武彩紅,邱樹磊,劉劍華,劉 莉,袁 橙,陸 輝*,劉 浩
(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院,江蘇泰州 225300;2.泰州醫(yī)藥高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)鳳凰畜牧獸醫(yī)站,江蘇泰州 225300)
養(yǎng)豬業(yè)是畜禽養(yǎng)殖的重要組成部分,經(jīng)濟新常態(tài)下,我國養(yǎng)豬業(yè)正朝著規(guī)?;?、智能化和特色化方向發(fā)展。但當前我國養(yǎng)豬業(yè)正面臨三大瓶頸,豬只飼養(yǎng)效率低、免疫力低和對激素、抗生素過度依賴。自抗生素作為飼料添加劑被應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)已70多年,雖促進了養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,但也帶來了動物耐藥、動物性食品質(zhì)量安全、生態(tài)環(huán)境污染等一系列問題,嚴重威脅人類健康和生命(王蕾蕾和許金新,2021)。在這樣的背景下,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部194號公告要求,我國從2020年1月1日起退出除中藥外的所有促生長類藥物飼料添加劑品種。
隨著飼料禁抗的推行,豬病特別是腸道疾病易發(fā),而仔豬抵抗力低,腸道發(fā)育尚未完全,更易發(fā)生腹瀉(陳維和譚濤,2021)。母豬健康狀態(tài)及免疫功能是影響哺乳仔豬健康成長的重要因素(郭劍英等,2014)。因此,為維持和提高養(yǎng)豬生產(chǎn)效益,如何突破養(yǎng)豬業(yè)瓶頸,選擇合適的替抗方案備受關(guān)注。中藥作為添加劑具有獨特優(yōu)勢,具有來源天然、功能多樣、安全可靠、經(jīng)濟環(huán)保等特點。許多研究表明,中草藥及其提取物具有抗菌、抗病毒,提高動物機體免疫力等作用(馬洪第等,2011)。因此,本試驗在臨產(chǎn)母豬日糧中添加復(fù)方中藥,研究其對母豬免疫力及仔豬腹瀉的影響。
1.1 試驗動物和分組 試驗將12只健康、臨產(chǎn)前1個月母豬隨機分為4組,每組3只,1組為對照組,每天飼喂正常日糧;2~4組分別為低、中和高劑量復(fù)方中藥組,在日糧中分別添加0.3、0.6和0.9 g/kg復(fù)方中藥。試驗期內(nèi),母豬及仔豬的日常管理均按照日常飼養(yǎng)管理執(zhí)行。
分別在試驗開始后第0、10、20和30天母豬空腹耳緣靜脈采集血液,將其分為2份,一份用于分離血清,-20℃保存,用于體液免疫指標測定;另一份為EDTA抗凝血,用于細胞免疫指標測定。
1.2 復(fù)方中藥組方及制備 主藥博落回、澤瀉、泡桐花、馬齒莧、葛根、黃芪等按照一定比例混合后粉碎,然后于溫箱中烘干后分裝,密封、避光保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3 方法
1.3.1 體液免疫測定方法 按照豬IgG ELASA檢測試劑盒說明書測定特異性IgG含量。
1.3.2 細胞免疫測定方法 參照武彩紅等(2017)方法,抗凝血經(jīng)裂解、離心和固定處理后,采用流式細胞儀測定外周血淋巴細胞亞群CD3+含量和CD4+/CD8+值。
1.3.3 仔豬腹瀉評價方法 出生后14d為仔豬腹瀉試驗期。仔豬腹瀉率為腹瀉仔豬數(shù)占供試總仔豬數(shù)的百分率;腹瀉指數(shù)為仔豬糞便評分與供試總仔豬數(shù)的比值。對仔豬腹瀉評分參照顏誠等(2012)方法,外觀條形或粒狀糞便,評為0分;軟糞、成形,評為1分;稠狀、不成形、糞水無分離現(xiàn)象,評為2分;不成形、糞水分離,評為3分。
1.4 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件中的ANOVA進行統(tǒng)計分析。
2.1 日糧中添加復(fù)方中藥對母豬血清IgG含量的影響 由圖1可見,添加復(fù)方中藥后第10天,各給藥組血清IgG含量與對照組無顯著差異(P>0.05);至第20和30天時,所有給藥組血清IgG含量均顯著高于對照組(P<0.05),但在第20和30天時,低、中劑量組較高劑量組均增加明顯。
