汪曉飛
(西寧野生動物園,青海 西寧 810006)
大鵟(Buteohemilasius)和雕鸮(Bubobubo)均屬于國家二級保護野生動物,其中大鵟是我國鵟中個體最大者,體色變化比較大,上體通常為暗褐色,下體白色至棕黃色,并有暗色的斑紋,尾羽具有3~11條暗色橫斑,先端灰白色。雕鸮是我國最大的夜行猛禽之一,廣泛分布于世界各地,主要捕食鼠類、鳥類及小型爬行動物,對維持生態(tài)平衡起著重要的作用。Jung等報道了16只雕鸮救護后放歸前測定的8項血液生化指標測定范圍[1]。許杰等報道了1例疑似滅鼠藥二次中毒雕鸮放歸野外前測定的雕鸮的14項血液生理生化指標[2]。郭婷婷等在大鵟和長耳鸮的部分血液生理生化指標及血細胞的顯微結構觀察中報道了3只大鵟和3只長耳鸮血液生化指標19項,血象指標12項[3]。在野生動物血液指標對比研究方面,有研究表明,籠養(yǎng)成年白冠長尾雉、白腹錦雞、白鷴等野生禽類的所測生理生化指標在雌雄之間差異不顯著(P>0.05)[4-6]。目前關于大鵟和雕鸮血液生理生化、維生素等指標的報道較少,本試驗通過對西寧野生動物園6只雕鸮和6只大鵟的14項血生化指標、19項血常規(guī)指標、5項維生素和5項礦物質指標的測定,提升了野生動物資源保護和救護力度,對野生動物救護、野生動物疫源疫病監(jiān)測有一定的參考價值。
1.1 試驗動物 西寧野生動物園內飼養(yǎng)的健康成年雕鸮和大鵟,數(shù)量為每種動物6只,年齡3~4歲,雌雄各3只,以上動物均處于非繁殖期,所有動物均定期驅蟲,外觀被毛光滑,食欲、糞便均正常,經(jīng)獸醫(yī)臨床檢查確認為健康成年個體。
1.2 血液樣本的采集 采血部位消毒,翼下靜脈采血。血常規(guī)檢測前使用EDTA抗凝管采血,混勻后立即取樣進行檢測。血生化、礦物質、維生素指標檢測前使用促凝管采血,采血后室溫靜置采血管2 h, 3 000 r/min離心15 min,分離出血清,保存于-20 ℃ 冰箱內待檢。
1.3 測定方法 利用mindray(邁瑞) BC-2800Vet 全自動血液細胞分析儀測定2種動物血液中的白細胞數(shù)(WBC)、紅細胞數(shù)(RBC)、淋巴細胞數(shù)(Lymph)、單核細胞數(shù)(MON)、中性粒細胞數(shù)(Gran)、淋巴細胞百分比(Lymph%)、單核細胞百分比(MON%)、中性粒細胞百分比(Gran%)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞分布寬度變異系數(shù)(RDW)、血小板數(shù)目(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)、嗜酸性粒細胞百分比(Eos%)共19項指標。利用IDEXX vetTest8008血液生化儀測定2種動物白蛋白(ALB)、堿性磷酸酶(ALP)、丙谷轉氨酶(ALT)、淀粉酶(AMY)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、球蛋白(GLOB)、血糖(GLU)、總膽紅素(TBIL)、總蛋白(TP)、鈉(Na)、鉀(K)、谷草轉氨酶(AST)、總膽固醇(CHOL)共14項指標。用分光光度法測定血清中鈣(Ca)、磷(Pi)、鐵(Fe)、銅(Cu)、鋅(Zn)(試劑盒為南京建成公司產(chǎn)品)含量。用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血清β-胡蘿卜素(β-carotene)、血清維生素A(Vitamine A)、血清維生素C(Vitamine C)、血清維生素E(Vitamine E)、血清維生素B2(Vitamine B2)(試劑盒為上海酶聯(lián)生物公司產(chǎn)品)共10項生化指標。
1.4 統(tǒng)計方法 采用SPSS 25.0軟件對采集的動物血液樣本原始數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,對各組數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗和正態(tài)分布檢驗,對服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù)通過正態(tài)分布法、對不服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù)通過百分位數(shù)法,根據(jù)所測指標的實際意義求出雙側95%可信區(qū)間作為指標的參考范圍。運用t檢驗對各組間差異進行比較,并參考各類文獻,對比數(shù)據(jù)結果進行分析。
2.1 血常規(guī)指標的測定 結果見表1。在雕鸮和大鵟中,RBC、HGB、MCV、HCT、MCH、MCHC、RDW、PDW等指標均差異極顯著(P<0.01),兩者MPV差異顯著(P<0.05),PLT差異不顯著(P>0.05);同時,兩者的WBC、Lymph、MON、Gran等指標差異極顯著(P<0.01),而Lymph%、MON%、Gran%、Eos%等指標均無顯著差異(P>0.05)。
