或增加清除等機(jī)制來降低TG水平[4]。臨床上將ω-3制劑作為治療高三酰甘油血癥（HTG）一線或二線用藥[5]，與他汀類藥物合用可以降低ASCVD發(fā)生風(fēng)險。本文采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測冠心病患者（包括部分高血壓患者）血清中不飽和脂肪酸譜的含量水平，與TG情況進(jìn)行比較，希望能夠找到冠心病患者血脂異常情況下特征性的不飽和脂肪酸譜的含量變化，為下一步探索不飽和脂肪酸，特別是ω-3族在ASCVD治療中的作用打好基礎(chǔ)。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2019—2020年在南京醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心內(nèi)科就診患者130例，其中診斷為冠心病患者91例，診斷為高血壓病患者39例，男性71例，女性59例，年齡（68.77±5.12）歲，未接受過脂肪酸相關(guān)制劑、藥物的治療，簽署知情同意書。

1.2 方法 收集患者的一般情況，包括年齡、性別、BMI等；采用生化方法檢測患者外周血的TG水平，根據(jù)最新版的《動脈粥樣硬化患者三酰甘油升高的管理中國專家共識》將TG＜1.7 mmol/L定義為TG水平正常。通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，檢測患者的多不飽和脂肪酸指標(biāo)。本研究為回顧性研究。

1.3 不飽和脂肪酸譜檢測 使用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)平臺檢測患者靜脈血樣本中的不飽和脂肪酸譜項目。主要檢驗設(shè)備為AB SCIEX API 3200液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)，其中液相設(shè)置條件為進(jìn)樣量：5 μL/min，自動進(jìn)樣器溫度：室溫，柱溫：40 ℃，流速：600 μL/min。質(zhì)譜條件為ESI電壓：5 500 V，離子源溫度：600 ℃，碰撞氣體（CAD）：6 psi，窗簾氣體（CUR）：25 psi，離子源氣體（GS1）：65 psi，離子源氣體（GS2）：60 psi。采用正離子MRM掃描分析。檢測試劑采用不飽和脂肪酸譜商品化檢測試劑盒，檢測項目包括ω-3族不飽和脂肪酸、ω-6族不飽和脂肪酸和計算值。其中ω-3族不飽和脂肪酸為α-十八碳三烯酸（α-C18：3，ALAα-亞麻酸）、ω-3-二十二碳五烯酸（ω-3-C22：5）、二十碳五烯酸（C20：5，EPA）和二十二碳六烯酸（C22：6，DHA），ω-6族包括十八碳二烯酸（C18：2）、γ-十八碳三烯酸（γ-C18：3）、二十碳四烯酸（C20：4，AA）、ω-6-二十二碳五烯酸（ω-6-C22：5）4種不飽和脂肪酸。同時計算這些脂肪酸中ω-6族（C18：2，γ-C18：3，AA，ω-6-C22：5）與ω-3族（α-C18：3，ω-3-C22：5，EPA，DHA）之間的比值：ω-6/ω-3。參考范圍采用試劑盒自帶說明。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用IBM SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料呈偏態(tài)分布，以中位數(shù)（M）和四分位數(shù)（P25-P75）表示，兩組間比較使用Mann-WhitneyU檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)和百分?jǐn)?shù)表示。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同疾病種類不飽和脂肪酸濃度比較 91例冠心病患者與39例高血壓患者比較，發(fā)現(xiàn)ω-3族和ω-6族不飽和脂肪酸及ω-6/ω-3比值含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 冠心病組與高血壓組不飽和脂肪酸濃度比較（μmol/L）

2.2 不同三酰甘油水平不飽和脂肪酸濃度比較 所有130例患者中，96例患者的三酰甘油水平＜1.7 mmol/L，劃分為血脂正常組，其余34例患者的三酰甘油水平≥1.7 mmol/L，劃分為血脂異常組。將這兩組的不飽和脂肪酸譜濃度進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)ω-3族不飽和脂肪酸譜中的α-C18：3（ALA）水平有顯著性差異（P＜0.05），ω-6族不飽和脂肪酸譜中的γ-C18：3水平有顯著性差異（P＜0.05），其余6種不飽和脂肪酸濃度和ω-6/ω-3比值差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同血脂水平間不飽和脂肪酸濃度比較（μmol/L）

2.3 冠心病患者不同三酰甘油水平不飽和脂肪酸濃度比較 在冠心病患者中，血脂正常（TG＜1.7 mmol/L）70例（占比76.92%），血脂異常（≥1.7 mmol/L）21例（占比23.08%），二者間不飽和脂肪酸譜濃度進(jìn)行比較，同樣發(fā)現(xiàn)ω-3族不飽和脂肪酸譜中的α-C18：3（ALA）水平有顯著性差異（P＜0.05），ω-6族不飽和脂肪酸譜中的γ-C18：3水平有顯著性差異（P＜0.05），其余6種不飽和脂肪酸濃度和ω-6/ω-3比值差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。而比較兩組間不飽和脂肪酸譜濃度的中位數(shù)，則發(fā)現(xiàn)血脂正常組ω-3族及ω-6族不飽和脂肪酸濃度中位數(shù)均低于血脂異常組，但ω-6/ω-3比值中位數(shù)高于血脂異常組。見表3。