圖1 日糧中添加復(fù)方中藥對母豬血清IgG含量的影響
2.2 日糧中添加復(fù)方中藥對母豬CD3+含量和CD4+/CD8+值的影響 由圖2可知,添加復(fù)方中藥后第10天,各給藥組血液CD3+含量與對照組無顯著差異(P>0.05);至第20和30天時,所有給藥組血液CD3+含量均顯著高于對照組(P<0.05),但以中劑量組較低、高劑量組升高更為明顯。
圖2 日糧中添加復(fù)方中藥對母豬CD3+含量的影響
由圖3可知,添加復(fù)方中藥后,低劑量組僅在第30天CD4+/CD8+值顯著高于對照組(P< 0.05),高劑量僅在 20d時 CD4+/CD8+值顯著高于對照組(P<0.05),而中劑量組在用藥后各測定日齡CD4+/CD8+值均顯著高于對照組(P<0.05)。
圖3 日糧中添加復(fù)方中藥對母豬CD4+/CD8+的影響
2.3 日糧中添加復(fù)方中藥對仔豬腹瀉的影響從圖4可知,低劑量給藥組仔豬腹瀉率為12.49%,與對照組仔豬腹瀉率(14.76%)無顯著差異(P>0.05);中劑量組和高劑量組仔豬腹瀉率分別為9.78%和11.4%,均顯著低于對照組(P<0.05);給藥組間相比,中劑量組仔豬腹瀉率顯著低于其他兩組,也存在顯著差異(P<0.05)。
圖4 日糧中添加復(fù)方中藥對仔豬腹瀉率的影響
從圖5可知,各組間仔豬腹瀉指數(shù)均存在統(tǒng)計學差異(P<0.05)。低、中、高劑量組仔豬腹瀉指數(shù)分別為0.30、0.19和0.26,均顯著低于對照組(0.41,P<0.05)。各給藥組之間仔豬腹瀉指數(shù)也具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
圖5 日糧中添加復(fù)方中藥對仔豬腹瀉指數(shù)的影響
初生仔豬消化器官未發(fā)育完全,體溫調(diào)節(jié)機能不全,免疫力低下,很容易受到致病因子侵襲,生產(chǎn)實踐中尤以仔豬腹瀉最為常見,不僅影響仔豬存活率,而且嚴重影響其后期的生長性能,成為制約養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要疾病之一。母豬健康狀況很大程度決定了仔豬體況,因此,許多學者提出“母源療法”(王榮梅等,2015;蘇榮勝等,2014;顏誠,2012;盤春秀,2007)。本試驗根據(jù)臨產(chǎn)母豬及初始仔豬的生理特點,根據(jù)中藥藥性及功效,選用主藥博落回、澤瀉、泡桐花、馬齒莧、葛根、黃芪等組成復(fù)方中藥添加于臨產(chǎn)前母豬飼料中,借此提高母豬免疫力,預(yù)防仔豬腹瀉,提高生產(chǎn)性能。
3.1 日糧中添加復(fù)方中藥對母豬免疫力的影響機體免疫反應(yīng)包括細胞免疫和體液免疫。IgG反映機體全身免疫狀態(tài),是體液免疫最具代表性的指標之一。研究表明,當機體受到外界病原侵襲時,免疫球蛋白會結(jié)合抗原或病原菌對機體產(chǎn)生保護作用,其中IgG對機體發(fā)揮重要作用(Sheila等,2019)。細胞免疫通過T淋巴細胞介導(dǎo),CD3+、CD4+、CD8+為T淋巴細胞的3個主要亞群。其中CD3+代表動物機體外周血T淋巴細胞總數(shù)(武彩紅等,2017),是T淋巴細胞的特異性表面標志。CD4+細胞和CD8+細胞分泌具有抗病毒特性的細胞因子,產(chǎn)生抗體等多種途徑為機體提供保護性免疫(屈雪琪等,2011),其二者比值反映了機體的免疫防御能力(屈雪琪等,2001)。
本試驗通過給臨產(chǎn)母豬飼喂復(fù)方中藥,各給藥組都在一定程度上表現(xiàn)為血液中IgG含量及CD3+含量增加,CD4+/CD8+值增高,說明該復(fù)方中藥可有效提高母豬的免疫力。
3.2 日糧中添加復(fù)方中藥對仔豬腹瀉的影響仔豬腹瀉容易虛脫,嚴重則會引發(fā)死亡,在養(yǎng)豬業(yè)危害中居首位。本研究基于“母源療法”和“子病治母”理論,于臨產(chǎn)母豬日糧中添加復(fù)方中藥,以期達到“未病先防”功效。腹瀉率和腹瀉指數(shù)分別反映仔豬腹瀉發(fā)生的比列和嚴重程度(顏誠等,2012),本研究將二者相結(jié)合用于評價仔豬腹瀉狀況。研究發(fā)現(xiàn),在臨產(chǎn)母豬日糧中添加復(fù)方中藥可有效降低腹瀉率和腹瀉指數(shù),且中劑量復(fù)方中藥組效果更明顯。說明在母豬日糧中合理添加復(fù)方中藥可在一定程度上改善仔豬腹瀉的發(fā)病及發(fā)病程度。