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        澤明降脂方對高脂血癥大鼠血脂水平及相關炎癥趨化因子的影響

        2021-10-14 10:24:28劉睿楊戈尚坤張欣位佳琳賀丹彤位鴻
        中國老年學雜志 2021年19期
        關鍵詞:血脂中藥劑量

        劉睿 楊戈 尚坤 張欣 位佳琳 賀丹彤 位鴻

        (長春中醫(yī)藥大學 1第一附屬醫(yī)院,吉林 長春 130117; 2基礎醫(yī)學院;3針灸推拿學院; 4藥學院)

        炎癥免疫反應在冠狀動脈性心臟病(CAD)的發(fā)病機制中起著重要作用,動脈粥樣硬化(AS)是引起CAD重要的病理基礎之一〔1~3〕,提示調(diào)脂藥可能通過抑制炎癥反應,起到穩(wěn)定斑塊的作用,臨床上采用活血祛瘀利水消痰法治療高脂血癥取得明顯療效,本研究立足于此,通過觀察澤明降脂方對高脂血癥模型大鼠血脂水平及相關血清炎癥趨化因子的影響,探索其改善機體脂肪代謝、防治高脂血癥及相關病癥的作用與機制,為新藥的研發(fā)與推廣奠定實驗室基礎〔4,5〕。

        1 材料與方法

        1.1實驗動物 選用健康雄性SPF級Wistar大鼠60只,體重(200±20)g,購自長春中醫(yī)藥大學實驗動物中心,動物許可證號:SCXK(吉)2016-0004。大鼠適應性飼養(yǎng)1 w,均單籠飼養(yǎng),可自由飲水攝食。

        1.2實驗分組與動物模型制備 大鼠適應性喂養(yǎng)1 w后,采用隨機數(shù)字表法抽取10只大鼠以普通飼料喂養(yǎng),設為空白對照組,其余50只大鼠以高膽固醇飼料喂養(yǎng)。普通飼料配方為:55%碳水化合物,22%蛋白質(zhì),5%脂肪,5%纖維素,7%灰分。高膽固醇飼料配方為:在71.3%普通飼料的基礎上,加入10%牛油、10%蛋黃粉、3%膽固醇、5%白糖、0.5%膽酸鹽和0.2%丙硫氧嘧啶〔6〕。喂養(yǎng)4 w后,大鼠眼眶取血,測定血清三酰甘油(TG)和總膽固醇(TC)水平,以驗證高脂血癥動物模型造模成功。采用隨機數(shù)字表法將50只高脂血癥大鼠分為高脂模型組、藥物對照組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組,每組10只大鼠。

        1.3實驗試劑與藥品 辛伐他汀片(杭州默沙東制藥有限公司生產(chǎn),國藥準字J2913068) ;TG試劑盒(批號:20180731)、TC試劑盒(批號:20180731)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)試劑盒(批號:20180816)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)試劑盒(批號:20180817),以上試劑盒均購買自南京建成生物工程研究所。白細胞介素(IL)-1β試劑盒、IL-6試劑盒、腫瘤壞死因子(TNF)-α試劑盒、單核細胞趨化因子(MCP)-1試劑盒,以上試劑盒均購買自南京森貝伽生物科技有限公司。

        澤明降脂方由陳皮、清半夏、黃芩、絞股藍等12味藥物組成。將上述中藥加入蒸餾水浸泡30 min,煮沸后以文火慢煎共60 min,過濾得煎液;剩余藥渣再次加蒸餾水煎煮2次,煮沸后以文火慢煎共60 min,過濾得煎液;將3次煎液混合,放入60℃恒溫水浴濃縮至1.2 g/ml,0℃冰箱冷藏備用。

        1.4給藥方法 造模成功后,藥物對照組給予辛伐他汀0.01 g/kg,中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組分別給予劑量為3 g/ml、6 g/ml、12 g/ml(給藥劑量參照文獻〔7〕),空白對照組以相同劑量的生理鹽水代替,每日給藥1次,連續(xù)給藥8 w。給藥期間,模型組、藥物對照組、中藥各劑量組繼續(xù)以高膽固醇飼料喂養(yǎng)。

