張 麗

（忻州市綜合檢驗檢測中心，山西 忻州 034000）

水果和蔬菜是人們生活中離不開的農(nóng)產(chǎn)品，近年來隨著生活水平的持續(xù)改善，果蔬的安全問題越來越受到人們重視，而農(nóng)藥殘留是食品安全管控的一項重要內(nèi)容，精準(zhǔn)、高效的檢測刻不容緩。

農(nóng)藥殘留分析技術(shù)主要包括樣品前處理技術(shù)和農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)。傳統(tǒng)的前處理技術(shù)有超臨界流體萃取技術(shù)、微波輔助萃取技術(shù)、固相萃取技術(shù)、基質(zhì)固相分散萃取法、固相微萃取技術(shù)、索氏提取技術(shù)、免疫親和色譜技術(shù)和凝膠滲透色譜技術(shù)等[1]，但是這些萃取方法消耗大量的有機試劑、固相萃取小柱等耗材，萃取過程費時費力，無法滿足農(nóng)藥殘留快速準(zhǔn)確檢測的需求。由于QuEChERS 前處理方法能很好地解決這些問題，操作過程簡單，無需使用大量有機溶劑和固相萃取小柱，節(jié)能環(huán)保的同時效率還高，不論是極性還是非極性農(nóng)藥均可達到較高的回收率。因此，建立了QuEChERS 法前處理果蔬，GC-ECD 檢測農(nóng)藥殘留的分析方法，并考查了20 種農(nóng)藥不同種類基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)。該方法簡單、快速、靈敏度高、精密度好，適用于日常檢測和快篩果蔬中農(nóng)藥殘留，以期為果蔬農(nóng)殘檢測提供參考，也為保證果蔬質(zhì)量提供技術(shù)支持。

1 儀器與試劑

GC2030 型氣相色譜儀-ECD，日本島津公司產(chǎn)品；AOTO EVA 型氮吹儀，Reeko 睿科儀器有限公司產(chǎn)品；渦旋儀IKA VORTEXZ，德國IKA 公司產(chǎn)品；ME802 型天平，梅特勒- 托利多儀器有限公司產(chǎn)品；HC-3018 型高速離心機，安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。

乙腈、正己烷均為色譜純，提取包（島津），凈化管A（島津），凈化管B（島津），20 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度均為100 mg/L（壇墨質(zhì)檢）。

實驗室所用蘋果、黃瓜、白菜均為無公害果蔬。

2 試驗方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

將20 種100 mg/L 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品采用逐級稀釋法，用正己烷稀釋成1 mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。

（1） 溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。用移液管準(zhǔn)確移取一定體積的1 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液至10 mL 容量瓶中，正己烷定容，配制成質(zhì)量濃度為1，5，10，20，50，100 μg/L 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

（2） 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。分別將蘋果、黃瓜、白菜空白基質(zhì)溶液氮氣吹干，加入1 mL 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1，5，10，20，50，100 μg/L 復(fù)溶，過0.22 μm濾膜，臨用現(xiàn)配。

2.2 樣品前處理

2.2.1 樣品制備

將樣品表面的泥土輕輕擦拭，不能用水沖洗，否則樣品的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)與原樣不一致會影響檢測結(jié)果的真實性。按照標(biāo)準(zhǔn)GB 2763 附錄A 食品類別和測定部位制備樣品，備用。

2.2.2 提取

分別稱取10 g（精確到0.01 g） 已勻漿的蘋果、黃瓜、白菜，置于50 mL 離心管中，加入10 mL乙腈，提取鹽包（4 g MgSO4、1 g TSCD(檸檬酸鈉)、1 g NaCl、0.5 g DHS(檸檬酸氫二鈉)） 和均質(zhì)子劇烈振搖1 min，然后以轉(zhuǎn)速5 000 r/min 離心5 min，取6 mL上清液待凈化。

2.2.3 凈化

將6 mL 上清液加入到凈化管A（含900 mg Mg-SO4、150 mg 乙二胺-N- 丙基硅烷化硅膠（PSA））中渦旋1 min，黃瓜需加入到凈化管B 含885 mg MgSO4、150 mg 乙二胺-N- 丙基硅烷化硅膠（PSA）、15 mg 石墨化炭黑（GCB）） 中進行凈化渦旋1 min，以轉(zhuǎn)速5 000 r/min 離心5 min，準(zhǔn)確吸取2 mL上清液氮吹至近干，用2 mL 正己烷復(fù)溶，過0.22 μm 濾膜，待測。

2.3 儀器條件

氣相色譜柱：RTX-1 毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）。

島津GC-2030 氣相色譜儀檢測器：電子捕獲檢測器（ECD）；檢測器溫度為320 ℃，進樣口溫度200 ℃，進樣量1 μL，恒流模式，流速為1 mL/min；載氣：高純氮氣，分流進樣，分流比10∶1；升溫程序：初始溫度150 ℃，保持3 min，以6 ℃/min 升到270 ℃，保持23 min。

