牟怡曉 張 歡 馬聰慧 張桂杰*

(1.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系，銀川 750021；2.寧夏草牧業(yè)工程技術(shù)研究中心，銀川 750021)

抗生素通過(guò)減少動(dòng)物疾病來(lái)提高其生產(chǎn)性能和飼料轉(zhuǎn)化率，但由于細(xì)菌抗藥性的發(fā)展和對(duì)人類(lèi)健康的潛在威脅，抗生素的使用一直存在爭(zhēng)議[1]。因此，尋求有效的營(yíng)養(yǎng)添加劑成為新時(shí)代養(yǎng)殖行業(yè)的重中之重。枸杞種植、加工和利用是寧夏的一項(xiàng)重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)，枸杞副產(chǎn)物是指在枸杞種植和加工過(guò)程中，產(chǎn)生大量的枸杞枝、葉和殘?jiān)?。這些剩余物通常當(dāng)作廢棄物處理，未得到科學(xué)有效利用，導(dǎo)致資源浪費(fèi)和環(huán)境污染，同時(shí)增加生產(chǎn)成本。研究表明，枸杞副產(chǎn)物中富含粗脂肪(ether extract，EE)、粗蛋白質(zhì)(crude protein，CP)、鈣和磷等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富且無(wú)耐藥性，是畜禽良好的飼料來(lái)源[2]，可代替抗生素增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫力。多糖、黃酮、類(lèi)胡蘿卜素、有機(jī)酸、氨基酸等是枸杞副產(chǎn)物中活性物質(zhì)[3]，其中枸杞多糖是枸杞副產(chǎn)物中主要功能性成分，具有抗氧化、免疫刺激、抗應(yīng)激、抗炎抑菌、增強(qiáng)血糖控制能力等生物活性[4]。枸杞多糖在飼喂動(dòng)物方面的研究已有報(bào)道。Long等[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加枸杞多糖能提高肉仔雞生長(zhǎng)性能、消化酶活性、抗氧化能力和免疫功能。佘祿明等[6]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加高劑量枸杞多糖顯著增加斷奶仔豬生長(zhǎng)性能。Tan等[7]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加枸杞提取物可以促進(jìn)雜交石斑魚(yú)生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)沉積。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)枸杞產(chǎn)品在動(dòng)物生產(chǎn)應(yīng)用研究多集中在枸杞多糖的功效與作用，而有關(guān)枸杞副產(chǎn)物利用方面的報(bào)道較少。

我國(guó)檸條主要利用方式多集中在改善生態(tài)環(huán)境方面，檸條種植6～8年后出現(xiàn)生長(zhǎng)衰退、生產(chǎn)力下降的現(xiàn)象，因此檸條的平茬復(fù)壯極為關(guān)鍵[8]。合理的平茬不僅能夠保護(hù)檸條正常生長(zhǎng)，還能夠帶來(lái)豐富的飼草資源。與其他優(yōu)質(zhì)粗飼料相比，檸條木質(zhì)化程度高，適口性和養(yǎng)分平衡性較差，因此檸條作為飼料開(kāi)發(fā)利用的量較小，一般家畜食用的只是當(dāng)年生幼嫩枝葉。近年來(lái)檸條飼料處理技術(shù)呈多樣化，突出表現(xiàn)在氨化、青貯和粉碎制粒等方面[9]，提高了檸條作為家畜飼料的利用率、適口性和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。檸條的可溶性碳水化合物含量低，蛋白質(zhì)含量和緩沖能高，單獨(dú)青貯不易成功。國(guó)內(nèi)對(duì)檸條青貯調(diào)制及利用的研究已見(jiàn)報(bào)道，添加劑對(duì)檸條青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)影響的研究也有所開(kāi)展[10-12]，但不同研究的檸條青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)差異較大。本研究以不同添加量的枸杞副產(chǎn)物與檸條錦雞兒混合青貯為材料，分析混合青貯發(fā)酵過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分、發(fā)酵品質(zhì)、有氧穩(wěn)定性及微生物多樣性的變化情況，旨在為提高檸條青貯品質(zhì)和拓寬草食家畜優(yōu)質(zhì)飼草料來(lái)源提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣地概況

