徐靜嫻，劉 森，高欣冉，高葉俊，夏清榮，葛金芳

(1.安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，2.重大自身免疫性疾病安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，3.炎癥免疫性疾病安徽省實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230032;4.安徽醫(yī)科大學(xué)附屬心理醫(yī)院臨床藥學(xué)部，5.合肥市第四人民醫(yī)院安徽省精神衛(wèi)生中心藥劑科，合肥 230032)

小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的固有巨噬細(xì)胞，在先天免疫反應(yīng)及大腦穩(wěn)態(tài)的維持中起著至關(guān)重要的作用[1]。在正常生理情況下，小膠質(zhì)細(xì)胞可以吞噬清除細(xì)胞碎片和受損的神經(jīng)元發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用[2]。然而，活化的小膠質(zhì)細(xì)胞則可通過釋放腫瘤壞死因子-α (TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β (IL-1β)等促炎細(xì)胞因子和介質(zhì)，誘發(fā)和(或)加速神經(jīng)炎癥和神經(jīng)毒性反應(yīng)。研究表明，小膠質(zhì)細(xì)胞過度活化后誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥可導(dǎo)致突觸變性、神經(jīng)細(xì)胞死亡和認(rèn)知功能障礙[3]，參與包括抑郁癥和阿爾茨海默病在內(nèi)的眾多神經(jīng)精神疾病的發(fā)生發(fā)展過程。

白藜蘆醇(resveratrol，RES)，化學(xué)名為3，4′，5-三羥基-二苯乙烯，是一種具有多種生物活性的多酚類化合物，已有多個(gè)臨床試驗(yàn)觀察其對(duì)非酒精性脂肪性肝炎(NCT01464801)、糖尿病(NCT02549924，NCT01038089)等代謝性疾病的保護(hù)作用及認(rèn)知和腦血流的影響(NCT01010009)。本課題組長(zhǎng)期致力于探索RES的神經(jīng)保護(hù)作用及可能機(jī)制，前期研究結(jié)果證實(shí)RES不僅可以干擾淀粉樣蛋白異常沉積[4]，還能改善亞臨床甲狀腺功能減退癥[5]或非酒精性脂肪肝大鼠[6]的學(xué)習(xí)和認(rèn)知功能障礙，其機(jī)制涉及對(duì)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)豐度調(diào)節(jié)相關(guān)的多種信號(hào)分子的調(diào)控。然而，RES對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活性和功能的調(diào)節(jié)尚不清楚。

本研究擬通過建立脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞損傷模型，在此基礎(chǔ)觀察白藜蘆醇體外用藥對(duì)炎癥反應(yīng)及相關(guān)信號(hào)通路分子信號(hào)表達(dá)的影響，旨在進(jìn)一步闡明白藜蘆醇神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制，為將其進(jìn)一步開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 細(xì)胞株BV2細(xì)胞購(gòu)自武漢細(xì)胞庫(kù)中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。

1.2 試劑MEM/EBSS培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Hyclone公司；胎牛血清(FBS)購(gòu)自以色列BI公司；丙酮酸鈉和非必需氨基酸購(gòu)自上海源培生物科技股份有限公司；LPS(L2880)、白藜蘆醇、氟西汀購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒購(gòu)自江蘇碧云天生物科技研究所；Iba-1(DF6442)抗體、Akt(AF6261)抗體、p-Akt(AF0016)抗體及p-CREB(AF389)抗體購(gòu)自美國(guó)affinity公司；TREM1抗體(ab200729)、TREM2抗體(ab201621)和BDNF抗體(ab108319)購(gòu)自英國(guó)abcam公司；Synaptotagmin I抗體(YT4484)購(gòu)自美國(guó)Immunoway公司；CREB(12208-1-AP)抗體購(gòu)自中國(guó)proteintech公司；β-actin抗體(TA-09)、辣根酶標(biāo)記兔抗和辣根酶標(biāo)記鼠抗購(gòu)自北京中杉金橋生物科技有限公司。

1.3 儀器TH4-200倒置光學(xué)顯微鏡(日本OLYMPUS公司)；WULTISKANMK3酶標(biāo)儀(北京安麥格貿(mào)易有限公司)；5424R離心機(jī)(德國(guó)艾本德生命科學(xué)公司)；PCR儀，電泳儀，凝膠成像系統(tǒng)(美國(guó)Bio-Rad公司)。

