楊秀珍，張曉文，劉燕子，潘文杰

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 新鄉(xiāng) 453003)

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是一種雙鏈閉環(huán)DNA病毒，是宮頸相關(guān)病變的主要致病因素，可導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變，引發(fā)宮頸癌[1]。HPV有多種基因亞型，目前已分離出150多種，根據(jù)與宮頸癌的相關(guān)性可分為低危型和高危型，低危型HPV能導(dǎo)致生殖器疣，高危型HPV持續(xù)性感染具有發(fā)展為宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)[2]。高危HPV持續(xù)性感染原因尚不明確，但有研究報(bào)道其感染力因病毒型別而異，其中HPV16和HPV18已被認(rèn)為是最具高危的2種HPV亞型，因此，認(rèn)為HPV持續(xù)性感染可能與其基因型有關(guān)[3]。另外，患者的年齡、機(jī)體免疫力、所在地區(qū)等也是導(dǎo)致HPV感染的原因，了解HPV感染的危險(xiǎn)因素并加以預(yù)防是降低HPV感染率的關(guān)鍵[4]。本研究對(duì)856例疑似HPV感染的婦女的23種HPV基因分型進(jìn)行檢測(cè)，了解其感染及亞型分布情況，并分析影響感染的相關(guān)因素，為降低HPV感染及其治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2017年6月至2020年6月在新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科就診的疑似HPV感染的婦女856例為研究對(duì)象?；颊吣挲g20～65(41.29±3.09)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)已婚，有性生活史；(2)年齡20～65歲；(3)近6個(gè)月無(wú)激素治療史；(4)就診前3 d未進(jìn)行陰道沖洗，檢查前1 d無(wú)性生活史。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有盆腔放射治療史、子宮切除史及宮頸癌患者；(2)妊娠期或哺乳期女性；(3)合并嚴(yán)重意識(shí)或認(rèn)知障礙者。本研究獲醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，患者均知情同意并簽訂知情同意書。

1.2 試劑與儀器23種HPV基因分型檢測(cè)試劑由潮州凱普生物化學(xué)有限公司提供，共檢測(cè)23種HPV基因亞型，其中包括16種高危型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、53、73)和7種低危型(6、11、42、43、44、81、82)；TL-988 聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)擴(kuò)增儀購(gòu)自西安天隆科技有限公司。

1.3 HPV基因分型檢測(cè)方法所有受試者行HPV分型檢測(cè)，具體步驟：先拭去宮頸口分泌物，隨后用宮頸刷在宮頸外口部位順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈，將刷取的標(biāo)本與宮頸刷一起置入細(xì)胞保存液中，及時(shí)送檢。采用多重PCR技術(shù)，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR儀，將23種HPV基因亞型和1個(gè)內(nèi)對(duì)照分為6個(gè)反應(yīng)管，通過(guò)PCR儀4種熒光檢測(cè)通道，對(duì)采集的宮頸分泌物樣本進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)。

1.4 觀察指標(biāo)(1)分析23種HPV基因分型檢測(cè)結(jié)果；(2)收集受試者年齡、生活方式、首次性生活及妊娠年齡、流產(chǎn)次數(shù)、絕經(jīng)情況、HPV感染季節(jié)分布、宮頸癌家族史、婦科疾病史等相關(guān)資料。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行HPV感染危險(xiǎn)因素單因素分析，logistic回歸分析法進(jìn)行HPV感染危險(xiǎn)因素多因素分析；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 23種HPV基因分型結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表1。856例患者中，360例(42.06%)HPV基因分型陽(yáng)性，其中低危型HPV陽(yáng)性52例(6.08%)，高危型HPV陽(yáng)性308例(35.98%)。23種HPV基因型中16種檢出陽(yáng)性，其中高危型HPV 10種，以HPV16、HPV58、HPV52占比較高(分別為8.88%、7.48%、6.19%)；低危型HPV 6種，以HPV6、HPV42、HPV43占比較高(分別為1.75%、1.40%、1.17%)。

表1 16種HPV基因型陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果

2.2 HPV感染危險(xiǎn)因素單因素分析結(jié)果見(jiàn)表2。患者年齡、生活方式、首次性生活年齡、首次妊娠年齡、是否絕經(jīng)、宮頸癌家族史及流產(chǎn)次數(shù)與HPV感染有關(guān)(P<0.05)；婦科疾病史和患者就診季節(jié)分布與HPV感染無(wú)關(guān)(P>0.05)。

表2 HPV感染危險(xiǎn)因素單因素分析

2.3 HPV感染危險(xiǎn)因素多因素logistic回歸分析結(jié)果見(jiàn)表3。多因素logistic回歸分析結(jié)果顯示，首次性生活年齡<23歲、有宮頸癌家族史及流產(chǎn)次數(shù)>2次是HPV感染的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。