試驗(yàn)地為寧夏自治區(qū)吳忠市鹽池縣十六堡新村，位于寧夏東部，在我國(guó)北方農(nóng)牧交錯(cuò)帶北緣，東經(jīng)107°41′，北緯37°37′。屬典型的大陸性季風(fēng)氣候，氣候干燥，降水量少而集中。年平均溫度7.7 ℃，年平均日照2 867.9 h，平均無(wú)霜期128 d，年平均降水量270 mm，主要集中在7—9月。年平均蒸發(fā)量2 727.24 mm，大約是全年降水量的9.6倍。土壤類(lèi)型主要為灰鈣土、風(fēng)沙土[13]。

1.2 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2019年6—9月在寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院草業(yè)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，選用盛花期檸條錦雞兒品種，于2019年6月刈割，刈割后，由Aurora型手持式近紅外光譜儀確定水分含量，加入蒸餾水將含水量調(diào)制在60%左右進(jìn)行青貯。試驗(yàn)所用枸杞副產(chǎn)物由寧夏某生物科技有限公司饋贈(zèng)，檸條錦雞兒和枸杞副產(chǎn)物營(yíng)養(yǎng)成分如表1所示。

表1 檸條錦雞兒和枸杞副產(chǎn)物營(yíng)養(yǎng)成分(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Nutrient composition of Caragana korshinskii and Lycium barbarum by-product (DM basis) %

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，分為4個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)。各組檸條錦雞兒原料中枸杞副產(chǎn)物添加量分別為0(對(duì)照組)、3%(L3組)、6%(L6組)和9%(L9組)。將檸條錦雞兒原料用鍘刀鍘成2 cm的小段，將枸杞副產(chǎn)物均勻的拌于原料之中，裝于500 mL青貯罐中壓實(shí)，瓶口直徑92 mm，封蓋高97 mm，密度約為775 kg/m3，每罐350 g，青貯時(shí)間為60 d。

1.4 原料取樣與測(cè)定

1.4.1 營(yíng)養(yǎng)成分

分別取檸條錦雞兒、枸杞副產(chǎn)物原料及青貯60 d后檸條錦雞兒500 g置凍干機(jī)中凍干，凍干后再次稱(chēng)量，計(jì)算干物質(zhì)(dry matter，DM)含量。經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40目篩，裝袋置干燥處保存。CP、EE、中性洗滌纖維(neutral detergent fiber，NDF)、酸性洗滌纖維(acid detergent fiber，ADF)、可溶性碳水化合物(water soluble carbohydrate，WSC)含量參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[14]進(jìn)行。

相對(duì)飼喂價(jià)值(RFV)=[(88.9-0.779ADF)×
120/NDF]/1.29。

1.4.2 發(fā)酵品質(zhì)

稱(chēng)取5 g樣品于錐形瓶中，加入45 mL蒸餾水，振蕩30 min，并使樣品完全浸入水中，用封口膜封口，于4 ℃下保存24 h，用4層紗布過(guò)濾取上清液，使用雷磁PHS-3G精密pH計(jì)測(cè)定pH。氨態(tài)氮/總氮(AN/TN)的測(cè)定采用苯酚-次氯酸鈉比色法[15]。

1.4.3 有氧穩(wěn)定性

有氧穩(wěn)定性的測(cè)定，在發(fā)酵60 d后打開(kāi)全部發(fā)酵袋青貯，將溫度記錄儀(HOBO Pendant Temperature/Light，美國(guó))放入發(fā)酵袋幾何中心處，封口并在青貯袋上刺小孔，置于室溫下保存，使空氣可以自由進(jìn)入袋中。同時(shí)在室內(nèi)不同位置放置3個(gè)溫度記錄儀。若青貯袋中的溫度高于室溫2 ℃，則說(shuō)明青貯開(kāi)始腐敗變質(zhì)，計(jì)算開(kāi)袋至腐敗變質(zhì)的時(shí)間，即為有氧穩(wěn)定性。

