吳麗艷，熊喜華，李 莎，楊天寧，熊咸遠(yuǎn)

(1.佳和農(nóng)牧股份有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410016；2.海博萊生物科技咨詢有限公司，北京 100086；3.安化縣畜牧水產(chǎn)中心，湖南 益陽(yáng)413500)

豬細(xì)小病毒病是由豬細(xì)小病毒(Porcine parvovirus，PPV)引起的一種豬的繁殖障礙病，該病的臨床癥狀為被感染的母豬特別是初產(chǎn)母豬和血清學(xué)陰性的經(jīng)產(chǎn)母豬發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等繁殖障礙[1]，以產(chǎn)木乃伊胎為主[2]，而母豬本身并不表現(xiàn)除流產(chǎn)之外的臨床癥狀，其他豬感染后也無(wú)明顯的臨床癥狀[3]。目前預(yù)防該病的主要手段是使用豬細(xì)小病毒疫苗進(jìn)行免疫[4]。豬丹毒病(Swine erysipelas，SE)是由豬丹毒桿菌引起的一種急性、熱性傳染病[5]，廣泛分布于世界各地，是危害世界養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一[6,7]。目前，免疫接種仍是預(yù)防豬丹毒病的最有效方法。

本試驗(yàn)在進(jìn)行種豬細(xì)小病毒病和豬丹毒病的流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，對(duì)一種新型豬丹毒-豬細(xì)小病毒病二聯(lián)滅活疫苗的有效性、安全性進(jìn)行評(píng)估。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)豬場(chǎng)

試驗(yàn)在佳和農(nóng)牧股份有限公司養(yǎng)豬研究院試驗(yàn)豬場(chǎng)進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)疫苗

豬丹毒-豬細(xì)小病毒病二聯(lián)滅活疫苗H(批號(hào)：47P1-1)、豬丹毒滅活疫苗E(批號(hào)：2021001)、豬細(xì)小病毒病滅活疫苗P(批號(hào)：2021003)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 豬場(chǎng)種豬細(xì)小病毒病和豬丹毒病的流行病學(xué)調(diào)查 選擇同一批次后備母豬(體重>60 kg)26頭和同一批次經(jīng)產(chǎn)母豬15頭，采血進(jìn)行血清抗體檢測(cè)，了解豬場(chǎng)豬細(xì)小病毒病和豬丹毒病的流行情況。豬丹毒ELISA檢測(cè)判斷標(biāo)準(zhǔn)：IRPC>40，陽(yáng)性；IRPC≤40，陰性。豬細(xì)小病毒ELISA檢測(cè)判斷標(biāo)準(zhǔn)：OD值≥0.3，陽(yáng)性；OD值<0.3，陰性。

1.3.2 不同疫苗免疫效果的對(duì)比試驗(yàn) 選擇免疫前PPV和SE血清抗體均為陰性的后備母豬20頭，隨機(jī)分成試驗(yàn)組(10頭)和對(duì)照組(10頭)，試驗(yàn)組免疫豬丹毒-豬細(xì)小病毒病二聯(lián)滅活疫苗H，對(duì)照組免疫豬丹毒滅活疫苗E和豬細(xì)小病毒病滅活疫苗P。在配種前1個(gè)月首免，間隔4周后二免，每頭豬每種疫苗每次接種1頭份(2 mL)，頸部肌肉注射(表1)。

在首免后3周和產(chǎn)仔后7天，母豬采血進(jìn)行PPV和SE血清抗體檢測(cè)(表1)。觀察臨床分娩情況，收集疑似感染PPV仔豬(死/木/畸/流產(chǎn)胎兒)的腎、肝、肺及腸系膜淋巴結(jié)等組織器官，進(jìn)行PPV病原檢測(cè)。

表1 母豬免疫程序和母豬血清抗體、仔豬病原檢測(cè)

對(duì)免疫母豬的繁殖性能進(jìn)行評(píng)估，內(nèi)容包括配種評(píng)分、配種分娩率、產(chǎn)程、產(chǎn)仔數(shù)、斷奶后發(fā)情配種情況等。配種表現(xiàn)評(píng)分原則如表2所示。

表2 母豬配種表現(xiàn)評(píng)分原則

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

用Excel 2010軟件和SPSS 21.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表示為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤，顯著水準(zhǔn)為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 豬場(chǎng)種豬細(xì)小病毒病、豬丹毒病的流行病學(xué)調(diào)查

后備母豬的豬丹毒抗體陽(yáng)性率為0.00%，經(jīng)產(chǎn)母豬的豬丹毒抗體陽(yáng)性率為26.67%。后備母豬的豬細(xì)小病毒抗體陽(yáng)性率為15.38%，經(jīng)產(chǎn)母豬的豬細(xì)小病毒抗體陽(yáng)性率為100.00%。

2.2 不同疫苗免疫效果

2.2.1 不同疫苗對(duì)母豬繁殖性能的影響 試驗(yàn)組與對(duì)照組母豬在配種靜立評(píng)分、配種鎖住評(píng)分、配種倒流評(píng)分、配種分娩率等各指標(biāo)上均無(wú)顯著差異(表3)。

