陳琳，梁彩文，龍麗娜

廣州市增城區(qū)人民醫(yī)院兒科，廣東 廣州 511300

川崎病是兒科常見疾病，其病理改變以全身性血管炎為主，好發(fā)于嬰幼兒時期，且男多于女，是誘導(dǎo)兒童后天性心臟病或冠狀動脈病變的主要原因之一[1]。資料表明，川崎病可累及全身中小動脈，其中冠狀動脈損傷最嚴(yán)重，若不及時干預(yù)，可造成因及梗死、猝死，危及患兒生命安全[2]。目前，關(guān)于川崎病的發(fā)病機(jī)制尚未明確，為此，早期診預(yù)測和診斷川崎病冠狀動脈損傷以及腎損失冠狀動脈分子標(biāo)志物成為臨床醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)。有研究顯示，多種炎癥因子參與了川崎病的發(fā)生及發(fā)展，尤其是Th1/Th2失衡是導(dǎo)致疾病發(fā)展的重要因素[3]。血清腦利鈉肽(BNP)是由心肌細(xì)胞所產(chǎn)生的肽類激素，其水平表達(dá)與心室壓力、心肌功能密切先關(guān)，是判斷心力衰竭敏感性較高的指標(biāo)[4]。心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)屬于一種可溶性細(xì)胞質(zhì)蛋白，集中存在于心肌組織之中，能夠反映心肌損傷情況[5]。本研究通過觀察川崎病患兒的血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C 反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞介素-17 (IL-17)、BNP、h-FABP 的表達(dá)水平，分析TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP與冠狀動脈損傷的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年11 月至2019 年11月廣州市增城區(qū)人民醫(yī)院兒科確診的30 例川崎病患兒作為研究對象(觀察組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《兒科學(xué)》[6]中川崎病相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②病程＜10 d；③均未接受丙種球蛋白及激素治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有肝、腎、肺等功能障礙者；②患有感染性疾病或全身血管炎性疾病者；③合并惡性腫瘤疾病或遺傳代謝疾病者；④合并心肌炎、心力衰竭或骨骼肌損傷性疾病者。根據(jù)患兒冠狀動脈損傷情況分為損傷組17 例和無損傷組13 例。同期選擇來本院體檢的健康兒童30 例作為對照組。觀察組中男性17例，女性13例；年齡1～4歲，平均(2.41±0.51)歲。對照組中男性19 例，女性11 例；年齡1～4 歲，平均(2.39±0.49)歲。兩組受檢兒童的性別和年齡比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有受檢兒童家長均知情并簽署同意書。

1.2 冠狀動脈損傷的檢查方法與判定標(biāo)準(zhǔn)[7]川崎病患兒于病程10～15 d應(yīng)用彩色多普勒超聲儀(生產(chǎn)廠家：規(guī)格：荷蘭飛利浦公司；型號：EPIQ5)檢查冠狀動脈，觀察左右動脈內(nèi)徑以及管徑、壁是是否出現(xiàn)結(jié)構(gòu)異常。若內(nèi)膜回聲增強(qiáng)，冠狀動脈內(nèi)徑3歲內(nèi)≥2.5 mm或3歲以上≥3.0 mm為冠狀動脈損傷。

1.3 觀察指標(biāo)與檢測方法 (1)比較兩組受檢兒童腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C 反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞介素-17 (IL-17)、BNP、h-FABP 表達(dá)水平。采集所有受檢兒童空腹靜脈血5 mL，低溫放置30 min 后以2 500 r/min 的速度離心(r=4 cm)處理10 min 后分離血清，保存于-20℃冰箱中待測。采用全自動電化學(xué)發(fā)光法(生產(chǎn)廠家：美國雅培公司)檢測BNP水平，采用免疫比濁法(生產(chǎn)廠家：浙江興宏生化公司)測定h-FABP水平；采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法(生產(chǎn)廠家：深圳晶美有限公司)測定CRP、IL-17、TNF-α水平，檢測步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。(2)比較損傷組和無損傷組兒童血清炎癥因子、BNP、h-FABP 水平。(3)分析TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP與冠狀動脈損傷的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較采用t檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)性分析法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢兒童的血清炎癥因子、BNP、h-FABP 水平比較 觀察組患兒的TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP 表達(dá)水平明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組受檢兒童血清炎癥因子、BNP、h-FABP水平比較()

表1 兩組受檢兒童血清炎癥因子、BNP、h-FABP水平比較()

2.2 損傷組和無損傷組兒童血清炎癥因子、BNP、h-FABP 水平比較 損傷組患兒的TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP 表達(dá)水平明顯高于無損傷組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 損傷組和無損傷組兒童血清炎癥因子、BNP、h-FABP水平比較()

表2 損傷組和無損傷組兒童血清炎癥因子、BNP、h-FABP水平比較()

2.3 血清炎癥因子、BNP、h-FABP表達(dá)與冠狀動脈損傷的關(guān)系 川崎病患兒血清TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP 表達(dá)水平與冠狀動脈損傷均呈明顯正相關(guān)(P＜0.05)，見表3。

