楊 軍， 楊志玲， 譚梓峰， 汪 峰， 田朝霞

(1. 江西婺源森林鳥(niǎo)類(lèi)國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理中心， 江西 上饒 333200; 2. 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所， 浙江 杭州 311400; 3. 江西省婺源縣大鄣山林場(chǎng)， 江西 上饒 333200)

木姜葉柯(Lithocarpuslitseifolius)為殼斗科(Fagaceae)柯屬(LithocarpusBl.)植物，產(chǎn)于秦嶺南坡以南各省區(qū)，為山地常綠林的常見(jiàn)樹(shù)種，喜陽(yáng)光、耐旱，在次生林中生長(zhǎng)良好，生長(zhǎng)最高限約在海拔2 200 m，常與苦櫧(Castanopsissclerophylla)、青岡(Cyclobalanopsisglauca)和某些樟科植物混生組成常綠闊葉林，在海南，常與竹類(lèi)及省藤(Calamussimplicifolius)等混生[1]。

木姜葉柯利用歷史可追溯到南朝劉宋景平元年[2-4]。南方山區(qū)民間俗稱(chēng)其為“甜茶”，其嫩葉具有甜味，屬低熱能的天然甜味劑[5，6]。多部藥學(xué)專(zhuān)著記載：以甜茶葉入藥，具有清熱利尿、滋潤(rùn)肝腎、潤(rùn)肺鎮(zhèn)咳等功效，可用于防治溫?zé)崃〖?、皮膚瘙癢、癰疽惡瘡等癥[7，8]。最新研究表明，其含有多種黃酮類(lèi)、三萜類(lèi)、甾體、氨基酸和微量元素等成分，具有“三抗”(抗氧化、抗過(guò)敏、抗癌變)、“三降”(降血壓、降血糖、降血脂)作用[9-11]，并于2017年6月被國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)批準(zhǔn)為新食品資源植物[12]?；诹己玫拈_(kāi)發(fā)利用前景，少數(shù)科研單位已經(jīng)開(kāi)展了資源繁育工作[13，14]，因其資源長(zhǎng)期處于野生狀態(tài)，對(duì)其總體認(rèn)識(shí)還不充分，需要從多方位加強(qiáng)研究。本文從原分布區(qū)采集野生資源，對(duì)3個(gè)種源內(nèi)不同家系種實(shí)生物學(xué)性狀遺傳變異開(kāi)展了研究，旨在為馴化培育和優(yōu)質(zhì)資源選育提供指導(dǎo)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

材料采集點(diǎn)為浙江慶元、江西贛州、廣東惠州，其氣象因子狀況見(jiàn)表1。采用3個(gè)省份3個(gè)種源25個(gè)家系材料為研究對(duì)象。于2020年10月至11月初種子完全成熟期采種，每點(diǎn)采集壯齡母株，每單株隨機(jī)抽取30個(gè)果穗，將單株果穗上果實(shí)混勻后，每家系保留果實(shí)0.5 kg，以濕沙混勻種實(shí)樣品，沙藏備用。

表1 木姜葉柯種源采集點(diǎn)地理氣候因子狀況

1.2 性狀測(cè)定

取30個(gè)單果用于測(cè)定果實(shí)性狀數(shù)量值，3次重復(fù)。用游標(biāo)卡尺分別測(cè)定果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)，單位精確到小數(shù)點(diǎn)后2位，用精度為1/100電子天平稱(chēng)量單果重。每果穗的果實(shí)數(shù)量在處理其他生物學(xué)性狀之前進(jìn)行記數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

用EXCEL 2013建立種實(shí)生物學(xué)性狀原始數(shù)據(jù)文檔，運(yùn)用SPSS 20.00軟件進(jìn)行方差分析、相關(guān)性分析和聚類(lèi)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 種源內(nèi)家系間種實(shí)生物學(xué)性狀特征

