許秋月，張?jiān)姾?，劉紅娟

(安徽省兒童醫(yī)院臨床檢驗(yàn)科，合肥 230051)

呼吸道感染性疾病是威脅國(guó)內(nèi)外兒童健康的重要感染性疾病之一，特別是病毒源性感染[1]。目前，呼吸道病原體檢測(cè)方法包括三聯(lián)檢、五聯(lián)檢、九聯(lián)檢、十三聯(lián)檢等，包含的病毒有呼吸道合胞病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒Ⅰ～Ⅲ型。其中，人類流行性感冒病毒備受關(guān)注[2-3]。流感病毒抗體檢測(cè)和抗原檢測(cè)是檢驗(yàn)科常見的檢驗(yàn)項(xiàng)目。其中檢測(cè)最多的為甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原或兩者的核酸檢測(cè)，甲型流感病毒抗原在臨床檢測(cè)中亞型較多，在世界范圍內(nèi)陸續(xù)出現(xiàn)H1N1、H3N2、H5N1、H7N9等不同亞型，均引發(fā)不同程度的流行[4-5]。在甲型流感病原體診斷的選擇上，甲型流感病毒抗原檢測(cè)因快速、便捷成為臨床感染科醫(yī)師診療的首選。同時(shí)，甲型流感每年在兒童中的陽(yáng)性率、流行季節(jié)、男女性別差異以及客觀指標(biāo)[如血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A protein，SAA)]的特點(diǎn)，也可為臨床醫(yī)師診療提供指導(dǎo)。本研究旨在分析2018—2020年兒童甲型流感病毒感染的臨床規(guī)律。

1 資料與方法

1.1樣本來源 選取2018年1月至2020年12月安徽省兒童醫(yī)院收治的3 882例呼吸道感染患兒的檢測(cè)樣本，均送檢甲型流感病毒抗原檢測(cè)，其中2018、2019和2020年患兒分別為633例、2 777例和472例。全國(guó)流感樣病例中甲型流感病毒檢出情況資料來源于世界衛(wèi)生組織維護(hù)的全球流感監(jiān)測(cè)系統(tǒng)FluNet數(shù)據(jù)庫(kù)[6]。

1.2樣本采集及檢測(cè) 在應(yīng)用抗菌藥物前，采集患兒外周靜脈血2.0～4.0 mL，以離心半徑10 cm、1 500 r/min離心5 min，分離血清。采用膠體金法，使用萬孚甲型流感病毒抗原檢測(cè)試劑盒(廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：W05990703)檢測(cè)甲型流感病毒抗原，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。人SAA采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自重慶中元生物技術(shù)有限公司(批號(hào)：201201)。

1.3觀察指標(biāo) ①不同性別、年齡患兒的甲型流感病毒感染情況。②不同年度、季節(jié)患兒的甲型流感病毒感染情況。③安徽省兒童醫(yī)院和全國(guó)不同年度、不同季節(jié)甲型流感病毒檢出率比較。④甲型流感病毒抗原陽(yáng)性和陰性患兒的SAA值比較。

2 結(jié) 果

2.1一般情況 3 882例呼吸道感染患兒中，男2 415例、女1 463例，未知性別4例；年齡1 d至16歲，中位年齡2.5歲。其中0～≤1歲812例、>1～3歲1 489例、>3～5歲757例和>5歲824例。所有樣本中甲型流感病毒病原檢測(cè)結(jié)果為陰性3 667例、陽(yáng)性215例，陽(yáng)性檢出率為5.54%，低于全國(guó)同期流感樣病例中甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率[8.05%(160 315/1 991 177)]。

2.2不同性別、年齡患兒甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率及SAA檢測(cè)值的比較 男性患兒甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率高于女性患兒[6.25%(151/2 415)比4.37%(64/1 463)](χ2=6.136，P=0.013)。0～1歲組甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率為5.17%(42/812)，>1～3歲組為5.24%(78/1 489)，>3～5歲組為6.47%(49/757)，>5歲組為5.58%(46/824)，各年齡組陽(yáng)性檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.732，P=0.630)。