2 方法

2.1 BV2細(xì)胞培養(yǎng)將BV2細(xì)胞培養(yǎng)在10%的胎牛血清 (FBS)，1%非必須氨基酸和丙酮酸鈉(1 ∶1)的MEM/EBSS培養(yǎng)基中，置于37 ℃,5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。使用0.25%胰蛋白酶和PBS每隔2 d按照1 ∶3的稀釋度進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

2.2 實(shí)驗(yàn)分組① LPS濃度梯度：實(shí)驗(yàn)設(shè)置對(duì)照組，LPS(0.01，0.1，1，10，100 mg·L-1)刺激24 h后通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性，LDH法檢測(cè)細(xì)胞上清LDH釋放量。② LPS時(shí)間梯度：實(shí)驗(yàn)設(shè)置對(duì)照組，LPS(1 mg·L-1)刺激6、12、24、48 h，MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性。③ 白藜蘆醇作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)：設(shè)置對(duì)照組、模型組(LPS 1 mg·L-1)，白藜蘆醇(終濃度為10-6、10-7、10-8、10-9、10-10mol·L-1)、氟西汀(終濃度為10-7mol·L-1)和布洛芬組(終濃度為10-7mol·L-1)組，在LPS刺激前12 h加入。繼續(xù)培養(yǎng)24 h后進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。

2.3 MTT法觀察BV2細(xì)胞活力將BV2細(xì)胞以每孔1×104個(gè)接種于96孔板中，CO2培養(yǎng)箱孵育，待細(xì)胞貼壁后給藥，繼續(xù)孵育，加入新鮮的配置的MTT (5 g·L-1)20 μL，孵育4 h后終止培養(yǎng)，棄上清液，每孔加入150 μL DMSO，用酶標(biāo)儀檢測(cè)在490 nm波長(zhǎng)處的吸光(OD)值。

2.4 LDH的測(cè)定LDH測(cè)定按照生產(chǎn)廠家說明書進(jìn)行。提前1 h加入LDH釋放劑，在培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育。檢測(cè)490 nm處的OD值。

2.5 qRT-PCR法測(cè)定炎癥因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA表達(dá)收集細(xì)胞，用TRIzol裂解細(xì)胞提取細(xì)胞內(nèi)總RNA。使用多功能定量?jī)x對(duì)總RNA的濃度和純度進(jìn)行測(cè)定。使用試劑盒法合成cDNA。qRT-PCR反應(yīng)步驟按照說明書進(jìn)行，引物序列見Tab 1，采用10 μL反應(yīng)體系，反應(yīng)體系包括5 μL的TB Green PCR Master Mix，上下游引物各0.3 μL，3 μL的cDNA，無酶水1.4 μL。反應(yīng)條件為：95 ℃ 3 min，95 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，總循環(huán)數(shù)為40個(gè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用2-ΔΔCt法分析。

Tab 1 Primer sequences

2.6 免疫熒光染色BV2細(xì)胞首先用甲醇固定10 min，然后經(jīng)10%的BSA封閉20 min，用1%的BSA稀釋Iba-1一抗(工作濃度1 ∶100)，在4 ℃冰箱孵育過夜。次日用PBS洗滌細(xì)胞3次，每次5 min，浸洗不搖晃，熒光標(biāo)記的二抗避光室溫孵育1 h。加入含有DAPI的抗熒光衰減封片劑后在熒光顯微鏡下觀察拍照。

2.7 Western blot法測(cè)定BDNF等相關(guān)蛋白的表達(dá)情況在BV2細(xì)胞中加入含有1% PMSF和磷酸酶抑制劑的RIPA裂解液提取蛋白。按照BCA法測(cè)定蛋白濃度。定量后的蛋白樣品經(jīng)12%的SDS-PAGE凝膠分離蛋白，然后轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，經(jīng)5%的脫脂牛奶室溫封閉2 h，加入至相應(yīng)的一抗中孵育過夜(除TREM1和Synaptotagmin I的一抗工作濃度為1 ∶2 000之外，其他一抗工作濃度均為1 ∶1 000)，次日經(jīng)蛋白相對(duì)應(yīng)的二抗室溫孵育1 h，將按比例配置好的超敏ECL顯影液滴加到PVDF膜上經(jīng)化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行顯影成像。實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)Image J圖像分析軟件進(jìn)行蛋白條帶灰度值分析。

