路美玉，鄧菲，耿雅麗

（華北制藥集團(tuán)動(dòng)物保健品有限責(zé)任公司 石家莊 052165）

加米霉素是一種新型的半合成大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)動(dòng)物專(zhuān)用抗生素，通過(guò)抑制細(xì)菌RNA依賴(lài)性蛋白合成而起抑菌和殺菌作用，是抗菌譜廣、抗菌活性較強(qiáng)的抗生素，主要用于防治溶血性曼氏桿菌、多殺巴氏桿菌、睡眠嗜組織菌和支原體引起的牛呼吸系統(tǒng)疾病（SRD）[1-3]，并已在牛、羊飼養(yǎng)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用[1,4]，扮演著家畜呼吸道重癥感染最后一道防線的重要角色。

近幾年，加米霉素以其吸收快、分布廣，在肺組織中濃度高，消除緩慢且藥效持久的優(yōu)點(diǎn)，在全球的使用量迅速增長(zhǎng)，具有廣闊的應(yīng)用前景。我國(guó)已批準(zhǔn)使用該藥，但由于其劑量低，其毒性效果未見(jiàn)報(bào)道[5,6]。為科學(xué)的評(píng)價(jià)加米霉素原藥的急性毒性，本研究采用對(duì)大鼠經(jīng)口灌胃加米霉素，并觀察分析大鼠的中毒癥狀及死亡情況，以期明確加米霉素對(duì)大鼠經(jīng)口急性毒性反應(yīng)，明確其半數(shù)致死劑量（LD50），為加米霉素在臨床中的正確使用提供依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 受試物

加米霉素原藥（華北制藥集團(tuán)動(dòng)物保健品有限責(zé)任公司生產(chǎn)）。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

健康SPF級(jí)SD大鼠（6～7周齡，體重160～180g，購(gòu)自北京維通利華動(dòng)物科技有限公司）。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)動(dòng)物自由采食和飲水，飼料由北京科奧協(xié)力飼料有限公司購(gòu)入，飲用水為無(wú)菌水，雌雄動(dòng)物分籠飼養(yǎng)；飼養(yǎng)溫度控制在22±3℃之間，相對(duì)濕度控制在50%～60%；光照強(qiáng)度控制在200～300Lx；光源采取人工明暗各12h；氨濃度控制在14mg/m3以下；噪聲控制在50分貝以下。購(gòu)入后在動(dòng)物房飼養(yǎng)3d適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境，并達(dá)到試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)180～220g用于試驗(yàn)。

1.4 預(yù)試驗(yàn)

以5,000mg/kg·bw為高劑量組，按5倍依次遞減設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組，即分別以5,000mg/kg·bw、1,000mg/kg·bw、200mg/kg·bw為高、中、低劑量組開(kāi)展預(yù)試驗(yàn)。預(yù)試驗(yàn)各個(gè)劑量組均為4只大鼠（雌、雄各半），將受試物用1%羧甲基纖維素鈉配置成混懸液，經(jīng)口對(duì)SD大鼠進(jìn)行灌胃染毒，大鼠灌胃體積為2mL/100g體重。灌胃前禁食8～12h，不限制飲水。染毒后觀察（觀察期為1～2周）大鼠的一般表現(xiàn)、中毒癥狀和死亡情況，并對(duì)死亡大鼠進(jìn)行剖檢，做好記錄。試驗(yàn)結(jié)果顯示，預(yù)試驗(yàn)中各劑量組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（雌、雄各半）均未見(jiàn)死亡，即高劑量組（5,000mg/kg·bw）亦未見(jiàn)死亡，因此正式試驗(yàn)的高劑量組可定為5,000mg/kg·bw。

1.5 正式試驗(yàn)

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，正式試驗(yàn)的染毒劑量確定為5,000mg/kg·bw。將正式試驗(yàn)的30只試驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只（雌雄各半），每次取1組進(jìn)行試驗(yàn)，重復(fù)3次；將受試物用1%羧甲基纖維素鈉配置成混懸液，經(jīng)口對(duì)SD大鼠進(jìn)行灌胃染毒，灌胃體積為2mL/100g體重。灌胃前禁食8～12h，不限制飲水。染毒后觀察大鼠的一般表現(xiàn)、中毒癥狀和死亡情況，并對(duì)死亡大鼠進(jìn)行剖檢，做好記錄。若所有試驗(yàn)動(dòng)物均未死亡，則試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組隨機(jī)挑選2只受試動(dòng)物進(jìn)行大體剖檢并做好記錄。

1.6 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)均采用隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)，試驗(yàn)重復(fù)三次進(jìn)行。

1.7 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用Exce l2010軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 加米霉素對(duì)大鼠生長(zhǎng)影響

采用5,000mg/kg·bw加米霉素對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃后在試驗(yàn)觀察期內(nèi)均未見(jiàn)中毒癥狀（表1），亦未見(jiàn)死亡，且試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)大鼠進(jìn)行大體剖檢顯示其心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃腸道等組織器官均未見(jiàn)異常變化（表2）。

表1 動(dòng)物臨床癥狀結(jié)果

表2 動(dòng)物剖檢結(jié)果

2.2 加米霉素對(duì)SD大鼠經(jīng)口LD50

按5,000mg/kg·bw劑量經(jīng)口染毒，在試驗(yàn)觀察期限內(nèi)SD大鼠死亡率均為0%（0/10、0/10、0/10）（表3），可判定加米霉素原藥對(duì)SD大鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)的LD50大于5,000mg/kg·bw。

表3 動(dòng)物死亡結(jié)果

3 討論與結(jié)論

相關(guān)研究表明加米霉素毒性較低，并且對(duì)動(dòng)物主要器官系統(tǒng)如心臟、腎臟及神經(jīng)系統(tǒng)無(wú)明顯副作用，LD50較高[7]。本研究結(jié)果也表明加米霉素原藥對(duì)大鼠經(jīng)口LD50大于5,000mg/kg·bw，并且所有受試SD大鼠在試驗(yàn)觀察期內(nèi)均未見(jiàn)中毒癥狀，亦未見(jiàn)死亡，且試驗(yàn)結(jié)束時(shí)剖檢大鼠的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃腸道等組織器官均未見(jiàn)異常變化，這與前人研究結(jié)果相吻合，臨床使用安全。█