馬占清(青海省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，青海 西寧 810000)

人參果是青海省有名的地方特產(chǎn)，人參果的外形與人類的心臟很相似，是一種果汁量很豐富的特色水果，有很高的營養(yǎng)價(jià)值[1-2]。由于青海氣候[3]冬寒夏涼、日溫差大，人參果多數(shù)種植在蔬菜大棚之中，同其他溫室作物類似，容易滋生病蟲害，農(nóng)藥使用量也較大。因此，人參果中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)也非常重要。農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)和畜產(chǎn)品及飼料中獸藥殘留檢測(cè)，主要采用氣相色譜儀、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀、液相色譜儀、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀等儀器進(jìn)行檢測(cè)[4-9]。近幾年來青海省人參果的種植和市場(chǎng)需求都有了很大的提升，本文就人參果中4種有機(jī)磷類農(nóng)藥(特丁硫磷、樂果、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷)殘留的檢測(cè)，適當(dāng)改進(jìn)了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部NY/T761標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法中樣品的前處理步驟，通過前處理方法的改進(jìn)提高了樣品檢測(cè)效率和農(nóng)藥殘留提取的回收率。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)樣品：樣品為采摘自青海省民和縣金星村某蔬菜大棚中的人參果，已經(jīng)碎樣處理。

1.1.2儀器與設(shè)備：AH-30全自動(dòng)勻漿機(jī)(?？苾x器有限公司生產(chǎn))，G16高速離心機(jī)(長沙英泰儀器有限公司生產(chǎn))，N-1200B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司生產(chǎn))，MS 3basis旋渦混合器(IKA儀器有限公司生產(chǎn))，Agilent Technologies 7890A氣相色譜儀(美國安捷倫公司生產(chǎn))，配備火焰光度檢測(cè)器(FPD)，色譜柱：DB-1701(30m×0.25mm×0.25um毛細(xì)色譜柱)。

1.1.3試劑與材料：乙腈(色譜純)、丙酮(色譜純)、氯化鈉(分析純)。特丁硫磷(Terbufos)、樂果(Dimethoate)、甲基對(duì)硫磷(Parathion-methyl)、對(duì)硫磷(Parathion)4支農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品購于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所(天津)，濃度為100ug/ml。

1.2 試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)采用《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》(NY/T761-2008)[10]中第1部分，蔬菜和水果中有機(jī)磷類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定進(jìn)行檢測(cè)，其中對(duì)前處理部分進(jìn)行了適當(dāng)?shù)母倪M(jìn)。

1.3 試驗(yàn)原理

本試驗(yàn)采用乙腈提取人參果樣品中的農(nóng)藥殘留，經(jīng)勻漿提取，提取溶液經(jīng)過鹽析、液-液萃取、離心靜置分層、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、用丙酮定容至5ml后過0.2um濾膜，用氣相色譜儀的火焰光度檢測(cè)器(FPD)進(jìn)行檢測(cè)。用外標(biāo)法進(jìn)行定性和定量分析。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制

本試驗(yàn)選取5個(gè)濃度梯度，吸取4種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液各100ul于10ml容量瓶中，用丙酮稀釋定容配制成濃度為1ug/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，保存在-7℃冰箱中。檢測(cè)時(shí)通過稀釋混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液得到100、200、400、500、800ng/l共5個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，上機(jī)進(jìn)行氣相色譜分析，繪制4種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5 前處理

分別稱取人參果樣品6份各25.0g于100ml聚乙烯離心管中，取其中3份為檢測(cè)樣品，其中2份做為加標(biāo)，1份做為基質(zhì)，配基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。各加入50ml乙腈，勻漿2min，然后再將5～7g氯化鈉加入離心管中，蓋上離心管的蓋子，劇烈震蕩1min后放入離心機(jī)中以5000r/min離心5min，使乙腈和水相分層。吸取10.0ml上清液，放入平底燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至凈干，用丙酮溶解定容至5.0ml，過0.2um濾膜，裝瓶待測(cè)。

1.6 上機(jī)檢測(cè)

用氣相色譜儀上機(jī)檢測(cè)，色譜柱：DB-1701(30m×0.25mm×0.25um)。設(shè)置色譜柱升溫程序：開始溫度設(shè)定為50℃，以10℃/min升至120℃保持1min；再以20℃/min升至230℃保持15min。進(jìn)樣口溫度為250℃，檢測(cè)器(FPD)溫度為240℃，載氣(高純氮≥99.999%)流速為30ml/min，燃燒氣(高純氫≥99.999%)流速為75ml/min，助燃?xì)?空氣)流速為100ml/min。采用不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1ul。

2 結(jié)果分析

2.1 四種農(nóng)藥人參果基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線

用氣相色譜儀檢測(cè)4種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液，特丁硫磷、樂果、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷的保留時(shí)間分別為15.235min、16.936min、18.604min、20.172min。由表1表2可以看出，在100～800ng/l范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與峰面積之間線性關(guān)系良好。

表1 4種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)應(yīng)的峰面積

表2 4種農(nóng)藥人參果基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液線性方程

2.2 人參果樣品檢測(cè)結(jié)果

通過上機(jī)檢測(cè)，此次檢測(cè)的3份人參果樣品中均未檢出上述4種農(nóng)藥。2份加了4種農(nóng)藥的加標(biāo)樣品，檢測(cè)得出加標(biāo)樣品的含量及回收率如表3，計(jì)算得出回收率都在合格范圍內(nèi)。

表3 人參果加標(biāo)樣品檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)果與討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，通過適當(dāng)改進(jìn)前處理方法后4種農(nóng)藥的提取回收率都在合格范圍內(nèi)。有機(jī)磷類農(nóng)藥用火焰光度檢測(cè)器(FPD)檢測(cè)時(shí)受基質(zhì)影響較大，因此采用空白基質(zhì)配標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白基質(zhì)加標(biāo)回收率的方法確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。上機(jī)測(cè)定要及時(shí)，測(cè)定過程中先測(cè)試劑空白和樣品空白，再由低濃度到高濃度依次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液，最后測(cè)定考核樣品。為了降低因儀器不穩(wěn)定造成的誤差，每個(gè)樣品上機(jī)平行測(cè)定3次，三次之間的偏差小于10%，結(jié)果取3次測(cè)定的平均值。由于人參果含水量比較高，加入氯化鈉鹽析時(shí)需要充分混勻使樣品中的水分達(dá)到過飽和狀態(tài)，以提高人參果中農(nóng)藥的提取率。離心機(jī)離心時(shí)間控制在4～5min之間，離心速率在5000r/min以上，通過離心使有機(jī)相和水相的分層更加明顯，由于樣品的勻漿提取、鹽析、離心分層三個(gè)步驟都在離心管中完成，與標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)相比，前處理步驟節(jié)省了時(shí)間，提高了提取的效率。