李沛麗 龔才偉 猶銀俊 董保豫 蒙炳超 朱仕炯 龍 潭

貴州省黔南州農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州都勻558000

國(guó)內(nèi)非洲豬瘟疫情發(fā)生后，貴州省黔南州為恢復(fù)生豬產(chǎn)能、打造產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展路線、保障生豬供給，自2018年以來(lái)在全州范圍內(nèi)對(duì)豬源性細(xì)菌耐藥性進(jìn)行研究分析，以期指導(dǎo)地區(qū)生豬行業(yè)科學(xué)使用抗菌藥[1-3]。

1 材料與方法

1.1 材 料

1）樣品。貴州省黔南州服務(wù)區(qū)域內(nèi)隨機(jī)選取11個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)，采集豬肛門拭子共232份。

2）藥品。奧格門丁、頭孢他啶、頭孢噻呋、慶大霉素等24 種，大腸桿菌測(cè)定其中16 種，腸球菌測(cè)定其中17種（詳見表2～3）。

3）培養(yǎng)基。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、顯色瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板。

1.2 方 法

1）腸道大腸桿菌分離純化。取典型菌落在顯色瓊脂培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，取純化后的菌落接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng)24 h。

2）腸道球菌分離純化。取典型菌落在顯色營(yíng)養(yǎng)瓊脂繼續(xù)培養(yǎng)，取純化后的菌落接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng)24 h。

3）鑒定。顯微鏡涂片鏡檢、商業(yè)成品生化鑒定試劑。

4）藥敏試驗(yàn)。選擇美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推薦的方法微量肉湯稀釋法測(cè)定最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC），慶大霉素采用高水平耐氨基糖苷類耐藥判定標(biāo)準(zhǔn)[5-6]。

2 結(jié)果與分析

6 個(gè)縣（市）11 個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)232 份豬肛門拭子樣品，分離到277 株菌落，其中大腸桿菌145 株，腸球菌132株詳見表1。

表1 豬源性腸道菌菌落分離情況統(tǒng)計(jì) 個(gè)

1）大腸桿菌藥敏試驗(yàn)。11 個(gè)場(chǎng)共分離到145株菌落，每場(chǎng)以分離到的大腸桿菌菌落MIC 值平均數(shù)為該場(chǎng)耐藥性測(cè)定結(jié)果，結(jié)果為：大腸桿菌對(duì)慶大霉素、大觀霉素、四環(huán)素敏感；對(duì)氨芐西林、氟苯尼考、磺胺異惡唑、復(fù)方新諾明、恩諾沙星、氧氟沙星、多西環(huán)素、金霉素中度敏感；對(duì)奧格門丁、頭孢他啶、頭孢噻呋、亞胺培南、粘菌素耐藥。如表2所示。

表2 黔南州豬源性大腸桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2）腸球菌藥敏試驗(yàn)。11 個(gè)場(chǎng)共分離到132 株菌落，每場(chǎng)以分離到的腸球菌菌落MIC 值平均數(shù)為該場(chǎng)耐藥性測(cè)定結(jié)果。結(jié)果為：腸道球菌對(duì)青霉素、阿莫西林、頭孢噻呋、頭孢西丁、苯唑西林、復(fù)方新諾明、紅霉素、克林霉素、替米考星、利奈唑胺敏感；對(duì)多西環(huán)素、氧氟沙星、磺胺異惡唑、氟苯尼考、金霉素中度敏感；對(duì)慶大霉素、萬(wàn)古霉素耐藥。如表3所示。

表3 黔南州豬源性腸球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 討 論

腸道菌屬于共生菌，也有致病株，腸道菌的耐藥性不僅阻遏腸道疾病的預(yù)防與治療，還可以通過食物鏈將耐藥性傳遞到人源腸道菌甚至是人身上，危害公共衛(wèi)生安全[7]。近年養(yǎng)殖業(yè)結(jié)構(gòu)升級(jí)，抗生素濫用情況普遍發(fā)生，耐藥性情況復(fù)雜[8-9]，也有研究認(rèn)為細(xì)菌的致病性與耐藥性有一定的相關(guān)性[10]。

本研究結(jié)果顯示，規(guī)模豬場(chǎng)中腸道菌群對(duì)挑選出來(lái)的常用藥物耐藥情況較為普遍。可以合理地猜測(cè)，服務(wù)區(qū)域內(nèi)這些藥物的使用史，而所挑選的藥物中多數(shù)為廣譜藥，會(huì)對(duì)其他菌群、病毒乃至其他種類微生物也發(fā)生不同程度的耐藥情況[11-13]。