祝體紅 趙勇 許玉峰

依照病原體的不同，新生兒肺炎可分為細(xì)菌性肺炎、病毒性肺炎以及支原體肺炎等，不同感染類型治療方法及預(yù)后狀態(tài)均存在較大差異，因此加強(qiáng)病原微生物的鑒別對(duì)治療藥物的合理選擇具有重要參考價(jià)值［1］。細(xì)菌性肺炎發(fā)病率與死亡率均居于新生兒感染性疾病首位，炎癥細(xì)胞和因子可造成全身炎癥反應(yīng)綜合征，加重患兒病情［2］。細(xì)菌性肺炎臨床表現(xiàn)不典型，因此其臨床早期鑒別診斷也較為困難。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)全身性的細(xì)菌感染、系統(tǒng)炎性反應(yīng)綜合征等時(shí)，機(jī)體血液中的降鈣素原（Procalcitonin，PCT）濃度可出現(xiàn)異常升高［3］。α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1-AT）是血漿中最重要的蛋白酶抑制劑，其濃度變化和肝實(shí)質(zhì)損害以及肺組織酶解損傷關(guān)系密切［4］。高遷移率族蛋白B（High Mobility Group Box protein，HMGB1）參與多種疾病病理過(guò)程，可介導(dǎo)機(jī)體炎癥反應(yīng)［5］。本研究將比較細(xì)菌性肺炎與非細(xì)菌性肺炎新生兒血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平，分析三項(xiàng)指標(biāo)在新生兒細(xì)菌性肺炎的鑒別價(jià)值，旨在為疾病早期診斷提供參考，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2019年7月至2020年8月120 例感染性肺炎新生兒，根據(jù)血、痰培養(yǎng)和病毒學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果，分為細(xì)菌性肺炎組（n=52 例）與非細(xì)菌性肺炎組（n=68 例），非細(xì)菌性肺炎組又分為病毒性肺炎組（n=29 例）和支原體肺炎組（n=39 例）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》感染性肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；②病原檢測(cè)證實(shí)；③日齡≤28 d。排除標(biāo)準(zhǔn)：①入組前接受過(guò)抗生素等治療；②合并有其他感染性疾病，如血液系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)感染；③合并嚴(yán)重免疫低下或心腦血管疾病；④合并遺傳代謝性疾病、先天性畸形、先天性心臟病等；⑤合并其他肺部疾病，如肺結(jié)核、支氣管哮喘等；⑥近期使用免疫抑制劑、抗凝藥或激素等治療。另選取50 例作先天性疾病篩查的健康新生兒納入健康對(duì)照組。各組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，受試者監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書。

表1 一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 General data［n（%），（±s）］

表1 一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 General data［n（%），（±s）］

組別細(xì)菌性肺炎組病毒性肺炎組支原體肺炎組健康對(duì)照組χ2/F 值P 值n 52 29 39 50性別男30（57.69）18（62.07）24（61.54）29（58.00）0.263 0.967女22（42.31）11（37.93）15（38.46）21（42.00）胎齡（周）37.41±1.23 37.34±1.17 37.80±1.19 37.92±1.29 0.108 0.914出生體質(zhì)量（g）3214.99±410.15 3309.75±387.45 3198.83±409.81 3277.59±310.95 0.314 0.754日齡（d）15.75±2.97 15.81±2.46 15.49±2.18 15.80±2.99 0.177 0.838

1.2 方法

抽取所有研究對(duì)象4 mL 外周靜脈血，3 000 rpm 離心10 min，分離血清，于低溫下保存。血清PCT 檢測(cè)采用免疫熒光定量法，通過(guò)法國(guó)生物梅里埃公司Minividas 全自動(dòng)免疫熒光分析儀檢測(cè)。α1-AT 含量檢測(cè)采用免疫擴(kuò)散法，試劑由上海生物制品研究所提供。HMGB1 含量檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法，通過(guò)德國(guó)eppendorf 公司酶標(biāo)儀極其配套試劑盒檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F 檢驗(yàn)；通過(guò)受試者工作特征曲線（ROC 曲線）進(jìn)行診斷鑒別評(píng)估效能分析，以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別患兒PCT、α1-AT、HMGB1 水平比較

血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平：細(xì)菌肺炎組＞非細(xì)菌肺炎組＞健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同組別患兒PCT、α1-AT、HMGB1水平比較（±s）Table 2 Comparison of PCT，α1-AT and HMGB1 levels among different groups（±s）

表2 不同組別患兒PCT、α1-AT、HMGB1水平比較（±s）Table 2 Comparison of PCT，α1-AT and HMGB1 levels among different groups（±s）

注：與健康對(duì)照組比較，aP＜0.05；與非細(xì)菌性肺炎組比較，bP＜0.05。

組別細(xì)菌性肺炎組非細(xì)菌性肺炎組病毒性肺炎組支原體肺炎組健康對(duì)照組F 值P 值n 52 29 39 50 PCT（ng/mL）9.81±1.68ab 1.15±0.11a 1.09±0.13a 0.22±0.02 989.514＜0.001 α1-AT（g/L）4.52±0.43ab 3.54±0.34a 3.37±0.38a 1.95±0.17 613.881＜0.001 HMGB1（ng/mL）18.59±1.83ab 15.03±1.94a 14.29±1.22a 10.36±1.07 294.803＜0.001