浙江慶元種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀變異及方差分析見(jiàn)表2，浙江慶元種源的9個(gè)家系中單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的均值分別為0.98±0.17 g、11.14±1.0 mm、8.56±1.57 cm及11.67±2.80個(gè)；單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的極差分別為1.86～0.59、14.70～4.60、13.80～4.17及23～5；單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的變異系數(shù)分別為16.82 %、10.73 %、18.29 %和24.00 %，4個(gè)變異系數(shù)中以果長(zhǎng)變異較小，每果穗果實(shí)數(shù)量變異較大。

經(jīng)對(duì)浙江慶元種源9個(gè)家系種實(shí)4個(gè)生物學(xué)性狀方差分析，發(fā)現(xiàn)家系間的單果重、果長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)、果穗長(zhǎng)等生物學(xué)性狀均達(dá)到極顯著差異(P<0.01)，詳見(jiàn)表2。該種源家系內(nèi)種實(shí)遺傳多樣性變異豐富，建議以種實(shí)生物學(xué)性狀為基礎(chǔ)，結(jié)合種實(shí)營(yíng)養(yǎng)、藥效成分及苗木質(zhì)量聯(lián)合進(jìn)行優(yōu)良家系篩選。

表2 浙江慶元種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀變異及方差分析

江西贛州種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀變異及方差分析見(jiàn)表3，江西贛州種源10個(gè)家系中單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的均值分別為1.70±0.36 g、15.61±0.97 mm、12.78±2.49 cm及15.21±4.68個(gè)；單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的極差分別為4.41～0.89、18.00～11.00、21.00～6.00及28～6；單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的變異系數(shù)分別為20.08 %、6.26 %、19.48 %和27.85 %，4個(gè)變異系數(shù)果長(zhǎng)數(shù)值變異較小，每果穗果實(shí)數(shù)量變化較大，與浙江慶元種源家系種實(shí)生物學(xué)性狀變異趨勢(shì)基本相似。

表3 江西贛州種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀變異及方差分析

經(jīng)對(duì)江西贛州種源10個(gè)家系種實(shí)4個(gè)生物學(xué)性狀方差分析，發(fā)現(xiàn)家系間單果重、果長(zhǎng)和果穗長(zhǎng)3個(gè)生物學(xué)性狀達(dá)到極顯著差異(P<0.01)，每果穗果實(shí)數(shù)達(dá)到顯著水平(P<0.05)。建議對(duì)該種源內(nèi)優(yōu)良家系篩選時(shí)以分析果重、果長(zhǎng)和果穗長(zhǎng)生物學(xué)性狀為主，同時(shí)結(jié)合種實(shí)營(yíng)養(yǎng)、藥效成分及苗木質(zhì)量指標(biāo)共同篩選較為適宜。

表3(續(xù))

廣東惠州種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀變異及方差分析見(jiàn)表4，廣東惠州種源6個(gè)家系中單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)均值分別為2.19±0.22 g、15.83±0.63 mm、19.16±1.33 cm及13.51±4.19個(gè)；單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的極差分別為3.16～1.51、16.79～14.66、28.00～6.80及32～5；單果重、果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)及每果穗果實(shí)數(shù)的變異系數(shù)分別為9.81 %、3.99 %、19.50 %和30.79 %，4個(gè)變異系數(shù)中果長(zhǎng)數(shù)值變異較小，每果穗果實(shí)數(shù)量變化較大。

表4 廣東惠州種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀變異及方差分析

經(jīng)對(duì)廣東惠州種源10個(gè)家系果實(shí)4個(gè)生物學(xué)性狀方差分析，發(fā)現(xiàn)家系間單果重、每果穗果實(shí)數(shù)和果長(zhǎng)3個(gè)生物學(xué)性狀達(dá)到極顯著差異(P<0.01)，果穗長(zhǎng)僅達(dá)到顯著水平(P<0.05)。建議對(duì)該種源優(yōu)良家系篩選時(shí)分析單果重、每果穗果實(shí)數(shù)和果長(zhǎng)生物學(xué)性狀，同時(shí)結(jié)合種實(shí)營(yíng)養(yǎng)、藥效成分及苗木質(zhì)量指標(biāo)較為合理。