1.4.4 微生物多樣性分析

1.5 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2010對(duì)測(cè)定指標(biāo)數(shù)據(jù)預(yù)處理，再使用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)分析軟件中廣義線性模型(GLM)進(jìn)行單因子方差分析和Duncan氏法多重比較，P<0.05為顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同添加量枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響

由表2可見(jiàn)，各組之間DM含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。L9組CP含量最高，為11.74%，顯著高于其他各組(P<0.05)。L9組EE含量最高，為7.13%，顯著高于其他各組(P<0.05)。各組之間WSC含量無(wú)顯著差異(P>0.05)，其中L9組最高，為0.33%；對(duì)照組最低，為0.29%。L6組和L9組多糖含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，分別比對(duì)照組提高了1.52%和1.83%。NDF含量隨枸杞副產(chǎn)物添加量的增加而降低，L9組NDF含量最低，為62.27%，顯著低于其他各組(P<0.05)。L9組ADF含量最低，為53.14%，顯著低于其他各組(P<0.05)。L9組相對(duì)飼喂價(jià)值顯著高于其他各組(P<0.05)。

表2 不同添加量枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 2 Effects of different supplemental levels of Lycium barbarum by-product on nutrient composition of Caragana korshinskii silage (DM basis) %

2.2 不同添加量枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響

由表3可知，添加枸杞副產(chǎn)物可降低檸條錦雞兒青貯pH，其中對(duì)照組pH最高，為5.17；L9組pH最低，為4.13，顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；L6組和L9組pH在4.8以下，達(dá)到良好青貯飼料水平。L6組和L9組NH3-N/TN顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，其中L9組NH3-N/TN最低，為4.87%。L9組乳酸含量顯著高于其他各組(P<0.05)，比對(duì)照組提高了1.2%。L6組和L9組乙酸和丙酸含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，與L3組差異不顯著(P>0.05)。L6組和L9組乳酸/乙酸顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。各組未檢測(cè)到丁酸含量。

表3 不同添加量枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 3 Effects of different supplemental levels of Lycium barbarum by-product on fermentation quality of Caragana korshinskii silage (DM basis) %

2.3 不同添加量枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯有氧穩(wěn)定性的影響

由圖1可知，在有氧暴露后，各組有氧穩(wěn)定性分別為49.7、51.8、58.3、53.8 h，均超過(guò)49.0 h，即在有氧暴露49.0 h內(nèi)均未發(fā)生有氧腐敗。L6組和L9組有氧穩(wěn)定性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

2.4 不同添加量枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯微生物多樣性的影響

2.4.1 Alpha多樣性指數(shù)

由表4可知，各組的覆蓋度均大于0.99，說(shuō)明結(jié)果可以代表樣本微生物群落的真實(shí)情況。L3組、L6組和L9組Chao指數(shù)和ACE指數(shù)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明枸杞副產(chǎn)物可以增加檸條錦雞兒青貯微生物豐度。L3組和L9組Shannon指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明枸杞副產(chǎn)物能提高檸條錦雞兒青貯微生物多樣性。對(duì)照組Simpson指數(shù)最高，顯著高于L3組和L9組(P<0.05)，說(shuō)明對(duì)照組的微生物群落組成的豐富度和均勻度更低。

表4 Alpha多樣性指數(shù)Table 4 Alpha diversity indexes

2.4.2 微生物群落組成

由圖2可知，根據(jù)高通量測(cè)序結(jié)果在屬水平上分析核心菌群，結(jié)果表明不同樣本在屬水平優(yōu)勢(shì)菌群相似，但相對(duì)豐度不同。其中，青貯過(guò)程中乳桿菌屬(Lactobacillus)相對(duì)豐度高于其他菌屬，也從微生物的角度說(shuō)明枸杞副產(chǎn)物處理的檸條錦雞兒青貯中，乳桿菌屬為優(yōu)勢(shì)菌屬，其隸屬于厚壁菌門(mén)、芽孢桿菌綱、乳桿菌目、乳桿菌科，是導(dǎo)致樣本中厚壁菌門(mén)微生物相對(duì)豐度高的直接原因。片球菌屬(Pediococcus)和腸球菌屬(Enterococcus)相對(duì)豐度次之。與對(duì)照組相比，L3組、L6組和L9組微生物群落中不僅發(fā)現(xiàn)了乳桿菌屬，還有一定數(shù)量的魏斯氏菌屬(Weissella)和腸桿菌屬(Enterobacter)等在發(fā)揮作用，對(duì)于降低發(fā)酵環(huán)境的pH和提高有機(jī)酸的含量有重要作用。