3 結(jié)果

3.1 LPS誘導(dǎo)BV2細(xì)胞炎癥損傷模型的建立

3.1.1LPS對(duì)BV2細(xì)胞活力的影響 采用MTT方法，結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH濃度測(cè)定，觀察不同濃度梯度LPS (0.01、0.1、1、10、100 mg·L-1)、不同作用時(shí)間(6、12、24、48 h)對(duì)BV2細(xì)胞活力的影響。結(jié)果如Fig1 A-C所示，隨LPS刺激濃度增加、作用時(shí)間延長(zhǎng)，BV2細(xì)胞活力減弱、上清液中LDH釋放量增加。綜合LPS刺激的時(shí)效及量效關(guān)系結(jié)果，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中選擇的BV2細(xì)胞損傷模型實(shí)驗(yàn)條件為L(zhǎng)PS(1 mg·L-1)刺激24 h。

Fig 1 Dose-and time-effect of LPS on viability of BV2 cells*P<0.05,**P<0.01 vs control group.

3.1.2LPS對(duì)BV2細(xì)胞IL-1β、IL-6及TNF-α mRNA表達(dá)的影響 采用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)LPS刺激對(duì)BV2細(xì)胞中相關(guān)炎癥因子表達(dá)的影響。結(jié)果如Fig2所示，與對(duì)照組比較，LPS(1 mg·L-1)刺激24 h后BV2細(xì)胞中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表達(dá)明顯增加(P<0.05)。

Fig 2 Effect of LPS on mRNA expression of IL-1β,IL-6 and TNF-α in BV2 **P<0.01 vs control group.

3.2 白藜蘆醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH釋放量的影響如Fig3所示，與對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH釋放量明顯增高，白藜蘆醇(10-6-10-10mol·L-1)體外用藥可以明顯抑制LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞上清液中LDH含量增加(P<0.05)。

3.3 白藜蘆醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞標(biāo)志物Iba-1表達(dá)的影響采用免疫熒光染色觀察小膠質(zhì)細(xì)胞活化的特異性標(biāo)志物Iba-1的表達(dá)變化。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，LPS處理24 h后，細(xì)胞胞體變大，突起變多變短，細(xì)胞變圓，形似阿米巴狀或桿狀，形態(tài)變化明顯且熒光強(qiáng)度略有升高，而白藜蘆醇(10-7mol·L-1)及陽(yáng)性對(duì)照藥物氟西汀和布洛芬預(yù)處理后BV2細(xì)胞形態(tài)接近正常。見Fig4。

Fig 3 Effect of RES on cell injury induced by LPS in BV2 *P<0.05,**P<0.01 vs control group;#P<0.05,##P<0.01 vs model group.

3.4 白藜蘆醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞IL-1β、IL-6和TNF-α表達(dá)的影響Fig5為白藜蘆醇體外用藥對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞中炎癥因子IL-1β,IL-6,TNF-α的影響。如圖所示，與對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞IL-1β、IL-6和TNF-α的表達(dá)明顯上升，白藜蘆醇(10-6-10-10mol·L-1)及陽(yáng)性對(duì)照藥物氟西汀和布洛芬預(yù)處理均可減少LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表達(dá)的變化(P<0.05或P<0.01)。

3.5 白藜蘆醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞BDNF、p-Akt、p-CREB及Synaptotagmin I蛋白表達(dá)的影響Western blot 方法檢查白藜蘆醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞BDNF、p-Akt、p-CREB及Synaptotagmin I 蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果如Fig6所示，與對(duì)照組相比，LPS刺激的模型組BV2細(xì)胞BDNF,p-CREB和Synaptotagmin I蛋白的表達(dá)降低，而p-Akt的蛋白表達(dá)則明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。與模型組比較，白藜蘆醇及陽(yáng)性對(duì)照藥物氟西汀及布洛芬預(yù)處理可以逆轉(zhuǎn)上述蛋白表達(dá)的改變。

Fig 4 Immunofluorescence staining of Iba-1 in BV2 cells(magnification×200)

Fig 5 Effect of RES on mRNA expression of IL-1β,IL-6 and TNF-α induced by LPS in BV2 *P<0.05,**P<0.01 vs control group;#P<0.05,##P<0.01 vs model group.