2.2 種源內(nèi)家系間種實(shí)生物學(xué)性狀相關(guān)分析

為了探討種源內(nèi)家系間種實(shí)生物學(xué)性狀之間的相關(guān)程度，對(duì)家系間生物學(xué)性狀進(jìn)行了相關(guān)性分析，結(jié)果見(jiàn)表5。江西贛州種源家系內(nèi)單果重與果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)與每果穗果實(shí)數(shù)呈現(xiàn)極顯著差異，其他性狀之間差異不顯著，其中每果穗果實(shí)數(shù)與果長(zhǎng)之間呈現(xiàn)負(fù)向相關(guān)性。廣東惠州種源家系內(nèi)單果重與果長(zhǎng)、果穗長(zhǎng)與每果穗果實(shí)數(shù)之間呈現(xiàn)極顯著差異，果長(zhǎng)與每果穗果實(shí)數(shù)之間呈現(xiàn)負(fù)向極顯著差異，其他性狀之間差異不顯著，且表現(xiàn)負(fù)向相關(guān)性。浙江慶元種源家系內(nèi)果穗長(zhǎng)與每果穗果實(shí)數(shù)之間呈現(xiàn)極顯著差異，果長(zhǎng)與果穗長(zhǎng)之間呈現(xiàn)負(fù)向顯著差異，其他性狀之間差異不顯著，其中每果穗果實(shí)數(shù)與單果重、果長(zhǎng)負(fù)向相關(guān)。

表5 木姜葉柯種源內(nèi)家系間種實(shí)各生物學(xué)性狀相關(guān)系數(shù)

2.3 種源內(nèi)家系間種實(shí)生物學(xué)性狀聚類(lèi)分析

對(duì)3個(gè)種源內(nèi)25個(gè)家系4個(gè)種實(shí)生物性狀數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，采用歐氏距離離差平方和進(jìn)行聚類(lèi)分析，結(jié)果見(jiàn)圖1。當(dāng)歐氏距離為5.0時(shí)，3個(gè)種源內(nèi)各家系聚類(lèi)如下：江西贛州10個(gè)家系可分為4類(lèi)，第J—1類(lèi)包括JXGZ1、JXGZ7、JXGZ9和JXGZ2家系，這類(lèi)家系單果較輕、果較長(zhǎng)、每果穗果實(shí)多、果穗較長(zhǎng)；第J—2類(lèi)包括JXGZ3、JXGZ8和JXGZ10家系，這類(lèi)家系單果較重、果較長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)較多、果穗最長(zhǎng)；第J—3類(lèi)JXGZ5號(hào)家系，5號(hào)家系單果較輕、果長(zhǎng)較短、每果穗果實(shí)數(shù)少、果穗較短；第J—4類(lèi)包括JXGZ4、JXGZ6家系，這2個(gè)家系單果較重、果長(zhǎng)較短、每果穗果實(shí)數(shù)少、果穗較短。廣東惠州6個(gè)家系可分成2類(lèi)，第G—1類(lèi)包括GDHZ1、GDHZ3、GDHZ2和GDHZ4家系，這類(lèi)家系單果較重、果長(zhǎng)較短、每果穗果實(shí)數(shù)少、果穗較短；第G—2類(lèi)包括GDHZ5和GDHZ6家系，這類(lèi)家系單果較輕、果較長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)多、果穗較長(zhǎng)。浙江慶元9個(gè)家系可分成3類(lèi)，第Z—1類(lèi)包括ZJBSZ4、ZJBSZ5、ZJBSZ7、ZJBSZ3和ZJBSZ6家系，這類(lèi)家系單果較輕、果長(zhǎng)較長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)少、果穗較長(zhǎng)；第Z—2類(lèi)包括ZJBSZ1、ZJBSZ2和ZJBSZ8家系，這類(lèi)家系單果較重、果較長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)少、果穗較短；第Z—3類(lèi)僅ZJBSZ9家系，這個(gè)家系單果較重、果長(zhǎng)較短、每果穗果實(shí)數(shù)多、果穗較長(zhǎng)。

圖1 基于種實(shí)生物學(xué)性狀種源家系間的聚類(lèi)系統(tǒng)