2.4.3 微生物群落Venn圖

由圖2可知，在OTU水平上分析了檸條錦雞兒青貯前后微生物群落組成情況，青貯前的檸條錦雞兒OTU數(shù)最多，達(dá)568個(gè)，特有的OTU數(shù)為378個(gè)。青貯后，L9組OTU數(shù)和特有OTU數(shù)最高，分別為218和45個(gè)；對(duì)照組特有OTU數(shù)最少，為3個(gè)；所有組共有的OTU數(shù)為30個(gè)。這說(shuō)明與對(duì)照組相比，L3組、L6組和L9組的微生物多樣性均有所增加。

數(shù)據(jù)柱標(biāo)注相同小寫(xiě)字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。

3 討 論

3.1 枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響

枸杞副產(chǎn)物中含有較高的CP、EE和消化能，歸于能量飼料原料。檸條錦雞兒青貯中添加枸杞副產(chǎn)物，可以降低水分含量，有助于改善檸條錦雞兒營(yíng)養(yǎng)成分。飼料中多糖是瘤胃微生物的重要能量和碳源[17]。本研究中，添加枸杞副產(chǎn)物組DM損失減少，青貯過(guò)程中發(fā)酵底物充足，枸杞副產(chǎn)物中的碳氮源轉(zhuǎn)換為有機(jī)酸，使pH下降，促進(jìn)青貯時(shí)乳酸發(fā)酵，有效地抑制了酵母菌及霉菌等有害菌增殖，減緩DM與營(yíng)養(yǎng)成分損失。由于檸條錦雞兒和枸杞副產(chǎn)物中CP含量較高，經(jīng)過(guò)混合青貯后貯后各組的CP含量高于單一檸條錦雞兒青貯，且隨枸杞副產(chǎn)物添加量的增加，檸條錦雞兒青貯的CP含量增加，與成啟明等[10]試驗(yàn)結(jié)果一致。L9組WSC含量增加，推測(cè)枸杞副產(chǎn)物抑制乳酸菌的生長(zhǎng)，且木質(zhì)纖維素降解過(guò)程中產(chǎn)生過(guò)量WSC未被微生物完全利用或無(wú)法被微生物利用[18]。枸杞中含有多種生物活性成分，如黃酮類(lèi)化合物、枸杞多糖，枸杞多糖具有促進(jìn)生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)免疫力、消炎抑菌等多種生物學(xué)功能。本研究中，添加9%枸杞副產(chǎn)物顯著提高了檸條錦雞兒青貯中多糖含量。研究表明，在雞、豬、兔及反芻動(dòng)物飼糧中添加適量的枸杞多糖，可增強(qiáng)動(dòng)物免疫力，提高生長(zhǎng)性能及改善肉品質(zhì)，一定程度上提高了畜禽養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益[19]。本試驗(yàn)中，添加枸杞副產(chǎn)物有效降低了檸條錦雞兒青貯中NDF和ADF含量，推測(cè)枸杞副產(chǎn)物為乳酸菌和纖維素分解菌等飼用菌提供了充足的能源，促進(jìn)了纖維素分解菌對(duì)青貯飼料細(xì)胞壁的破壞，降解纖維成分。NDF和ADF含量是反映纖維質(zhì)量好壞的有效指標(biāo)，ADF含量與動(dòng)物消化率呈負(fù)相關(guān)，ADF含量越低，飼草的消化率越高，相對(duì)飼用價(jià)值越大[20]。這與本研究結(jié)果的變化趨勢(shì)基本一致，說(shuō)明添加枸杞副產(chǎn)物對(duì)保存營(yíng)養(yǎng)成分、提高相對(duì)飼喂價(jià)值有一定作用。