表3 冠心病不同血脂水平不飽和脂肪酸濃度比較（μmol/L）

2.4 冠心病患者不同性別不同血脂水平不飽和脂肪酸濃度比較 血脂正常組和血脂異常組在針對性別進(jìn)行分層后，分析不飽和脂肪酸濃度水平，發(fā)現(xiàn)男性患者群體中，ω-3族和ω-6族不飽和脂肪酸及ω-6/ω-3比值差異均沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。而在女性患者群體中，發(fā)現(xiàn)ω-3族不飽和脂肪酸中的C20：5（EPA）和ω-6族不飽和脂肪酸譜中的γ-C18：3水平有顯著性差異（P＜0.05），其余6種不飽和脂肪酸濃度和ω-6/ω-3比值差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表4 冠心病患者不同性別不同血脂水平不飽和脂肪酸濃度比較（μmol/L）

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)血脂異常的心血管疾病患者的α-C18：3（ALA，α-亞麻酸）和γ-C18：3水平與血脂正常的群體相比出現(xiàn)了顯著性差異，中位數(shù)水平是高于血脂正常的群體。在單獨對冠心病患者分析的亞組分析中，同樣發(fā)現(xiàn)了α-亞麻酸水平在血脂異常組中的水平高于血脂正常組。α-亞麻酸在亞麻籽油、植物油中含量豐富，肉制品和奶制品也可以提供α-亞麻酸[6]。同時可以通過一系列碳鏈延長酶和去飽和酶的作用，合成ω-3族中非常重要的兩種物質(zhì)，DHA和EPA。臨床上發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)?shù)財z入魚油或直接使用ω-3族不飽和脂肪酸，對于心血管疾病有預(yù)防和治療作用[7-9]。從心血管危險因素角度出發(fā)，適當(dāng)?shù)靥嵘?3族不飽和脂肪酸水平時，在高血壓中可以通過上調(diào)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶Ⅱ活性，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放前列環(huán)素和一氧化氮等機(jī)制改善動脈順應(yīng)性，從而降低血壓[10]；而在動脈粥樣硬化中，則可以通過改善內(nèi)皮功能、減輕炎性反應(yīng)、穩(wěn)定斑塊等機(jī)制來抑制動脈粥樣硬化的進(jìn)程。本研究發(fā)現(xiàn)α-亞麻酸水平的增高是出現(xiàn)在患者體內(nèi)血脂異常狀態(tài)時，提示血脂異常時，體內(nèi)會代償性地減少α-亞麻酸代謝和轉(zhuǎn)化，增加貯存，從而提高體內(nèi)的α-亞麻酸水平，增強(qiáng)降血脂的功能。本研究所納入的患者未接受過脂肪酸相關(guān)制劑、藥物的治療，所以不存在超過普通人群的高ω-3族不飽和脂肪酸攝入水平，所以這種補償機(jī)制可能并不完全有效。此外，α-亞麻酸可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成EPA和DHA，男性α-亞麻酸轉(zhuǎn)化EPA和DHA轉(zhuǎn)化率最高僅8%和4%，女性則可達(dá)到21%和9.2%，女性的高轉(zhuǎn)化率，與本研究中血脂異常女性中，發(fā)現(xiàn)ω-3族不飽和脂肪酸中的EPA水平提高的結(jié)果是相一致的。提高的EPA水平，降低了ω-6/ω-3比值，研究發(fā)現(xiàn)ω-6/ω-3比值在血脂異常組中的中位數(shù)低于血脂正常組，側(cè)面印證冠心病患者血脂異常情況下機(jī)體自我調(diào)節(jié)作用，因為既往研究中發(fā)現(xiàn)這一比值減少，與心腦血管疾病發(fā)生發(fā)展減緩有關(guān)系[11-12]。而當(dāng)血脂在正常水平時，即使已經(jīng)存在冠心病或高血壓疾病，體內(nèi)可能不會啟動代償機(jī)制，上調(diào)ω-3族不飽和脂肪酸水平來減緩血脂異常。

在血脂異常的女性患者中，發(fā)現(xiàn)ω-6族不飽和脂肪酸譜中的γ-C18：3水平與血脂正常女性有顯著性差異，在ω-3族中則是EPA水平與血脂正常女性有顯著性差異。這提示血脂異常的冠心病患者群體中不飽和脂肪酸譜的變化可能同樣受到性別的影響，可能與前述的α-亞麻酸轉(zhuǎn)化EPA和DHA轉(zhuǎn)化率中性別差異相關(guān)。