3 討論與結(jié)論

種實(shí)是植物生活史較為穩(wěn)定和基礎(chǔ)的特征之一，同一樹(shù)種不同家系種子的大小、質(zhì)量與發(fā)芽率等性狀均存在變異[15]，更是與后期種子傳播、休眠、發(fā)芽及幼苗建成等密切相關(guān)[16]，種實(shí)大小對(duì)于家系的選擇和苗木的推廣種植各有利弊[17]。根據(jù)種實(shí)大小及萌發(fā)情況對(duì)引種家系進(jìn)行選擇分析，成為引種工作中必不可少的基礎(chǔ)性環(huán)節(jié)。

許多專(zhuān)家對(duì)重要林木種源和家系種實(shí)性狀進(jìn)行過(guò)研究，獲得了大量有實(shí)踐應(yīng)用價(jià)值的結(jié)論，發(fā)現(xiàn)同一種源不同家系間生長(zhǎng)在不同的小生態(tài)環(huán)境下易產(chǎn)生遺傳變異，并將穩(wěn)定的表型遺傳變異性狀反映在家系間種實(shí)大小、質(zhì)量等生物學(xué)特征中[15，18-23]。百粒重指示種實(shí)的大小和飽滿(mǎn)程度，單粒重越大，種實(shí)越飽滿(mǎn)，內(nèi)含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越豐富，可以提供促進(jìn)發(fā)芽的物質(zhì)越多，進(jìn)而使發(fā)芽迅速、整齊，有助于提升幼苗品質(zhì)[17，24]。木姜葉柯被國(guó)家相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)為新食品資源植物時(shí)間較短，對(duì)其資源研究處于起步階段[25]，曾祥艷等對(duì)來(lái)源于廣西的4個(gè)種源24個(gè)單株種子性狀變異進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)單株個(gè)體在種子形態(tài)上存在很大的異質(zhì)性，單株間單粒重變異系數(shù)最大，為2.58 %～39.36 %，單株間種子形態(tài)指標(biāo)差異達(dá)到顯著或極顯著水平，認(rèn)為單株選擇有潛力和必要[26]。

本研究表明，同一種源不同家系間單果重、果長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)、果穗長(zhǎng)4個(gè)生物學(xué)性狀中至少有3個(gè)以上表現(xiàn)極顯著差異，其中單果重和果長(zhǎng)在所有家系中均達(dá)到極顯著差異，說(shuō)明在種源內(nèi)開(kāi)展優(yōu)良家系篩選很有意義，且可考慮以特有生物學(xué)性狀進(jìn)行篩選。種實(shí)生物學(xué)特征之間存在一定的相關(guān)性，江西贛州和廣東惠州種源內(nèi)家系的單果重與每果穗果實(shí)數(shù)之間達(dá)到極顯著水平，江西贛州、廣東惠州和浙江慶元種源內(nèi)家系的果穗長(zhǎng)與每果穗果實(shí)數(shù)間均達(dá)到極顯著水平，廣東惠州果長(zhǎng)與每果穗種實(shí)數(shù)間呈負(fù)向顯著水平。經(jīng)對(duì)種源內(nèi)家系間4個(gè)種實(shí)生物性狀進(jìn)行聚類(lèi)分析，發(fā)現(xiàn)種源內(nèi)家系均可分成多個(gè)小組，它們代表了家系內(nèi)單果重、果長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)及果穗長(zhǎng)等之間的關(guān)系，本研究發(fā)現(xiàn)木姜葉柯單果較輕時(shí)，伴隨著果長(zhǎng)較長(zhǎng)、每果穗果實(shí)數(shù)多、果穗較長(zhǎng)，而單果較重時(shí)，伴隨著果長(zhǎng)較短、每果穗果實(shí)數(shù)少、果穗較短。種實(shí)生物學(xué)性狀是遺傳的重要指標(biāo)及較穩(wěn)定的性狀[27-31]，同一種源家系間種實(shí)生物學(xué)性狀豐富的變異預(yù)示著家系在子代發(fā)生分化已有遺傳基礎(chǔ)，該結(jié)論還有待結(jié)合幼苗生長(zhǎng)特性、幼苗質(zhì)量及遺傳力等共同判斷，它們將為優(yōu)良家系資源的選育提供指導(dǎo)。