2.2 血清PCT、α1-AT、HMGB1 診斷細(xì)菌性肺炎效能分析

PCT、α1-AT、HMGB1 聯(lián)合診斷細(xì)菌性肺炎R(shí)OC 曲線下面積為0.945，高于單獨(dú)檢測(cè)診斷值（P＜0.05）。見表3、圖1。

表3 ROC 曲線診斷Table 3 ROC curve

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

2.3 血清PCT、α1-AT、HMGB1 鑒別細(xì)菌性與非細(xì)菌性肺炎效能分析

PCT、α1-AT、HMGB1 聯(lián)合檢測(cè)鑒別細(xì)菌與非細(xì)菌性肺炎R(shí)OC 曲線下面積為0.908，高于單獨(dú)檢測(cè)診斷值（P＜0.05）。見表4，圖2。

表4 ROC 曲線診斷Table 4 ROC curve

圖2 ROC 曲線Figure 2 ROC curve

3 討論

早期診斷并合理使用抗生素對(duì)新生兒細(xì)菌性肺炎診治具有重要意義，然而臨床上新生兒細(xì)菌性肺炎表現(xiàn)不典型，易和病毒性感染二者相互混淆，同時(shí)病原體檢測(cè)又耗時(shí)較長(zhǎng)，患兒病情進(jìn)展變化迅速，迫切需借助一些生化指標(biāo)來(lái)進(jìn)行早期的鑒別診斷［7-9］。

PCT 為降鈣素前體，不具有激素活性，可在感染早期2～3 h 后出現(xiàn)升高，6～12 h 后顯著高于正常值，24 h 到達(dá)高峰；PCT 值升高狀態(tài)主要和感染相關(guān)，不受性別、體重、免疫妥協(xié)狀態(tài)、類固醇、母體PCT 等的影響，在新生兒感染性疾病的診斷中具有較高的準(zhǔn)確性［10］。本研究結(jié)果顯示，細(xì)菌性肺炎組、支原體肺炎組、病毒性肺炎組患兒血清PCT 水平均較健康新生兒高，且相較于支原體肺炎組、病毒性肺炎組，新生兒細(xì)菌性肺炎組PCT 增高更為顯著，這與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究成果一致［11］。Wang 等［12］研究顯示，PCT 測(cè)定雖不能區(qū)分病毒和支原體感染，但對(duì)于細(xì)菌性肺炎和非細(xì)菌性肺炎具有較高的鑒別價(jià)值。ROC 曲線是敏感度和特異度結(jié)合起來(lái)對(duì)診斷試驗(yàn)正確程度進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)的一種方法，依照曲線形狀以及曲線下面積進(jìn)行分析，其結(jié)果不受患病率影響。

α1-AT 作為一種急性時(shí)相蛋白，可與靶細(xì)胞二者結(jié)合抑制血清中其他蛋白酶，其中對(duì)白細(xì)胞彈性蛋白酶的抑制效果最強(qiáng)。Gao 等［13］研究中顯示感染性肺炎新生兒血清α1-AT 表達(dá)水平明顯升高，其結(jié)果支持本研究結(jié)論。當(dāng)機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)肺部急性炎癥，患兒肺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量即可出現(xiàn)增加，造成肺泡中巨噬細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞衰老或死亡，釋放出更多蛋白酶［14］。本研究中血清α1-AT 對(duì)于細(xì)菌性肺炎的診斷效能ROC 曲線分析，說(shuō)明血清α1-AT 能夠在一定程度上反映機(jī)體內(nèi)細(xì)菌性感染的發(fā)生。

HMGB1 是一種高度保守型的蛋白分子，研究顯示，HMGB1 作為重要的炎癥介質(zhì)與致炎因子，在啟動(dòng)和維持炎癥瀑式反應(yīng)中具有關(guān)鍵性作用［15］。本研究聯(lián)合上述三項(xiàng)指標(biāo)共同檢測(cè)診斷新生兒細(xì)菌感染性，并鑒別新生兒細(xì)菌感染性與非細(xì)菌感染性肺炎，結(jié)果顯示PCT、α1-AT、HMGB1聯(lián)合診斷和鑒別下ROC 曲線下面積分別達(dá)到0.945、0.908，提高了診斷效能，在細(xì)菌感染性肺炎與病毒感染性肺炎、細(xì)菌感染性肺炎與支原體感染性肺炎的鑒別評(píng)估中有較高的評(píng)估價(jià)值。

綜上所述，感染性肺炎新生兒血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平高于健康者，且細(xì)菌感染性肺炎高于非細(xì)菌感染性肺炎，三者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于細(xì)菌感染性與非細(xì)菌感染性的鑒別具有較高的評(píng)估價(jià)值。