3 結(jié)果與分析

3.1 定性分析

20 種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)氣相色譜分析，確定保留時間。

20 種農(nóng)藥的保留時間見表1。

表1 20 種農(nóng)藥的保留時間

3.2 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)（ME） 是指樣品分析液中目標(biāo)物以外的復(fù)雜組分改變了目標(biāo)物響應(yīng)值，使得定量分析準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性受到影響[2-3]?；|(zhì)效應(yīng)評價公式如下：

式中：ME 為0～20%表示弱基質(zhì)效應(yīng)，可以忽略不計；ME 為20%～50%表示中等基質(zhì)效應(yīng)；ME 大于50%表示強基質(zhì)效應(yīng)。

對比了正己烷溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和小白菜、蘋果、黃瓜3 種基質(zhì)標(biāo)曲的差異，計算基質(zhì)效應(yīng)（ME）。

20 種農(nóng)藥在3 種果蔬基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)見表2。

表2 20 種農(nóng)藥在3 種果蔬基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)

20 種農(nóng)藥在白菜、蘋果、黃瓜3 種不同的基質(zhì)中表現(xiàn)出不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，γ- 六六六在3 種基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)最強，ME=1.503～2.796，在黃瓜中最為明顯，其次是白菜、蘋果。此外，相同基質(zhì)下20 種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)強弱也不同，白菜中基質(zhì)效應(yīng)強弱依次為γ- 六六六>PP'-DDD>高效氯氟氰菊酯，黃瓜依次為γ- 六六六>PP'-DDD>α- 六六六，蘋果依次為γ- 六六六>PP'-DDD>高效氯氟氰菊酯。但由于20 種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)均小于20%，說明20 種農(nóng)藥在白菜、黃瓜、蘋果樣品中的基質(zhì)效應(yīng)可忽略不計，不會對定量結(jié)果產(chǎn)生顯著影響。因此，直接選擇正己烷溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量。

3.3 方法的線性關(guān)系、檢出限、回收率和精密度

將混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制成1，5，10，20，50，100 μg/L 系列工作溶液，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，擬合20 種農(nóng)藥的線性方程。方法檢出限為加標(biāo)樣品信噪比S/N≥3 時空白樣品中的加標(biāo)質(zhì)量濃度。

按0.005，0.010，0.050 mg/kg 3 個加標(biāo)水平向白菜、黃瓜、蘋果3 種空白樣品中加標(biāo)，每個加標(biāo)水平平行測試6 次，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD） 和回收率。

20 種農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限、加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差見表3。

表3 20 種農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限、加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

20 種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率范圍均為75.67%～118.51%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD） 在0.27%～8.71%。按照GB/T 27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》[4]對檢測方法確認(rèn)精密度和回收率范圍的要求, 完全滿足試驗分析檢測需要。

3.4 實際樣品測定

運用所建立的方法，對監(jiān)督抽檢的白菜、蘋果、黃瓜3 類共35 個樣品進行20 種農(nóng)藥殘留分析，檢測結(jié)果均小于檢出限，35 個樣品中均未檢測到上述20 種農(nóng)藥殘留。

4 結(jié)論

建立了QuEChERS 前處理結(jié)合GC-ECD 測定果蔬中20 種農(nóng)藥殘留的分析方法，并對比了同一基質(zhì)下20 種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)，同一種農(nóng)藥下不同基質(zhì)的基質(zhì)效應(yīng)的強弱，結(jié)果表明基質(zhì)效應(yīng)可忽略不計，直接用溶劑標(biāo)曲代替基質(zhì)標(biāo)曲簡單易行，通過考查該方法的線性關(guān)系、加標(biāo)回收率及其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差等指標(biāo)均滿足定性與定量分析。該方法準(zhǔn)確、簡單、快速、靈敏度高，可以滿足日常農(nóng)藥殘留快篩的檢測要求。參考文獻：

[1]王慧卿，于勁松，徐斐，等. 食品農(nóng)藥殘留檢測中樣品前處理技術(shù)研究進展[J] . 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（8）：111-114.

[2]張圓圓，劉磊，李娜，等. 農(nóng)藥殘留檢測中不同蔬菜的基質(zhì)效應(yīng)[J] . 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2019，21（3）：327-337.

[3]He Z Y，Wang L，Peng Y，et al. Multiresidue analysis of over 200 pesticides in cereals using a QuEChERS and gas chromatography-tandem mass spectrometry-based method[J] . Food Chem，2015（2）：372-380.

[4]國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. GB/T 27404—2008 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測[S] . 北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008. ◇