表3 不同疫苗對(duì)母豬配種表現(xiàn)和配種分娩率的影響

試驗(yàn)組與對(duì)照組母豬在產(chǎn)程、窩健仔數(shù)、窩弱仔數(shù)、窩死胎數(shù)、窩木乃伊數(shù)、窩畸形數(shù)和窩總仔數(shù)等指標(biāo)上均無(wú)顯著差異(表4)。

表4 不同疫苗對(duì)母豬產(chǎn)仔的影響

2.2.2 不同疫苗免疫效果的比較 豬丹毒抗體檢測(cè)結(jié)果如表5和圖1所示，首免后3周：①試驗(yàn)組豬丹毒抗體陽(yáng)性率高于對(duì)照組；②試驗(yàn)組豬丹毒抗體平均值高于對(duì)照組(P=0.010)；③試驗(yàn)組豬丹毒抗體的離散度顯著低于對(duì)照組。產(chǎn)仔后試驗(yàn)組和對(duì)照組豬丹毒抗體陽(yáng)性率均100%，但是試驗(yàn)組豬丹毒抗體整齊度較對(duì)照組更好。

豬細(xì)小病毒抗體檢測(cè)結(jié)果如表5和圖2所示，首免后3周：①對(duì)照組豬細(xì)小病毒抗體平均值比試驗(yàn)組高(P=0.030)；②對(duì)照組豬細(xì)小病毒抗體水平整齊度明顯優(yōu)于試驗(yàn)組。產(chǎn)仔后試驗(yàn)組和對(duì)照組豬細(xì)小病毒抗體的陽(yáng)性率均為100%，但試驗(yàn)組豬細(xì)小病毒抗體水平有高于對(duì)照組的趨勢(shì)(P=0.088)，抗體水平整齊度相對(duì)較好。

表5 豬丹毒和豬細(xì)小病毒抗體檢測(cè)結(jié)果

圖1 母豬免疫后豬丹毒抗體水平

圖2 母豬免疫后豬細(xì)小病毒抗體水平

試驗(yàn)組與對(duì)照組仔豬PPV病原陽(yáng)性率均為0.00%，即均未檢出豬細(xì)小病毒(表6)。

表6 豬細(xì)小病毒病原檢測(cè)結(jié)果

3 討論

3.1 豬細(xì)小病毒病與豬丹毒病的流行病學(xué)調(diào)查

該豬場(chǎng)經(jīng)產(chǎn)母豬的豬細(xì)小病毒抗體陽(yáng)性率為100.00%，表明該場(chǎng)豬細(xì)小病毒疫苗免疫計(jì)劃實(shí)施較好。后備母豬在未實(shí)施豬細(xì)小病毒疫苗免疫的情況下，15.38%豬細(xì)小病毒抗體陽(yáng)性，應(yīng)該是豬細(xì)小病毒野毒感染的結(jié)果。該場(chǎng)后備母豬的豬丹毒抗體陽(yáng)性率為0.00%，表明該場(chǎng)后備母豬未感染豬丹毒，且未免疫豬丹毒疫苗。經(jīng)產(chǎn)母豬豬丹毒抗體陽(yáng)性率為26.67%，應(yīng)該是由于臨床感染過(guò)豬丹毒造成的。

調(diào)查結(jié)果顯示，該場(chǎng)后備母豬有細(xì)小病毒野毒感染風(fēng)險(xiǎn)存在，提示該場(chǎng)后備母豬免疫細(xì)小病毒疫苗是非常有必要的。當(dāng)豬丹毒感染情況嚴(yán)重，呈地方流行性時(shí)，可以制定和實(shí)施豬丹毒免疫計(jì)劃。

3.2 不同疫苗免疫效果的比較

在本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組豬丹毒抗體水平在免疫后到產(chǎn)仔階段均比對(duì)照組好。豬細(xì)小抗體水平在首免后暫未體現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)，但在二免后試驗(yàn)組豬細(xì)小病毒抗體水平更好。試驗(yàn)組與對(duì)照組仔豬均未檢測(cè)出細(xì)小病毒感染，表明兩種免疫方式保護(hù)效果均較好。

3.3 經(jīng)濟(jì)效益與生物安全

本次試驗(yàn)中，試驗(yàn)組與對(duì)照組母豬的配種分娩率無(wú)差異，試驗(yàn)組收益未有增加，但在豬丹毒流行的區(qū)域與季節(jié)，豬場(chǎng)面臨豬丹毒的嚴(yán)重威脅時(shí)，疫苗的抗體水平和保護(hù)力是首要考慮的因素，聯(lián)合疫苗的優(yōu)勢(shì)或許會(huì)凸顯。此外，豬丹毒-豬細(xì)小病毒病二聯(lián)苗可減少免疫注射次數(shù)，減少與豬只接觸的機(jī)會(huì)，有利于豬場(chǎng)的生物安全。