高雪冬 顧鑫 楊曉賀 張茂明 姚亮亮 劉偉 孟慶英 邱磊 朱寶國

摘要：拮抗細(xì)菌對防治水稻紋枯病具有重要作用。本文分析了水稻紋枯病拮抗細(xì)菌的試驗方法，并且獲得了具有實際效果的結(jié)論，以期為相關(guān)人員提供參考性建議，進(jìn)一步加強(qiáng)對水稻紋枯病拮抗細(xì)菌理解，對其進(jìn)行合理利用，從而有效防治水稻紋枯病，實現(xiàn)水稻的高產(chǎn)。

關(guān)鍵詞：水稻紋枯病;拮抗細(xì)菌;試驗方法

1 ?水稻紋枯病拮抗細(xì)菌的評價

在水稻種植過程中，由于受到立枯絲核菌的危害，導(dǎo)致產(chǎn)生了水稻紋枯病，從世界分布的情況來看，我國水稻危害較為嚴(yán)重，嚴(yán)重降低了水稻的品質(zhì)，若是病原菌擴(kuò)散較為嚴(yán)重時，還會導(dǎo)致絕收的現(xiàn)象。立枯絲核菌在土壤中越冬時，主要以菌核和菌絲的形態(tài)展現(xiàn)，若是具有良好的濕度與溫度，將會導(dǎo)致細(xì)菌大量生長，產(chǎn)生較大的危害。同時，在水稻種植過程中基本上都會使用氮肥，若是過量使用，將會降低水稻的抗病性，從而增加了產(chǎn)生紋枯病的可能性，甚至造成大面積的爆發(fā)。經(jīng)過研究人員的不懈努力，發(fā)現(xiàn)拮抗微生物可以有效防治病害的發(fā)生，其中包括放線菌、拮抗細(xì)菌、拮抗真菌等，目前，較為常見的是芽孢桿菌等生防菌，其中提取的抗生素與葡聚糖酶可以降解細(xì)胞壁，有效控制真菌細(xì)胞中病害的發(fā)生，基于此，當(dāng)前植物病害的主要防治方向是對抑制病原菌進(jìn)行篩選，為植物的生長提供有利環(huán)境[1]。

2 ?水稻紋枯病拮抗細(xì)菌的試驗方法

2.1 ?試驗方法

在B-916的試驗中，主要包括以下幾點：

首先，分離與篩選拮抗細(xì)菌。研究人員需要選擇不同的土壤標(biāo)樣，在90ml的無菌水中，放入10g左右的土樣，將其攪拌均勻后，用水進(jìn)行稀釋，在YPJA平板上滴入0.5ml溶液，同時，需要保持培養(yǎng)的溫度，大概在25℃左右，等待1天后，就可以獲得單菌落。在稻田土中，需要埋入紋枯菌，放置三個月左右再取出，使用無菌水將其多次沖洗，之后放置在YPJA平板上，菌核經(jīng)過兩天的培養(yǎng)后，可以分離出其中的細(xì)菌。將菌株分布在平板上的對角點，之后將紋枯菌菌塊移入平板中央，在25℃的環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)，在此過程中需要仔細(xì)觀察是否出現(xiàn)抑菌帶。

其次，進(jìn)行稻種細(xì)菌化試驗。在稻殼與稻節(jié)的培養(yǎng)基上，需要移植紋枯菌，在25℃的環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)，大概半個月左右，將土壤放入培養(yǎng)基中，從而獲得帶菌土。在懸浮液中，需要含有10個拮抗細(xì)菌，才能浸泡經(jīng)過無菌處理的稻種，之后將種子種在土壤中。在誘發(fā)紋枯病時，可以采用噴霧方法，經(jīng)過兩周后，需要抽查20株的稻苗，可以準(zhǔn)確判讀紋枯病的發(fā)病情況。

再次，進(jìn)行噴霧盆栽試驗。在水稻成株期時，需要接種紋枯菌，將水稻品種金剛30播種在土壤中，每穴需要接種50g稻節(jié)培養(yǎng)基，還要確保其中帶有紋枯菌。之后需要噴霧處理細(xì)菌懸浮液，每個步驟都要進(jìn)行反復(fù)處理，等待15天后，就可以獲得檢測結(jié)果。

最后，進(jìn)行田間小區(qū)試驗。研究人員需要將種子浸泡在拮抗細(xì)菌中，之后播種育秧盤中，在田間小區(qū)中進(jìn)行秧苗移栽，使用土埂進(jìn)行隔離。在水肥管理的過程中，主要采用常規(guī)的栽培方式，在調(diào)查田間情況時，可以從第三行開始查看，每行查2穴，對于發(fā)病較為嚴(yán)重的區(qū)域，一般使用病斑高率進(jìn)行表示，為了測試實際產(chǎn)量，需要確保稻谷進(jìn)行單獨脫粒，并且多次重復(fù)處理步驟[2]。

2.2 ?試驗結(jié)論

在研究領(lǐng)域中，植物病害是重要研究話題之一，通過使用拮抗細(xì)菌，可以對病害起到良好的防治效果，充分發(fā)揮病原菌的拮抗作用，而且沒有副作用，具有良好的經(jīng)濟(jì)價值，目前，被廣泛用于紋枯病的防治中。在水稻紋枯病的試驗中，可以證明B-916不會對當(dāng)?shù)丨h(huán)境產(chǎn)生污染，而且沒有任何不良影響，具有良好的生態(tài)效益與社會效益。從研究中可以發(fā)現(xiàn)，大量有益微生物包含在土壤中，經(jīng)過分離作用獲得的菌株，具有良好的拮抗能力，其中從菌核上分離的拮抗能力較強(qiáng)，而從菌核周圍分離的拮抗能力較弱，由此可知，拮抗細(xì)菌可能會受到某些物質(zhì)的吸引，從而聚集在菌核周圍，若是想要獲得拮抗能力強(qiáng)的菌株，需要在稻田土中埋入菌核，經(jīng)過一段時間后在進(jìn)行分離，以此可以增強(qiáng)菌株的拮抗能力。

在使用B-916發(fā)酵液時，需要注重氣候條件、品種成熟期、氮肥水平等環(huán)境因素，在8月底水稻正處于較為敏感的時期，難以在植株上定殖拮抗菌B-916，因此，需要使用新復(fù)配劑，其中包含了井岡霉素和B-916發(fā)酵液，突出了作用快的特點，還可以降低病原菌的活力，為順利定殖拮抗菌提供保障，使其具有安全的成長期，有利于種群數(shù)量的積累，為綠色防控奠定堅實基礎(chǔ)，同時，可以最大化發(fā)揮防治效果，盡量減少水稻紋枯病的危害。

3 ?結(jié)論

綜上所述，接抗菌B-916具有良好的適應(yīng)能力，其生長速度快，拮抗譜廣，可以產(chǎn)生抗生素，有效防治水稻紋枯病。同時，還可以輔助使用殺蟲劑和井岡霉素等殺菌劑，不但不會對生物活性產(chǎn)生影響，而且有利于充分發(fā)揮防治作用。

參考文獻(xiàn)

[1] 俞寅達(dá)，孫婳珺，夏志輝.水稻紋枯病生物防控研究進(jìn)展[J].分子植物育種，2019，17（2）：600-605.

[2] 張清霞，張迎，何玲玲，等.水稻紋枯病拮抗細(xì)菌7-5的鑒定及其生防機(jī)制初步研究[J].中國水稻科學(xué)，2018，154（3）：73-80.