表1 雕鸮、大鵟血常規(guī)指標Table 1 Blood routine indicators of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)
2.2 血生化指標的測定 結果見表2。雕鸮和大鵟兩者的血生化指標中,ALT、GLOB、AST等指標差異性極顯著(P<0.01);ALP差異性顯著(P<0.05);ALB、AMY、BUN、CRE、GLU、TBIL、TP、Na、K、CHOL等指標差異不顯著(P>0.05)。
表2 雕鸮、大鵟血生化指標Table 2 Blood biochemical indicators of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)
2.3 礦物質、維生素的測定 結果見表3。雕鸮和大鵟兩者的Ca、Pi、Fe、Zn、Cu等礦物元素指標差異性均不顯著(P>0.05);兩者維生素比對中,維生素C、β-胡蘿卜素指標差異性不顯著(P>0.05),而維生素A、維生素E等指標差異極顯著(P<0.01),維生素B2指標差異性顯著(P<0.05)。
表3 雕鸮、大鵟礦物質、微量元素指標Table 3 Mineral and trace element indexes of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)
血生化、血常規(guī)等檢查是監(jiān)測野生動物健康狀況的重要依據(jù),準確有效的血液指標數(shù)值對動物個體健康評估及疾病監(jiān)測、生理狀態(tài)評定具有十分重要的作用。本試驗采用常規(guī)法、分光光度法、酶聯(lián)免疫吸附試驗和全自動血液生化儀測定、全自動血液細胞分析儀測定等方法對雕鸮、大鵟2種猛禽血液的血生化、血常規(guī)、血清維生素和礦物質等指標進行測定。本試驗所涉及的動物樣本均為西寧野生動物園圈養(yǎng)的動物,且數(shù)量較少,用以確定一類動物的血液指標正常參考范圍來說較為困難,但本試驗測定的數(shù)據(jù)在分析評估本地區(qū)雕鸮、大鵟等野生禽類的機體健康狀況方面仍有一定科學意義,可以作為雕鸮、大鵟在血液生理生化領域的輔助診斷依據(jù)和研究基礎數(shù)據(jù)。
運用t檢驗方法對比大鵟和雕鸮的各項數(shù)據(jù)進行分析后發(fā)現(xiàn),本試驗中,2種動物肝腎功能指標中ALB、GLU、ALP等差異性不顯著(P>0.05)。大鵟血清中白細胞相關指標WBC、Lymph、MON、Gran等指標均高于雕鸮,且差異極顯著(P<0.01)。這表明除個體差異外,雕鸮的機體免疫能力弱于大鵟。2種動物的紅細胞相關指標中,大鵟的RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC等指標均高于雕鸮,且兩者差異極顯著(P<0.01),由于本地的大鵟棲息地海拔相對高于雕鸮,這種差異性的出現(xiàn)表明大鵟的攜氧能力高于雕鸮。對比2種動物的維生素指標數(shù)據(jù),維生素C、β-胡 蘿卜素指標差異性不顯著(P>0.05),而維生素A、維生素E等指標差異極顯著(P<0.01),維生素B2指標差異性顯著(P<0.05),由于兩者食物來源和數(shù)量相同,因此考慮這種差異的出現(xiàn)是由于物種不同導致機體對維生素吸收利用的程度不同。
本試驗中測得的雕鸮ALB指標數(shù)據(jù)與Jung等[1]研究中的ALB數(shù)據(jù)差別很大。Jung等測定的白蛋白平均值為34.9 g/L,而本試驗測定的白蛋白平均值為43.17 g/L。但Jung等研究中的動物樣本為救護后經(jīng)治療放歸的16只雕鸮,其中41.7%的雕鸮感染吸蟲,而本試驗中的雕鸮均為健康個體。根據(jù)沈永林等[7]的報道,山羊試驗感染肝片吸蟲囊蚴后,血清總蛋白前10周有緩慢上升趨勢,之后呈直線下降,這或許正是導致本試驗ALB數(shù)據(jù)與Jung等測得的ALB數(shù)據(jù)差別較大的原因。本試驗血生化數(shù)據(jù)與許杰等[2]試驗中的血生化數(shù)據(jù)相比較,TBIL、GLOB等指標差別較大,由于許杰等研究中采集的雕鸮血液樣本為中毒后治療康復放歸前采集獲得,因此這種指標水平不同的出現(xiàn)可能與雕鸮的病理過程、生活環(huán)境等因素相關。
與郭婷婷等[3]的研究結果相比,本試驗中大鵟的血紅蛋白和血紅蛋白濃度指標平均值均明顯高于郭婷婷等測定的大鵟指標數(shù)據(jù),郭婷婷等測定的ALT、AST等指標則明顯高于本試驗中測得的數(shù)據(jù)。由于郭婷婷等的樣本為未救護成功的大鵟,而本試驗中的動物為健康個體,因此考慮這種差異的出現(xiàn)可能是因為郭婷婷等的樣本出現(xiàn)失血、受傷等導致的病理性變化。由于雕鸮、大鵟的維生素、礦物質相關指標的數(shù)據(jù)相關文獻報道很少,因此缺乏比對分析的依據(jù),有待后續(xù)研究。