Pearson檢驗(yàn)結(jié)果表明，BV2細(xì)胞BDNF的表達(dá)與p-Akt (r=-0.610,P=0.001)呈負(fù)相關(guān),而與CREB (r=0.613,P=0.001)、Synaptotagmin I(r=0.608,P=0.001)的表達(dá)呈正相關(guān)。

3.6 白藜蘆醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞TREM2和TREM1表達(dá)的影響Fig7為各組BV2細(xì)胞中TREM1和TREM2表達(dá)情況。與對(duì)照組相比，模型組TREM1蛋白的表達(dá)降低，而TREM2的表達(dá)增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05或P<0.01)。與模型組比較，白藜蘆醇及陽(yáng)性對(duì)照藥物氟西汀和布洛芬預(yù)處理可上調(diào)TREM1的表達(dá)并降低TREM2的表達(dá)。

Fig 6 Effect of RES on protein expression of BDNF, p-Akt,p-CREB,and Synaptotagmin I induced by LPS in BV2 A:a typical graph;B:the statistical analysis of Western blot results;1:control group;2:Model group;3-7:RES (10-6～10-10 mol·L-1)group;8:Flu (10-7 mol·L-1)group;9:Ibu group (10-7 mol·L-1).*P<0.05 vs control group;#P<0.05 vs model group.

Fig 7 Effect of RES on protein expression of TREM2 and TREM1 induced by LPS in BV2 A:a typical graph;B:the statistical analysis of Western blot results;1:control group;2:model group;3-7:RES (10-6～10-10 mol·L-1)group;8:Flu (10-7 mol·L-1)group;9:Ibu (10-7 mol·L-1)group.*P<0.05 vs control group;#P<0.05 vs model group.

Pearson檢驗(yàn)結(jié)果表明，BV2細(xì)胞TREM1與TREM2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān) (r=-0.629,P<0.001)，并且BDNF的表達(dá)與TREM1(r=0.894,P<0.001)的表達(dá)呈正相關(guān)，而與TREM2(r=-0.593,P=0.001)的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。

4 討論

小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)是包括抑郁癥和阿爾茨海默病在內(nèi)的多種神經(jīng)精神疾病發(fā)生發(fā)展的重要因素。LPS是革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分，是小膠質(zhì)細(xì)胞活化的強(qiáng)刺激因子。研究表明，LPS可誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞激活，導(dǎo)致TNF-α、NO等炎癥介質(zhì)及活性氧自由基釋放增多[7-8]。本課題組前期研究證實(shí)，LPS腹腔注射可誘導(dǎo)大鼠抑郁相關(guān)行為的產(chǎn)生，并導(dǎo)致海馬BDNF相關(guān)的突觸可塑性改變[9]。本研究中采用多種方法觀察了LPS對(duì)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞增殖活性及炎癥介質(zhì)釋放的影響，結(jié)果表明，LPS(1 mg·L-1)作用24h可誘導(dǎo)BV2細(xì)胞活力下降、細(xì)胞損傷及炎癥介質(zhì)IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA表達(dá)增加。結(jié)合特異性的Iba-1免疫熒光染色結(jié)果，提示LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞損傷和炎癥模型成功建立。

多酚類化合物白藜蘆醇具有廣泛的藥理學(xué)活性，已被證明具有多靶點(diǎn)的神經(jīng)保護(hù)作用。本課題組前期研究結(jié)果證實(shí)其對(duì)多種動(dòng)物模型學(xué)習(xí)記憶能力及抑郁相關(guān)行為的改善作用[4-6,10]。本研究結(jié)果表明，白藜蘆醇(10-6-10-10mol·L-1)體外用藥可減少BV2細(xì)胞培養(yǎng)上清中的LDH釋放，并下調(diào)IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA表達(dá)，提示白藜蘆醇可有效緩解LPS誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)。5-羥色胺再攝取抑制劑氟西汀是臨床常用的抗抑郁藥物，主要通過增加突觸間隙中的5-羥色胺濃度發(fā)揮抗抑郁作用。研究發(fā)現(xiàn)，氟西汀治療抑郁癥的機(jī)制也涉及對(duì)神經(jīng)炎癥的調(diào)節(jié)[11]。本課題組前期研究中也證實(shí)氟西汀對(duì)LPS誘導(dǎo)的大鼠抑郁相關(guān)行為具有改善作用[9]。基于抑郁癥發(fā)生機(jī)制的炎癥反應(yīng)學(xué)說，非甾體抗炎藥在抑郁癥防治中的作用也引起廣泛關(guān)注。因此，本研究選擇了氟西汀和非甾體抗炎藥布洛芬作為陽(yáng)性對(duì)照藥物。結(jié)果表明，兩者均對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞損傷及炎癥反應(yīng)有一定的改善作用。

