種 振，高 波，羅 川，胡 雨

(1.安徽華潤金蟾藥業(yè)股份有限公司，安徽 淮北 235000 ；2.華潤三九醫(yī)藥股份有限公司，廣東 深圳 518000)

菟絲子是南方菟絲子CuscutaaustralisR.Br.或菟絲子CuscutachinensisLam.的成熟種子。味辛、甘，平，具有固精縮尿，安胎，明目的功效[1～3]。菟絲子的主要化學(xué)成分有黃酮、有機酸、氨基酸及腦磷脂等[2,4～5]。臨床上多用于腎虛胎漏，胎動不安，目昏耳鳴，脾腎虛瀉；外治白癜風(fēng)[1～2]。金絲桃苷是菟絲子的主要單體成分之一，具有較強的抗氧化功能[6]。菟絲子鹽炙后能引藥歸腎，增強補腎固澀的作用，用于下元虛弱、腰膝酸軟等。臨床常用的炮制品為鹽菟絲子，通常采用鹽炙法進行加工炮制[2,7～9]?！吨袊幍洹?015版描述的鹽菟絲子炮制工藝缺少可控的工藝參數(shù)[10]。目前，關(guān)于鹽菟絲子炮制工藝研究的文獻[7～8]，多以金絲桃苷、槲皮素等為評價指標，缺少對鹽菟絲子外觀性狀的描述評價。而筆者研究以外觀性狀及金絲桃苷為指標，采用正交設(shè)計[11]，考察悶潤時間，鹽炙溫度，鹽炙時間3個因素，優(yōu)選菟絲子鹽炙的炮制工藝，以期為菟絲子鹽炙的擴大生產(chǎn)提供參考。

1 儀器和試劑

1.1 儀器

高效液相色譜儀色譜系統(tǒng)，包括四元梯度輸液泵、色譜柱溫箱、二極管陣列紫外檢測器、Chromeleon 7 色譜管理系統(tǒng)；C18色譜柱、超聲清洗儀、XP26型百萬分之一電子天平、粉碎機

1.2 試劑

菟絲子(批號：2003001)、金絲桃苷(批號：111521-201809；中國食品藥品檢定研究院)、乙腈(色譜級)、甲醇(色譜級)；研究用的菟絲子飲片購自亳州某飲片公司，經(jīng)鑒定為：旋花科植物菟絲子Cuscuta chinensis Lam.的干燥成熟種子[1,7～8]。

2 方法

2.1 金絲桃苷的測定

2.1.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性 C18色譜柱，流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(17∶83)，檢測波長：360 nm；流速為 1.0mL.min-1，柱溫：25℃，進樣量為10 μL。理論板數(shù)應(yīng)≥5 000(以金絲桃苷峰計算)，色譜峰對稱性較好[1]。見圖1。

t/min

2.1.2 對照品溶液的制備 取對照品金絲桃苷適量，參照《中國藥典》(2015版)菟絲子藥材標準含量測定項對照品溶液的制備方法制備對照品溶液，即得[1]。

2.1.3 供試品溶液的制備 參照《中國藥典》(2015版)菟絲子藥材標準含量測定項供試品溶液的制備方法制備樣品溶液，即可[1]。

2.2 正交試驗

2.2.1 鹽菟絲子工藝的正交試驗設(shè)計 基于菟絲子鹽炙加工文獻檢索綜述[5，7～8]及單因素試驗考察，利用L9(34) 正交設(shè)計，考察悶潤透心時間(A)、鹽炙溫度(B)、鹽炙時間(C) 3個因素，以外觀性狀及金絲桃苷為指標，優(yōu)選鹽菟絲子的炮制工藝。各因素水平見表1。