Lactobacillus：乳桿菌屬；Pediococcus：片球菌屬；Enterobacter：腸桿菌屬；Enterococcus：腸球菌屬；Weissella：魏斯氏菌屬；Vibrio：弧菌屬；Halomonas：鹽單胞菌屬；Kosakonia：小坂菌屬；Rhodococcus：紅球菌屬；Pantoea：泛菌屬；Sphingomonas：鞘氨醇單胞菌屬；Marinilactibacillus：海生乳桿菌屬；Staphylococcus：葡萄球菌屬；Hymenobacter：薄層菌屬；Others：其他。

圖3 微生物群落Venn圖Fig.3 Venn map of microbial community

3.2 枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響

pH和氨態(tài)氮是評(píng)定青貯發(fā)酵品質(zhì)的重要指標(biāo)，反映了腐敗菌分解程度，較低的pH更有利于青貯飼料的長(zhǎng)期穩(wěn)定保存。本試驗(yàn)中，在添加枸杞副產(chǎn)物的各組中，隨著枸杞副產(chǎn)物添加量逐漸提高，pH隨之下降。初期檸條錦雞兒青貯中大量碳水化合物轉(zhuǎn)化為乳酸，一定程度上抑制了檸條錦雞兒青貯中腐敗菌的生長(zhǎng)，導(dǎo)致pH下降。NH3-N/TN反映青貯飼料中蛋白質(zhì)和氨基酸分解程度，正常青貯飼料中蛋白質(zhì)只分解至氨基酸，氨存在則表明有腐敗現(xiàn)象，NH3-N/TN越大，說(shuō)明蛋白質(zhì)和氨基酸分解得越多，意味著青貯飼料品質(zhì)不佳。本研究中，L6組和L9組NH3-N/TN顯著低于對(duì)照，且均低于10%，這與Fang等[21]和于浩然等[22]的研究結(jié)果一致，說(shuō)明添加枸杞副產(chǎn)物降低了蛋白質(zhì)水解程度，青貯發(fā)酵品質(zhì)較好[23]。本試驗(yàn)中，添加枸杞副產(chǎn)物能降低檸條錦雞兒青貯pH、NH3-N/TN及乙酸和丙酸含量，提高乳酸含量。乳酸的生成是由于青貯中乳酸菌利用自身的酶類(lèi)物質(zhì)，通過(guò)糖酵解(EMP)途徑降解了枸杞副產(chǎn)物中的碳水化合物(如葡萄糖)，進(jìn)而發(fā)酵產(chǎn)生了以乳酸、石酒酸和草酸為主的有機(jī)酸[24-25]，因此添加枸杞副產(chǎn)物可提高乳酸含量。這說(shuō)明添加枸杞副產(chǎn)物可以促進(jìn)檸條錦雞兒青貯中乳酸發(fā)酵，提高青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，與王保平[26]研究結(jié)果相似。在青貯開(kāi)袋后，由于表層壓實(shí)密度降低，青貯料與空氣接觸，導(dǎo)致青貯中的酵母菌、霉菌等好氧微生物開(kāi)始活躍，使得青貯料變質(zhì)進(jìn)程開(kāi)始，其中好氧微生物利用青貯中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行大量繁殖。檸條錦雞兒青貯在開(kāi)袋49.7～58.3 h后已經(jīng)開(kāi)始變質(zhì)，說(shuō)明好氧微生物的霉菌和酵母菌開(kāi)始快速繁殖。較低的pH為青貯提供穩(wěn)定的發(fā)酵環(huán)境，可以更好地抑制腐敗菌生長(zhǎng)，使有氧穩(wěn)定時(shí)間延長(zhǎng)，而酵母菌可以利用乳酸產(chǎn)生酒精，并發(fā)生有氧變質(zhì)[27]。添加枸杞副產(chǎn)物改善了檸條錦雞兒青貯有氧穩(wěn)定性，推測(cè)枸杞副產(chǎn)物中的枸杞多糖等活性物質(zhì)抑制了腐敗微生物，如酵母菌和霉菌的生長(zhǎng)繁殖，從而降低了對(duì)青貯飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗利用。