突觸可塑性是大腦結(jié)構(gòu)和功能維持和調(diào)節(jié)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。研究表明，小膠質(zhì)細(xì)胞可在多環(huán)節(jié)通過多種途徑參與突觸可塑性的調(diào)節(jié)。在大腦發(fā)育階段，神經(jīng)元相互作用形成大量的無效的突觸連接，而這些無效的突觸連接不及時(shí)清除則會(huì)引起神經(jīng)功能障礙，小膠質(zhì)則通過修剪無效的突觸連接在突觸可塑性中起重要作用[12]。在病理狀態(tài)下，活化的小膠質(zhì)細(xì)胞還可通過吞噬死亡的神經(jīng)元?dú)埡?、修?fù)損傷的突觸網(wǎng)絡(luò)或調(diào)節(jié)Wnt等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活性影響突觸可塑性[13]。并且，有研究指出，小膠質(zhì)細(xì)胞分泌的BDNF是維持學(xué)習(xí)依賴型突觸形成的重要物質(zhì)基礎(chǔ)[14]。BDNF的轉(zhuǎn)錄依賴于Ca2+介導(dǎo)的環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)的激活[15]，其基因多態(tài)性、豐度及功能的改變已被證實(shí)參與抑郁癥等多種疾病的發(fā)生。突觸結(jié)合蛋白SynaptotagminⅠ參與調(diào)控突觸的形成及神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞，在突觸可塑性調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用[16]。本研究中，LPS(1 mg·L-1)作用24 h可誘導(dǎo)BV2細(xì)胞BDNF、p-CREB及SynaptotagminⅠ的蛋白表達(dá)降低，而p-Akt的蛋白表達(dá)則顯著升高；白藜蘆醇及陽(yáng)性對(duì)照藥物氟西汀及布洛芬預(yù)處理可以逆轉(zhuǎn)上述蛋白表達(dá)的改變。相關(guān)性分析結(jié)果提示，BDNF的表達(dá)與p-CREB及 Synaptotagmin I的表達(dá)之間呈正相關(guān)關(guān)系。雖然磷酸化狀態(tài)Akt與CREB的關(guān)系仍需后續(xù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)，這些結(jié)果提示，LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)及其伴發(fā)的突觸可塑性改變，是白藜蘆醇發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的可能靶點(diǎn)之一，并且BDNF/Akt/CREB信號(hào)通路在其中發(fā)揮重要作用。

髓樣細(xì)胞上表達(dá)的觸發(fā)受體(TREMs)不僅能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的炎癥反應(yīng)[17]，其多態(tài)性及豐度改變還參與多種神經(jīng)精神疾病的發(fā)生機(jī)制[18]。TREMs表達(dá)失衡可能是小膠質(zhì)細(xì)胞活性和功能狀態(tài)發(fā)生改變的反應(yīng)之一。本研究中，LPS(1 mg·L-1)作用24h可誘導(dǎo)BV2細(xì)胞TREM1表達(dá)下調(diào)，TREM2表達(dá)增加，且TREM1和TREM2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，這與本課題組前期研究的整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。白藜蘆醇及陽(yáng)性對(duì)照藥物氟西汀和布洛芬體外給藥均可增加TREM1表達(dá)并下調(diào)TREM2的表達(dá)。Pearson檢驗(yàn)結(jié)果表明，BDNF、CREB及SynaptotagminⅠ的表達(dá)均與TREM1的表達(dá)呈正相關(guān)，而與TREM2的表達(dá)則呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。進(jìn)一步提示，TREM1/2的表達(dá)改變可能參與LPS誘導(dǎo)的突觸可塑性改變并是白藜蘆醇神經(jīng)保護(hù)作用的可能靶點(diǎn)之一。

綜上所述，本研究結(jié)果表明，白藜蘆醇可抑制LPS誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞損傷及炎癥反應(yīng)，其機(jī)制與調(diào)節(jié)BDNF/Akt/CREB及TREM1/2的表達(dá)失衡有關(guān)。