        1.5標本采集 末次給藥后禁食12 h以上,麻醉后采用普通無抗凝管從腹主動脈采血,室溫靜置2 h,離心(3 000 r/min,離心半徑12 cm,15 min),收集上清液,-20℃冷凍保存?zhèn)錂z。

        1.6血脂水平檢測 按照試劑盒說明書測定大鼠血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C水平。

        1.7血清炎癥趨化因子檢測 按照試劑盒說明書測定大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1水平。

        1.8統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0軟件進行單因素方差分析或t檢驗。

        2 結 果

        2.1各組血脂水平變化情況 與高脂模型組比較,中藥各劑量組TG、TC、LDL-C水平下降,均呈現(xiàn)顯著性差異(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平上升,呈現(xiàn)顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。各項指標的差異隨著用藥劑量的增加而加大。見表1。

        2.2各組血清炎癥趨化因子水平變化情況 與高脂模型組比較,中藥各劑量組IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1水平下降,均呈現(xiàn)顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。各項指標的差異隨著用藥劑量的增加而加大。見表1。

        表1 各組血脂水平及血清炎癥趨化因子水平比較

        3 討 論

        高脂血癥在中醫(yī)學中雖然無此病名,但是《黃帝內(nèi)經(jīng)》中有關“膏”、“脂”等的論述和“眩暈”、“中風”等病癥皆與此相關〔8,9〕。中醫(yī)學認為,高脂血癥主要由于飲食不節(jié),偏嗜肥甘厚味,加以生活安逸,久坐少動,年老腎虧等原因,致脾失健運,水飲停聚為濕為痰,變生膏脂而成,其病位主要在肝、脾、腎三臟,屬本虛標實之癥〔10,11〕,本研究通過中醫(yī)的辯證分析,得出以利水消腫,理氣健脾,活血祛瘀,消食化痰為法的內(nèi)服方劑——澤明降脂方,治療痰瘀互結所致的高脂血癥。

        TG、TC、LDL-C、HDL-C是觀測血脂水平的常用觀測指標,能夠真實反映出機體的血脂狀況〔12,13〕。AS是高脂血癥機體后期常見的病理反應,是一個復雜、慢性,進行性的一種疾病,也是誘發(fā)CAD的重要危險因素。有研究顯示表明,慢性炎癥反應在AS的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用〔14,15〕。因此觀測高脂血癥機體中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1等細胞因子水平,對于全面評估降脂藥物的臨床療效、探討作用機制,具有積極意義。白細胞介素IL-1β,IL-6T、TNF-α主要由單核或者巨噬細胞產(chǎn)生,單核細胞趨化蛋白MCP-1則主要趨化單核細胞,這些細胞因子可由多種細胞產(chǎn)生,廣泛作用于造血、神經(jīng)及內(nèi)分泌系統(tǒng)。具有多效性、重疊性、協(xié)同性、拮抗性和雙重性等作用特點。細胞因子與其受體集合后啟動復雜的細胞內(nèi)分子間的相互作用,最終引起細胞基因轉(zhuǎn)錄的變化。研究表明陳皮中的一種多甲氧基黃酮,可抑制脂肪組織中的TNF-α及IL-6等炎癥因子的表達及氧化應激水平〔16〕;黃芩苷可使炎癥因子水平降低,一氧化氮(NO)水平升高,提示可能通過抑制核因子κB炎癥通路等途徑對抗AS形成〔17〕;半夏中的大黃酚具有對TNF-α誘導的人腦微血管內(nèi)皮細胞的抑制作用〔18〕;在本研究中澤明降脂方的炎癥因子水平降低可能與陳皮、黃芩、半夏有關。

        本研究表明澤明降脂方對血脂具有良好的調(diào)節(jié)作用,能夠減輕氧化應激反應,對高脂血癥誘發(fā)的冠狀動脈性心臟病具有良好的預防作用。澤明降脂方調(diào)節(jié)高脂血癥機體的脂肪代謝與改善血清炎癥趨化因子的能力與用藥劑量的增加具有明顯的正相關性,但最佳的用藥劑量仍需進一步研究探索。

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