毛海燕 殷旭東 喬大偉 孔桂美 卜 平*

（1.揚(yáng)州大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤科，江蘇 揚(yáng)州225000； 2.揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合系，江蘇 揚(yáng)州225009）

結(jié)直腸癌是消化道系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，具有高發(fā)病率、高死亡率的特點(diǎn)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)直腸癌在中國(guó)乃至世界范圍內(nèi)發(fā)病率居于第三，死亡率居于第二［1］。對(duì)于晚期結(jié)直腸癌患者，許多患者不能耐受化療，傳統(tǒng)的中醫(yī)藥治療顯現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)。研究發(fā)現(xiàn)許多中藥復(fù)方及中藥單體都具有抗腫瘤活性，本課題組前期發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌術(shù)后患者脾虛濕毒證較多，自擬健脾解毒方，采用高效液相色譜檢測(cè)發(fā)現(xiàn)驗(yàn)方健脾解毒方的主要活性單體為漢黃芩素。漢黃芩素是從中藥黃芩中提取出來的一種黃酮類成分，近年來，國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)漢黃芩素在胰腺癌［2］、乳腺癌、前列腺癌、肺癌等惡性腫瘤中都表現(xiàn)出明顯的抗腫瘤活性及抗血管生成［3?6］作用，在惡性腫瘤的防治方面具有廣闊的應(yīng)用前景。膽綠素還原酶A（Biliverdin reductase A，BLVRA）是一種進(jìn)化上高度保守的可溶性NADH 依賴酶，廣泛分布于動(dòng)植物細(xì)胞漿內(nèi)［7］，是膽綠素代謝的限速酶，能夠促進(jìn)膽綠素向膽紅素轉(zhuǎn)化，維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原反應(yīng)的動(dòng)態(tài)平衡，其調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，在人類腫瘤中，其在轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)增加，從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。

1 材料

1.1 細(xì)胞株 人結(jié)腸癌細(xì)胞株LOVO、SW620、HCT116、SW480、HT29 和正常腸上皮細(xì)胞FHC 購自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫。

1.2 藥物及試劑 漢黃芩素（上海阿拉丁生化科技有限公司，批號(hào)632?85?9，純度＞99.8%）；5?FU（武漢百浩天生物科技有限公司，批號(hào)H31020593）；DMEM、RPMI?1640及F?12K細(xì)胞培養(yǎng)基（美國(guó)Gibco 公司，批號(hào)分別為AE2944968、AE29456629、AE2944653）；胎牛血清（美國(guó)Gibco 公司，批號(hào)42F6590 K）；胰蛋白酶?乙二胺四乙酸（EDTA）混合液（美國(guó)Gibco 公司，批號(hào)1665746）；MTT試劑盒（武漢百浩天生物科技有限公司，批號(hào)H152440）；Annexin V?異硫氰酸熒光素（FITC，美國(guó)BD 公司，批號(hào)B148219）；碘化丙碇（PI，美國(guó)BD 公司，批號(hào)25535）；NaOH（上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)10019764）；Trizol 總RNA 提取試劑（美國(guó)Invitrogen 公司，批號(hào)9108）；蛋白裂解試劑盒（南京凱基生物科技發(fā)展有限公司，批號(hào)P6730）；BCA 蛋白定量試劑盒（南京凱基生物科技發(fā)展有限公司，批號(hào)RK242682）；逆轉(zhuǎn)錄?聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT?PCR）及實(shí)時(shí)熒光定量PCR 試劑盒（日本TaKaRa 公司，批號(hào)RR820 A、RR036 A）；所用的PCR 引物BLVRA和GAPDH由上海金斯頓生物技術(shù)公司合成；BLVRA、E?cadherin、Vimentin、snail、Bcl?2、BAX、GAPDH 一抗和羊抗兔辣根過氧化酶（HRP）二抗（美國(guó)CST 公司，批號(hào)依次為393385、3195、5741、3879、4223、2772、MS01）；人工基底膜（Matrigel）（美國(guó)BD 公司，批號(hào)356234）；穿透小室（Transwell，美國(guó)Corning 公司，批號(hào)3422）。