表3 HPV感染危險(xiǎn)因素多因素logistic回歸分析

3 討論

HPV是一種具有種屬特異性的嗜上皮病毒，能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖，進(jìn)而對(duì)其造成增殖性損傷。宮頸癌是女性腫瘤疾病中發(fā)病率極高的惡性腫瘤。研究證明，HPV病毒與宮頸癌存在緊密聯(lián)系，HPV感染是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的致病條件之一[5]。大部分女性有感染HPV的經(jīng)歷，當(dāng)機(jī)體免疫力正常時(shí)，HPV病毒能夠被自身免疫系統(tǒng)清除，但感染事件長(zhǎng)達(dá)2 a以上時(shí)，則會(huì)發(fā)展為HPV持續(xù)感染，對(duì)人體的危害性將進(jìn)一步增大，病毒清除及治療難度也隨之加大[6]。HPV有高危型和低危型2種，研究表明，HPV的致病力與其病毒型別存在較大關(guān)系，宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌均由高危型HPV持續(xù)感染所致[7]。因此，了解HPV病毒分型并進(jìn)行篩查，同時(shí)分析其感染的危險(xiǎn)因素，對(duì)預(yù)防HPV感染及病毒清除有重要意義。

近年來(lái)，隨著宮頸癌篩查技術(shù)的不斷進(jìn)步，使以HPV為基礎(chǔ)的浸潤(rùn)性宮頸癌發(fā)生率及宮頸癌病死率得到一定控制。目前，關(guān)于HPV的檢測(cè)方法較多，按檢測(cè)結(jié)果可分為定量檢測(cè)和分型檢測(cè)。定量檢測(cè)可一次針對(duì)13種高危型HPV病毒進(jìn)行檢測(cè)，相比單獨(dú)檢測(cè)1種或幾種HPV的方法更加可靠，缺點(diǎn)是不能具體分辨HPV的型別，對(duì)于主要引起尖銳濕疣的HPV6、HPV11等低危型HPV則無(wú)法檢測(cè)；HPV分型檢測(cè)能分辨出患者感染的HPV型別是否為宮頸癌高風(fēng)險(xiǎn)型別，有助于配合液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行下一步分流[8]。本研究采用多重PCR技術(shù)對(duì)856例受試者進(jìn)行23種HPV基因分型檢測(cè)，結(jié)果顯示，360例(42.06%)患者呈陽(yáng)性，其中低危型HPV陽(yáng)性52例(6.08%)，高危型HPV陽(yáng)性308例(35.98%)，高危型HPV檢出率較低危型高；高危型HPV中位居前3位的HPV分型分別為HPV16(8.88%)、HPV58(7.48%)、HPV52(6.19%)，低危型HPV中HPV6、HPV42、HPV43占比較高(分別為1.75%、1.40%、1.17%)。高危型HPV感染在臨床上往往沒(méi)有任何癥狀，但能引起宮頸上皮病變，甚至發(fā)展成宮頸癌[9]。國(guó)內(nèi)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，HPV58是HPV發(fā)病率位居前3的高危型HPV之一[10]，本研究結(jié)果與之相符。HPV感染受不同地區(qū)、不同環(huán)境、生活方式及性生活相關(guān)因素等諸多因素影響，因?yàn)镠PV病毒主要通過(guò)性傳播，故初次性生活年齡、避孕措施、性生活習(xí)慣等是其重要危險(xiǎn)因素；另外，合并生殖道其他感染也會(huì)增加HPV感染風(fēng)險(xiǎn)[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，不同年齡、首次妊娠年齡及首次性生活年齡受試者HPV感染率存在顯著差異，經(jīng)常熬夜或被動(dòng)吸煙、未絕經(jīng)、有宮頸癌家族史及流產(chǎn)次數(shù)>2次的受試者HPV感染率顯著高于幾乎不吸煙或熬夜、已絕經(jīng)、無(wú)宮頸癌家族史及流產(chǎn)次數(shù)≤2次的受試者，而是否有婦科疾病史及不同季節(jié)感染分布的受試者間HPV感染率無(wú)顯著差異，提示年齡、過(guò)早受孕、過(guò)早開始性生活、流產(chǎn)次數(shù)及宮頸癌史等與HPV感染存在一定聯(lián)系。有研究顯示，HPV感染率隨著年齡增長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，年齡>50歲的女性HPV感染率略有下降，分析原因，可能是年齡<50歲的女性生活及工作壓力較大，另外，該年齡段女性性生活較活躍，導(dǎo)致HPV 感染風(fēng)險(xiǎn)增加[12]。吸煙者HPV感染率高的原因主要與吸煙導(dǎo)致人體抑癌基因突變有關(guān)；熬夜等不良生活習(xí)慣會(huì)降低機(jī)體免疫力，體內(nèi)激素調(diào)節(jié)發(fā)生紊亂，從而增加HPV感染風(fēng)險(xiǎn)[13]。過(guò)早性生活及過(guò)早妊娠的女性HPV感染率增高，分析原因可能是因?yàn)樵撃挲g段女性生殖道免疫功能薄弱，宮頸未發(fā)育完全，且對(duì)物理及生化性作用敏感，容易引起宮頸黏膜病變[14]。經(jīng)logistic多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，首次性生活年齡<23歲、有宮頸癌家族史及流產(chǎn)次數(shù)>2次是HPV感染的危險(xiǎn)因素，因此，應(yīng)該避免過(guò)早開始性生活，做好流產(chǎn)防御措施，早期進(jìn)行疾病篩查，以降低HPV感染率。

綜上，本研究中856例行HPV基因分型檢測(cè)的婦女的HPV感染率為42.06%，以HPV16、HPV58、HPV52為主的高危型HPV感染率最高。HPV感染主要與過(guò)早開始性生活、流產(chǎn)次數(shù)及宮頸癌家族史等因素有關(guān)。