米 莎

（核工業(yè)二〇三研究所，陜西 西安710000）

苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑和戊菌唑均為三唑類殺菌劑，其作用機理為影響甾醇類生物合成，使菌體細胞膜功能受到破壞，因具有高效、廣譜、持效期長等特點廣泛應用于果樹、蔬菜等農作物病害防治。苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑和戊菌唑等三唑類殺菌劑屬低毒殺菌劑，在農業(yè)施用過程中使用范圍較廣，但大部分農藥會散落到空氣、地表水和土壤等環(huán)境中。土壤中的三唑類殺菌劑殘留可通過農作物傳遞到人類，對人體健康造成一定的危害[1]。因此，加強對農作物種植土壤中苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑和戊菌唑等農藥殘留的分析具有一定的現(xiàn)實意義。

苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑和戊菌唑的分析方法一般有氣相色譜法、液相色譜法，液相色譜質譜法和氣相色譜質譜聯(lián)用法等，其中氣相色譜質譜聯(lián)用法對低含量的目標物定性定量相對比較準確，抗干擾能力較強[2-7]。本實驗采用快速溶劑萃取對土壤樣品進行前處理，通過氣相色譜質譜聯(lián)用法測定土壤中苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑和戊菌唑微量殘留，實驗結果準確可靠[8，9]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

7890A/5975C型氣相色譜質譜聯(lián)用儀（美國安捷倫）；Dionex ASE 300型加速溶劑萃取儀（賽默飛世爾科技公司）；M32型氮吹儀（北京萊伯泰科）；BSA-224型電子天平（德國賽多利斯）。

濃度均為100μg·mL-1的苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑標準溶液，農業(yè)部環(huán)境保護科學研究所；丙酮、正己烷，農殘級，德國Merck公司；無水Na2SO4、硅藻土，分析純，上海國藥化學試劑公司。

1.2 儀器條件

色譜條件 載氣為高純He；HP-5MS毛細管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）；柱流量1.5mL·min-1；進樣口溫度:230℃；不分流進樣，進樣量1μL。柱箱升溫程序：60℃保持1min后，以20℃·min-1升溫速率升到180℃，保持1min，再以15℃·min-1升溫速率升到280℃，保持5min。

質譜條件EI離子源；電離電壓70eV；接口溫度280℃；離子源溫度240℃；掃描方式為多反應監(jiān)測（MRM）模式；溶劑延遲時間3.0min；3種化合物離子參數見表1。

表1 3種農藥質譜參數Tab.1 Mass spectrum parameters of three pesticides

1.3 溶液配制

以正己烷為稀釋溶劑，將100μg·mL-1的苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑標準液配制成濃度均為10μg·mL-1的混合標準儲備溶液。移取儲備溶液適量，配制成苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑質量濃度分別為10.0、30.0、50.0、100、150μg·L-1的標準曲線溶液。

1.4 樣品處理

按照GB17378.3和HJ/T166的要求采集、預處理和保存土壤樣品。稱取5g硅藻土放入萃取池中，再稱取10g土壤樣品和5g無水Na2SO4置研缽中研磨使其混合均勻，置于硅藻土上層。按加速溶劑萃取儀條件進行萃取，系統(tǒng)壓力10.5MPa，萃取溶劑為丙酮∶正己烷（1∶1）溶液，萃取溫度80℃，沖洗體積為萃取池體積60%，循環(huán)次數2次，吹掃時間60s，靜態(tài)提取時間5min，萃取液氮吹至近干。

用10mL丙酮∶正己烷（1∶1）分3次潤洗濃縮殘渣，潤洗液過經5.0mL丙酮∶正己烷（1∶9）溶液活化的弗羅里矽柱進行凈化。將收集的凈化液置于氮吹儀上氮吹至近干，用正己烷定容至1mL后待測。

2 結果與討論

2.1 萃取方法的選擇

農藥前處理方法的選擇在整個農藥殘留測試過程中至關重要。合適的前處理方式，可使方法獲得較高的準確性及靈敏度。當前農藥萃取主要有以下方法：液液萃取法、超聲萃取法、固相萃取法和加速溶劑萃取法等。液液萃取法需要人工振搖或超聲處理，人工振搖耗時長；超聲萃取操作簡單，但主要適用于含水量高的樣品，如蔬菜水果等；固相萃取需要人工操作，處理效率較低；加速溶劑萃取法運用自動萃取裝置，耗時短、溶劑使用量較少，可大批量處理樣品，且回收率較高。因此，本文選擇加速溶劑萃取法。

2.2 萃取條件的優(yōu)化

萃取溫度是決定加速溶劑萃取效率的重要因素之一。在空白土壤樣品中加入一定量的苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑標準液，設置萃取溫度為60、70、80和90℃，按1.4步驟進行前處理回收試驗，考察萃取溫度對萃取回收率的影響，結果見表2。

表2 不同萃取溫度所得回收率Tab.2 Recoveries at different extraction temperatures

由表2可知，萃取溫度為80~90℃時，3種化合物回收率在90%以上且變化不大。

在加速溶劑萃取過程中，萃取時間越長，目標物的萃取效率越高，但超過最佳萃取時間，萃取時間過長反而降低了檢測效率。本文將萃取時間設定為3，5和8min，考察3個時間點3種農藥的萃取效率。結果發(fā)現(xiàn)，隨著萃取時間的延長，萃取效率逐漸提高，然而萃取時間為5和8min時回收率變化不大。因此，本文萃取溫度選擇80℃，萃取時間為5min。

2.3 線性范圍及檢出限

按照1.2項下的儀器條件分別進樣1.3項下苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑系列標準溶液各1μL，以質量濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線。在空白土壤樣品中加入一定量的苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑標準溶液，按1.4步驟進行前處理分析，以3倍信號噪聲比（S/N）計算檢出限。苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑對應的標準曲線方程、相關系數及方法檢出限見表3，典型譜圖見圖1。

圖1 標準樣品質譜圖Fig.1 Mass spectrum of standard sample

表3 3種農藥的標準曲線方程、相關系數和檢出限Tab.3 Standard curve equation,correlation coefficient and detection limit of three pesticides

2.4 加標回收率與精密度測試

稱取不含農藥殘留的土壤樣品10g，加入一定量的苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑標準液，配制低（10.0μg·L-1），中（40.0μg·L-1），高（100μg·L-1）3個濃度加標樣品，按本方法進行測定，進樣過程中3個濃度點的樣品各進樣6針，考察儀器的精密度測試結果，見表4。

表4 加標回收率與精密度結果（%）Tab.4 Results of standard addition recovery and precision

由表4可見，苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑加標回收率均在91.0%～103.5%之間，精密度測試結果在1.89%～3.12%之間，符合農藥殘留測試的要求。

2.5 實際樣品的檢測

為驗證該方法的可行性，隨機采集本地區(qū)6處不同種植基地的土壤樣品，運用本文建立的方法進行分析測試。結果表明，其中有一批土壤樣品檢出苯醚甲環(huán)唑（0.004mg·kg-1），但在檢出限以內，其它2種農藥均未檢出。

3 結論

本文建立了加速溶劑萃取結合氣相色譜質譜法聯(lián)用技術檢測土壤中苯醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑的測試方法，并對萃取方法及萃取的條件進行了討論。實驗結果表明，加速溶劑萃取法有機試劑使用量少，前處理自動化程度較高，檢測方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，測定結果準確可靠，可用于土壤中醚甲環(huán)唑、氟環(huán)唑、戊菌唑等三唑類殺菌劑的痕量分析。