2 方法

2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)用所有細(xì)胞株均培養(yǎng)于含10%胎牛血清，100 U／mL 青鏈霉素的培養(yǎng)液中，37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，至細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

2.2 MTT 檢測(cè)細(xì)胞增殖能力 根據(jù)細(xì)胞篩選結(jié)果，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HT29 和SW620細(xì)胞作為目的細(xì)胞，細(xì)胞濃度為1×105／mL 的細(xì)胞懸液，每孔100 μL 接種于96 孔板，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h 后加入不同質(zhì)量濃度（0、20、40、80、160 μg／mL）［8］漢黃芩素溶液（0.4% NaOH 溶解）及12.5 μg／mL 的5?FU，每組設(shè)5個(gè)復(fù)孔，分別培養(yǎng)24、48、72 h，每孔加入20 μL MTT（5 mg／mL），培養(yǎng)4 h 后加入150 μL DMSO，搖床搖動(dòng)10 min，酶標(biāo)儀測(cè)定490 nm 的吸光度值（OD）。

2.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡 6 孔板培養(yǎng)HT29 及SW620細(xì)胞，經(jīng)不同質(zhì)量濃度漢黃芩素（0、20、40、80、160 μg／mL）及12.5 μg／mL 5?FU 處理，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h 后，收集上液，磷酸鹽緩沖液（PBS）清洗后棄去上清，胰酶消化收集2×105個(gè)細(xì)胞，100 μL 結(jié)合緩沖液重懸，加入400 μL PBS，按照試劑盒說明書方法，室溫下每管加入PI 染液5 μL，Annexin V?FITC 10 μL，避光孵育15 min 后流式細(xì)胞儀檢測(cè)，根據(jù)公式計(jì)算細(xì)胞凋亡率。細(xì)胞凋亡率＝（凋亡的細(xì)胞數(shù)／總細(xì)胞數(shù)）×100%。

2.4 Transwell 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力 按1∶8 比例稀釋Matrigel 膠，加入60 μL Matrigel 膠稀釋液包被、水化Transwell 小室底部膜，放37 ℃培養(yǎng)箱過夜，遷移能力檢測(cè)不加Matrigel 膠。無血清培養(yǎng)液將細(xì)胞濃度調(diào)整至4×105／mL，加200 μL 到上室，下室加入含20% 胎牛血清的培養(yǎng)液500 μL。分別不同終質(zhì)量濃度漢黃芩素（0、20、40、80、160 μg／mL）及12.5 μg／mL 5?FU 處理細(xì)胞，每種濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔，細(xì)胞培養(yǎng)24 h 后，取出Transwell 小室，PBS 漂洗3 次，棉簽小心擦去上室表面細(xì)胞，4%多聚甲醛固定15 min，0.1%結(jié)晶紫染色30 min，在高倍鏡下計(jì)數(shù)小室膜下面侵襲的細(xì)胞數(shù)，計(jì)數(shù)中間和四周5個(gè)視野，取平均值。

2.5 RT?PCR 檢測(cè)BLVRAmRNA 的表達(dá) 不同質(zhì)量濃度漢黃芩素（0、20、40、80、160 μg／mL）及12.5 μg／mL 5?FU 處理HT?29 和SW620細(xì)胞24 h，收集細(xì)胞，Trizol 提取總RNA 并進(jìn)行cDNA 合成，RT?PCR 檢測(cè)BLVRAmRNA 表達(dá)。引物序列，BLVRA正向 5′?GGAATCCACACCCTT CCTCA?3′，反向5′?CTTGGCTGGAAAGAGCATCC?3′；GAPDH正向5′ ?CACCCACTCCTCCACCTTTG?3′，反向5′?CCACCACCCTGTTG CTGTAG?3′。反應(yīng)條件為95 ℃預(yù)變性5 min，95 ℃持續(xù)10 s，60 ℃、34 s，72 ℃、10 s，40個(gè)循環(huán)，計(jì)算2－ΔΔCT用于分析基因的相對(duì)表達(dá)。