3.3 枸杞副產(chǎn)物對(duì)檸條錦雞兒青貯微生物多樣性的影響

微生物多樣性指數(shù)Chao指數(shù)逐漸增加，樣品中OTU數(shù)也隨之增加。本試驗(yàn)中，隨著枸杞副產(chǎn)物添加量的增加，檸條錦雞兒青貯中細(xì)菌的物種總數(shù)增加，整個(gè)發(fā)酵環(huán)境適合細(xì)菌的生長(zhǎng)與繁殖。添加枸杞副產(chǎn)物組的Shannon指數(shù)升高，Simpon指數(shù)降低，說(shuō)明添加枸杞副產(chǎn)物組的微生物多樣性處優(yōu)勢(shì)地位，推測(cè)檸條錦雞兒發(fā)酵過(guò)程中微生物利用了氨基酸或水解了蛋白質(zhì)，導(dǎo)致微生物多樣性增加。

不同處理的青貯飼料中微生物多樣性具有明顯差異。本試驗(yàn)中，對(duì)照組微生物多樣性較低，乳桿菌屬相對(duì)豐度較高，可能是發(fā)酵底物較少，發(fā)酵過(guò)程中乳桿菌屬占優(yōu)。有研究發(fā)現(xiàn)，乳桿菌屬是青貯發(fā)酵飼料菌群的關(guān)鍵菌屬[28]。李鳳姿[29]在酸菜發(fā)酵中添加乳酸桿菌后，總酸含量顯著提高，pH顯著降低。本試驗(yàn)在添加枸杞副產(chǎn)物后，檸條錦雞兒青貯中發(fā)揮主要作用的乳酸菌為乳酸桿菌，此結(jié)果與Bai等[30]試驗(yàn)結(jié)果一致。在青貯中常見(jiàn)的乳酸桿菌有布氏乳桿菌(Lactobacillusbuchneri)、植物乳桿菌、戊糖乳桿菌及干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)等[31]。隨著青貯發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，pH不斷降低，較耐酸的乳桿菌屬微生物更具優(yōu)勢(shì)，這可能是導(dǎo)致其相對(duì)豐度最高的主要原因。有研究證明，在青貯過(guò)程中參與乳酸發(fā)酵的細(xì)菌菌群主要有乳桿菌屬、片球菌屬、魏斯氏菌屬和腸球菌屬[32-33]。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，L3組、L6組和L9組腸球菌屬和魏斯氏菌屬相對(duì)豐度增加，L6組和L9組片球菌屬相對(duì)豐度增加。片球菌是同型發(fā)酵乳酸菌，能產(chǎn)生更多乳酸。添加枸杞副產(chǎn)物后檸條錦雞兒青貯中不只1種乳酸菌在發(fā)揮作用，片球菌、腸球菌及魏斯氏菌在共同發(fā)揮作用，可能是枸杞副產(chǎn)物中的枸杞多糖作為益生元被乳桿菌吸收、利用，從而起到了增菌作用。這與Tohno等[33]報(bào)道的青貯過(guò)程中乳酸菌屬主要為乳桿菌、片球菌和腸球菌的結(jié)果相一致。枸杞副產(chǎn)物可改變檸條錦雞兒青貯的微生物群落組成，降低檸條錦雞兒青貯中乳桿菌屬的相對(duì)豐度，增加片球菌屬的相對(duì)豐度，產(chǎn)生更多乳酸[34]，進(jìn)一步說(shuō)明枸杞副產(chǎn)物可增加檸條錦雞兒青貯中乳酸含量，改善發(fā)酵品質(zhì)。

4 結(jié) 論

① 添加枸杞副產(chǎn)物改善了檸條錦雞兒青貯的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性。

② 添加枸杞副產(chǎn)物改變了檸條錦雞兒青貯的微生物群落結(jié)構(gòu)，增加了魏斯氏菌屬和腸球菌屬的相對(duì)豐度，降低了乳桿菌屬的相對(duì)豐度。

③ 綜合考慮，枸杞副產(chǎn)物添加量為9%時(shí)檸條錦雞兒的青貯效果最好。