表1 正交設(shè)計因素水平

2.2.2 外觀性狀的評分標準 現(xiàn)行版《中國藥典》及《安徽省中藥飲片炮制規(guī)范》2005版[10]鹽菟絲子性狀項下描述：形如菟絲子，表面棕黃色，裂開，略有香氣[1,12]。筆者試驗研究按照正交設(shè)計制備加工菟絲子鹽炙品，參照2015版藥典及炮制規(guī)范確定評分：棕黃色，略有香氣，計10分；棕黃色，有香氣及灰棕色，略有香氣，均計8分；灰棕色，無香氣，計6分。

2.2.3 綜合評分標準 為了更客觀地評價菟絲子鹽炙品的質(zhì)量，研究以鹽菟絲子外觀性狀和金絲桃苷為評價指標，用綜合評分法來評定試驗[13]。金絲桃苷是《中華人民共和國藥典》(2015版)規(guī)定的指標性成分，所以其權(quán)重系數(shù)擬定為0.6；飲片外觀性狀是中藥飲片的傳統(tǒng)質(zhì)量評價指標，是評價飲片質(zhì)量優(yōu)劣的關(guān)鍵性因素之一[10,14,15]，故將其作為評價指標，并擬定其權(quán)重系數(shù)為0.4。綜合的評分=外觀性狀評分×0.4+金絲桃苷×0.6[13]。試驗安排和結(jié)果如表2，方差分析如表3。

表2 鹽菟絲子工藝的L9 (34) 正交試驗結(jié)果(n=3)

表3 綜合評分方差分析

由直觀分析的結(jié)果可知，各個因素對菟絲子鹽炙加工工藝的影響順序為 B >C > A。由方差分析可知鹽炙溫度(B因素)對菟絲子鹽炙加工工藝有顯著性影響，悶潤透心時間及炒制時間(A及C 因素)則對菟絲子鹽炙加工工藝無顯著性影響[16]。故從直觀分析及方差分析結(jié)果可知菟絲子鹽炙的最佳工藝為 A1B2C3，即取凈菟絲子適量，加入2%鹽水拌勻，悶潤0.5 h，置于130℃的炒藥機中，炒制25 min，取出，晾涼，過篩即可[17]。

2.3 驗證性試驗

取凈菟絲子2 kg，按優(yōu)選的鹽炙工藝制備鹽菟絲子樣品 3 份[16]，觀察飲片外觀性狀及測定金絲桃苷含量，驗證結(jié)果見表4。

表4 驗證試驗結(jié)果

結(jié)果表明，采用該優(yōu)選工藝鹽炙加工的鹽菟絲子性狀及金絲桃苷含量均較穩(wěn)定，表明該鹽炙工藝較穩(wěn)定、可控。即菟絲子鹽炙的最佳工藝為：取凈菟絲子適量，加入2%鹽水拌勻[7]，悶潤0.5h，置于130℃的炒藥機(CY-25炒藥機)中，炒制25 min，取出，晾涼，篩去碎屑即可。

3 討論

菟絲子鹽炙加工品炒至表面棕黃色，裂開，略有香氣時，成品質(zhì)量較優(yōu)，這也與菟絲子鹽炙加工成品傳統(tǒng)外觀性狀及現(xiàn)行版藥典描述相一致[8]。表明外觀性狀是中藥飲片的關(guān)鍵評價指標之一，是傳統(tǒng)意義上飲片內(nèi)在化學(xué)成分及化學(xué)成分集群不能替代的評價標準[10,14,18]。

菟絲子鹽炙加工文獻[5，7～8]優(yōu)選的工藝各不相同，本研究以外觀性狀及內(nèi)在含量指標代替單一內(nèi)在指標來考察鹽菟絲子的炮制工藝，結(jié)果更具科學(xué)性和實用性。該研究以外觀性狀及指標性成分金絲桃苷為綜合評價指標，采用正交試驗法優(yōu)選出的菟絲子鹽炙加工工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性良好，可為菟絲子鹽炙的擴大生產(chǎn)提供技術(shù)參考[19]。將來，還應(yīng)結(jié)合藥代及藥動優(yōu)選炮制工藝，以便優(yōu)選工藝更客觀實用。