2.6 Western blot 檢測(cè)BLVRA 蛋白及EMT 和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá) 將2×105個(gè)HT29 和SW620細(xì)胞種植于6 孔板，培養(yǎng)24 h 后加入不同質(zhì)量濃度漢黃芩素（0、20、40、80、160 μg／mL）及12.5 μg／mL 5?FU 繼續(xù)培養(yǎng)24 h，棄培養(yǎng)液，PBS 漂洗3 次，加入蛋白裂解混合液（Lysis Buffer 1 mL，10 μL 磷酸酶抑制劑，1 μL 蛋白酶抑制劑和5 μL 100 mmol／L PMSF 提取全蛋白，整個(gè)過程在冰上操作。BCA法測(cè)定蛋白濃度，步驟按說明書進(jìn)行。蛋白樣品20 μg 進(jìn)行多聚丙烯酰胺凝膠（PAGE）電泳液，5% BSA 室溫?fù)u床封閉2 h后加入一抗4 ℃孵育過夜，用洗膜緩沖液（TBST）搖床洗滌3 次，10 min／次，二抗室溫孵育1.5 h，再用TBST 緩沖液搖床洗滌3 次，10 min／次，超敏化學(xué)發(fā)光試劑（ECL）發(fā)光，采集圖像后ImageJ分析數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析，計(jì)量資料采用（）表示，兩組比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 細(xì)胞篩選結(jié)果 RT?PCR 及Western blot 檢測(cè)結(jié)果顯示，五株結(jié)腸癌細(xì)胞中BLVRA 表達(dá)均高于FHC細(xì)胞（P＜0.05，P＜0.01），篩選出BLVRA 低表達(dá)的SW620細(xì)胞和高表達(dá)的HT29細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。見圖1。

圖1 不同細(xì)胞株BLVRA 表達(dá)（， n＝3）

3.2 漢黃芩素抑制結(jié)腸癌HT29 和SW620細(xì)胞的增殖能力 與空白組比較，隨著漢黃芩素濃度的增高，漢黃芩素處理HT29 及SW620細(xì)胞24、48、72 h，細(xì)胞增殖能力降低（P＜0.05，P＜0.01），其抑制效應(yīng)隨著作用濃度及作用時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增加；與5?FU組比較，漢黃芩素（160 μg／mL）組在72 h 時(shí)對(duì)HT?29細(xì)胞抑制作用明顯（P＜0.01），而漢黃芩素（160 μg／mL）組在48 h 及72 h 時(shí)對(duì)SW620細(xì)胞抑制作用明顯（P＜0.01）。見表1～2。

表1 漢黃芩素抑制HT29細(xì)胞的增殖作用（， n＝5）

表1 漢黃芩素抑制HT29細(xì)胞的增殖作用（， n＝5）

注：與空白組（0 μg／mL）比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與5?FU組比較，＃＃P＜0.01。

表2 漢黃芩素抑制SW620細(xì)胞的增殖作用（， n＝5）

表2 漢黃芩素抑制SW620細(xì)胞的增殖作用（， n＝5）

注：與空白組（0 μg／mL）比較，**P＜0.01；與5?FU組比較，＃＃P＜0.01。

3.3 不同濃度漢黃芩素能促進(jìn)結(jié)腸癌HT29 和SW620細(xì)胞凋亡 與空白組比較，漢黃芩素對(duì)HT29 及SW620細(xì)胞的促凋亡作用隨著藥物濃度的增加而增強(qiáng)（P＜0.01），與5?FU組相比，漢黃芩素（80、160 μg／mL）組對(duì)HT29細(xì)胞的促凋亡作用優(yōu)于5?FU組（P＜0.05，P＜0.01），漢黃芩素160 μg／mL組對(duì)SW620細(xì)胞的促凋亡作用更好（P＜0.01），而漢黃芩素低濃度組促凋亡作用劣于5?FU組，見圖2～3。