在215例陽(yáng)性患兒中，選取14例甲型流感病毒抗原陽(yáng)性患兒同時(shí)檢測(cè)SAA，選取同一時(shí)間段的67例甲型流感病毒抗原陰性患兒作為對(duì)照。結(jié)果顯示，甲型流感病毒抗原陽(yáng)性患兒的SAA值高于陰性患兒[(132±22) mg/L比(92±8) mg/L](t=2.056，P=0.034)。

2.3不同年度、季節(jié)甲型流感病毒檢出率比較 2018年甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率為2.53%(16/633)，2019年為6.30%(175/2 777)，2020年5.08%(24/472)，各年度甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.251，P<0.001)。

春季甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率為7.44%(125/1 680)，夏季為3.42%(38/1 110)，秋季為3.88%(16/412)，冬季為5.29%(36/680)，不同季節(jié)甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.346，P<0.01)。

2.4不同年度、季節(jié)甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率與全國(guó)平均水平比較 根據(jù)世界衛(wèi)生組織的FluNet數(shù)據(jù)，2018、2019、2020年全國(guó)流感樣病例中甲型流感病毒的陽(yáng)性檢出率分別為6.64%(47 110/710 007)、12.54%(90 743/723 622)和4.03%(22 462/557 548)。根據(jù)貝葉斯后驗(yàn)估計(jì)結(jié)果，2018年全國(guó)甲型流感病毒的陽(yáng)性檢出率為安徽省兒童醫(yī)院的2.43倍(95%CI1.59～3.71)，2019年為2.01倍(95%CI1.75～2.32)，2020年為0.82倍(95%CI0.57～1.18)，見圖1。

2018年春季、2018年冬季、2019年春季、2019年冬季、2020年春季全國(guó)流感樣病例中甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率顯著高于安徽省兒童醫(yī)院患兒，見表1。從2020年夏季開始，全國(guó)流感樣病例中甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率極低；而同期安徽省兒童醫(yī)院甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率為0，貝葉斯后驗(yàn)估計(jì)其RR在0附近，見圖2。

圖1 不同年度安徽省兒童醫(yī)院甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率與全國(guó)平均水平比較

表1 不同年度、季節(jié)安徽省兒童醫(yī)院甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率與全國(guó)平均水平比較

圖2 不同年度、季節(jié)安徽省兒童醫(yī)院甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率與全國(guó)比較

3 討 論

近年來，急性呼吸道感染已成為國(guó)內(nèi)外兒童重要的感染性疾病之一，占兒童各類疾病發(fā)病率的首位，其多發(fā)于秋冬季節(jié)，嚴(yán)重時(shí)可威脅兒童的生命健康。兒童呼吸道感染源主要有細(xì)菌、真菌、病毒、支原體、衣原體等。目前對(duì)于呼吸道感染的治療方案是快速、準(zhǔn)確的診斷并給予及時(shí)適當(dāng)?shù)闹委煟虼丝焖贉?zhǔn)確地檢測(cè)出呼吸道病原體對(duì)于早期治療具有重要意義。但有文獻(xiàn)報(bào)道，呼吸道感染與患者所在地域、氣候甚至年齡有一定關(guān)系，其感染病原體也存在一定差異[7]。目前，對(duì)于兒童呼吸道感染的檢測(cè)方法較多，一般多采用血清特異性抗體檢測(cè)，包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和間接免疫熒光法，由于患兒的年齡、病程、敏感性、免疫狀態(tài)存在差異，易造成檢驗(yàn)的假陽(yáng)性，故對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性造成一定影響[8]。因此加強(qiáng)對(duì)人群，特別是兒童流感病毒的檢測(cè)和監(jiān)測(cè)具有重要意義。