表3 血清炎癥因子、BNP、h-FABP表達(dá)水平與冠狀動脈損傷的關(guān)系()

表3 血清炎癥因子、BNP、h-FABP表達(dá)水平與冠狀動脈損傷的關(guān)系()

3 討論

川崎病為急性全身性血管炎疾病，發(fā)熱、眼結(jié)膜充血、皮膚黏膜損傷是其主要癥狀，被認(rèn)為是誘導(dǎo)兒童獲取性心臟病發(fā)病的主要因素[8]。近年來，川崎病患兒逐年增多，因早期臨床癥狀并不顯著，易出現(xiàn)漏診、誤診，錯過最佳治療時間，從而增加冠狀動脈并發(fā)癥的發(fā)生率。資料表明，川崎病可累及多系統(tǒng)損傷，其中以冠狀動脈損傷最為嚴(yán)重和普遍[9]。因此，探索一種安全、有效的檢測方式已成為臨床研究的熱點(diǎn)課題。

資料表明，川崎病屬于一種免疫紊亂性疾病，較多研究者對其進(jìn)行了分析探討，但血清炎癥因子在其中的變化與作用報道不一[10]。IL-17是由Th17細(xì)胞產(chǎn)生的主要細(xì)胞因子之一，對T 細(xì)胞激活、刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞因子具有促進(jìn)作用，從而導(dǎo)致炎癥產(chǎn)生[11]。IL-17在促進(jìn)中性粒細(xì)胞活化的同時，亦可刺激單個核細(xì)胞、纖維母細(xì)胞產(chǎn)生大量炎癥因子，例如：CRP、TNF-α等，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致組織損傷加重[12]。TNF-α由多種免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生，如NK細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等，是一種具有廣泛生物活性的多肽調(diào)節(jié)因子，參與了機(jī)體組織的多種炎性反應(yīng)[13]。MEYER等[14]研究指出，TNF-α作為促炎因子，貫穿川崎病炎癥、免疫反應(yīng)發(fā)展的始終，與機(jī)體炎癥反應(yīng)密不可分。CRP為急性時相蛋白，由活化的巨噬細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子誘導(dǎo)肝細(xì)胞所致，其表達(dá)與炎性反應(yīng)程度密切相關(guān)[15]。本研究表明，川崎病患兒的CRP、IL-17 及TNF-α表達(dá)水平均明顯高于健康兒童，且冠狀動脈損傷組患兒的CRP、IL-17 及TNF-α表達(dá)水平明顯高于無損傷患兒，表明川崎病患兒的CRP、IL-17及TNF-α水平顯著升高，且與冠狀動脈損傷密切相關(guān)。

BNP為心臟內(nèi)分泌激素，有利尿、排鈉的作用，是評估心肌損傷及預(yù)測心力衰竭的敏感性指標(biāo)，當(dāng)心臟容量負(fù)荷或壓力負(fù)荷增大時，可刺激心室肌細(xì)胞的B型利鈉肽原前體基因轉(zhuǎn)錄，從而生成新的mRNA并在短時間內(nèi)快速合成，經(jīng)心肌細(xì)胞加工后分裂進(jìn)入機(jī)體血液組織，最終形成BNP[16-17]。h-FABP與長鏈脂肪酸結(jié)合，能夠為心臟組織提供能量，滿足心臟組織所需的能量供給[18]。JYILMAZ 等[19]研究指出，h-FABP 通過完成其轉(zhuǎn)移運(yùn)輸過程后，進(jìn)入能量代謝體系氧化分解，為脂肪酸提供能量，使心肌細(xì)胞內(nèi)的h-FABP表達(dá)水平快速升高，促進(jìn)細(xì)胞膜釋放入血液組織中。本次研究對比分析了兩組受檢兒童BNP及h-FABP的表達(dá)水平。結(jié)果表明，川崎病患兒的BNP、h-FABP 表達(dá)水平明顯高于健康兒童。進(jìn)一步分析冠脈損傷和未損傷患兒的BNP、h-FABP 的表達(dá)水平，結(jié)果顯示冠脈損傷患兒的BNP、h-FABP 表達(dá)水平高于未損傷患兒，可見BNP、h-FABP 在川崎病患兒中明顯升高，且其水平表達(dá)與冠狀動脈損傷程度密切相關(guān)。

此外，本研究分析了川崎病患兒血清TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP 表達(dá)水平與冠狀動脈損傷的關(guān)系。相關(guān)性分析結(jié)果表明，上述指標(biāo)與冠狀動脈損傷呈顯著正相關(guān)。表明TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP表達(dá)水平能夠反映患兒的病情嚴(yán)重程度，同時也可作為冠狀動脈病變的早期生化標(biāo)志物。但本次研究所納入的樣本量較少，在今后的臨床研究中，臨床可擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步論證。

綜上所述，川崎病患兒的TNF-α、CRP、IL-17、BNP、h-FABP 表達(dá)水平明顯升高，且與冠狀動脈損傷呈正相關(guān)，密切監(jiān)測上述指標(biāo)變化有助于川崎病的早期診斷。