在流感病毒中，甲型流感病毒變異性最強(qiáng)，極易造成大范圍的流行，特別是2009年3月新出現(xiàn)的甲型H1N1流感病毒曾引發(fā)了全球暴發(fā)流行[9]，甲型流感病毒基因中抗原決定簇的變化是甲型流感病毒變異的主要原因之一。甲型流感病毒毒力較乙型流感病毒更強(qiáng)，是更易引起大流行的病毒之一[ 10]。在病毒治療上，抗流感高免疫靜脈注射免疫球蛋白和奧司他韋共同使用對(duì)流感患者有較好的治療效果，而單獨(dú)使用抗流感高免疫靜脈注射免疫球蛋白只對(duì)乙型流感有效[11]。在感染指標(biāo)上，H7N9感染患者的感染指標(biāo)水平與預(yù)后有關(guān)[12]。本研究結(jié)果顯示，甲型流感病毒抗原陽(yáng)性患兒的SAA檢測(cè)值高于陰性患兒，說明SAA有助于甲型流感病毒感染的診斷。與謝尹晶等[13]研究結(jié)果一致。另外，呼吸道感染患兒中甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率為5.54%，低于全國(guó)同期流感樣病例中甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率(8.05%)；但甲型流感病毒抗原陰性的患者仍有假陰性的可能，需進(jìn)一步進(jìn)行核酸檢測(cè)[14]。這也說明了甲型流感病毒是導(dǎo)致兒童呼吸道疾病負(fù)擔(dān)增加的重要病因。本研究中，男性患兒的陽(yáng)性檢出率高于女性患兒(P<0.05)，說明要加強(qiáng)對(duì)安徽地區(qū)男性患兒甲型流感病毒的感染預(yù)防及早期檢查[15]。同時(shí)本研究結(jié)果顯示，各年齡組陽(yáng)性檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與甲型流感抗體檢測(cè)相比，甲型流感病毒抗原和SAA的檢測(cè)可用于早期病毒的診斷[16]。可見，有效的呼吸道感染性疾病病原監(jiān)測(cè)和檢測(cè)方法，可為預(yù)防和控制傳染病性疾病在人群中流行以及制訂合理的臨床診治方案提供可靠的依據(jù)。

我國(guó)不同地區(qū)流行性感冒病毒流行呈現(xiàn)不同的季節(jié)性特點(diǎn)，即溫帶地區(qū)流行高峰為每年的秋冬季，而熱帶和亞熱帶地區(qū)通常在夏季和秋冬季出現(xiàn)兩個(gè)流行高峰[17]。本研究結(jié)果顯示，2018年春季、2018年冬季、2019年春季、2019年冬季、2020年春季全國(guó)流感樣病例中甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率顯著高于安徽省兒童醫(yī)院患兒，尤其在氣溫最低的春季，其陽(yáng)性檢出率最高，符合溫帶氣候帶的流行特點(diǎn)，與袁沖等[18]報(bào)道的北方流行季節(jié)、月份一致。因此，可根據(jù)甲型流感病毒流行高峰的季節(jié)分布和時(shí)間分布特點(diǎn)，采取針對(duì)性防控措施或靈活調(diào)整診治方案。同時(shí)本研究中在2020年春季后，全國(guó)和安徽省兒童醫(yī)院的甲型流感病毒檢測(cè)結(jié)果發(fā)生顯著變化，其中安徽省兒童醫(yī)院在2020年3月后未再檢測(cè)到甲型流感病毒感染新發(fā)病例，而全國(guó)夏秋冬3個(gè)季節(jié)的陽(yáng)性檢出率極低。推測(cè)可能受到疫情防控措施影響所致[19]。因此，快速抗原檢測(cè)也是發(fā)熱類患者的常見適用方法[20]。由于各地廣泛采取了隔離、戴口罩、增加社交距離、減少人口流動(dòng)等防護(hù)措施，大大減少了通過空氣、飛沫和接觸等途徑傳播的傳染病在人群中傳播，故大大降低了甲型流感流行率[21]。這不僅為未來控制通過呼吸道傳播的新發(fā)傳染病的防控提供了寶貴經(jīng)驗(yàn)，也可能會(huì)改變未來一段時(shí)間內(nèi)的呼吸道傳染病流行趨勢(shì)。

綜上可知，男性患兒的患病率高于女性患兒、具有明顯的季節(jié)性，且安徽省甲型流感病毒陽(yáng)性檢出率低于全國(guó)平均水平。這對(duì)于臨床醫(yī)師診斷甲型流感有一定幫助，未來應(yīng)對(duì)甲型流感病毒不同亞型在兒童中的流行規(guī)律進(jìn)行深入研究。