圖2 漢黃芩素對(duì)HT?29細(xì)胞凋亡的影響（， n＝3）

圖3 漢黃芩素對(duì)SW620細(xì)胞凋亡的影響（， n＝3）

3.4 不同濃度漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29、SW620 凋亡相關(guān)蛋白Bcl?2、BAX 的影響 與空白組比較，HT29細(xì)胞中漢黃芩素（40、80、160 μg／mL）組Bcl?2 表達(dá)逐漸下降，而BAX 的表達(dá)逐步升高（P＜0.01）；與5?FU組比較，漢黃芩素（160 μg／mL）作用明顯（P＜0.01）。SW620細(xì)胞中隨著漢黃芩素濃度的增加，Bcl?2 表達(dá)逐漸下降（P＜0.01），而BAX 的表達(dá)逐步升高（P＜0.05，P＜0.01），與5?FU組比較，漢黃芩素（160 μg／mL）組Bcl?2 的表達(dá)降低（P＜0.05），漢黃芩素（80、160 μg／mL）組BAX 的表達(dá)差異明顯（P＜0.05，P＜0.01）。見圖4～5。

圖4 漢黃芩素對(duì)HT?29細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響（， n＝3）

圖5 漢黃芩素對(duì)SW620細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響（， n＝3）

3.5 不同濃度漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29 和SW620細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響 與空白組比較，隨著漢黃芩素濃度的升高，HT29細(xì)胞遷移和侵襲能力逐漸下降（P＜0.01）；與5?FU組比較，漢黃芩素（80、160 μg／mL）組抑制作用更明顯（P＜0.05，P＜0.01）。與空白組比較，隨著漢黃芩素濃度的升高，SW620細(xì)胞遷移和侵襲能力逐漸下降（P＜0.05，P＜0.01）；與5?FU組比較，漢黃芩素（160 μg／mL）組抑制作用更明顯（P＜0.01）。見圖6～9。

圖6 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞遷移能力的影響（×100）（n＝3）

圖7 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29 侵襲能力的影響（×100）（n＝3）

圖8 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌SW620細(xì)胞遷移能力的影響（×100）（n＝3）

圖9 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌SW620細(xì)胞侵襲能力的影響（×100）（n＝3）

3.6 不同濃度漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29 和SW620細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白的影響 與空白組比較，漢黃芩素（40、80、160 μg／mL）促進(jìn)HT29細(xì)胞E?cadherin 表達(dá)，對(duì)snail 的抑制作用逐漸增強(qiáng)（P＜0.01），漢黃芩素（20、40、80、160 μg／mL）對(duì)Vimentin 的抑制作用逐漸增強(qiáng)（P＜0.05，P＜0.01）；與5?FU組比較，漢黃芩素（160 μg／mL）對(duì)Vimentin 及snail 抑制作用更明顯（P＜0.05），其對(duì)E?cadherin 促進(jìn)作用與5?FU組相似。與空白組比較，漢黃芩素（40、80、160 μg／mL）促進(jìn)SW620細(xì)胞E?cadherin 表達(dá)（P＜0.05，P＜0.01），漢黃芩素（20、40、80、160 μg／mL）對(duì)Vimentin 及snail 的抑制作用逐漸增強(qiáng)（P＜0.05，P＜0.01）；與5?FU組比較，漢黃芩素（80、160 μg／mL）對(duì)E?cadherin 的促進(jìn)作用及snail抑制作用明顯（P＜0.05），漢黃芩素（160 μg／mL）對(duì)Vimentin 的抑制作用更優(yōu)（P＜0.05）。見圖10～11。

圖10 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞EMT 相關(guān)蛋白的影響（， n＝3）

圖11 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌SW620細(xì)胞EMT 蛋白的影響（， n＝3）

3.7 不同濃度漢黃芩素對(duì)BLVRA 蛋白的影響 與空白組比較，漢黃芩素（40、80、160 μg／mL）可抑制HT29細(xì)胞BLVRA 蛋白的表達(dá)（P＜0.05，P＜0.01），而在SW620細(xì)胞中，隨著漢黃芩素濃度的升高，對(duì)BLVRA 的抑制作用越來越強(qiáng)（P＜0.01）；與5?FU組比較，HT29細(xì)胞中漢黃芩素（80、160 μg／mL）對(duì)BLVRA 的抑制作用優(yōu)于5?FU組（P＜0.01），而在SW620細(xì)胞中漢黃芩素顯現(xiàn)出與5?FU 類似的抑制作用（P＞0.05）。見圖12～13。

圖12 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞BLVRA 蛋白的影響（， n＝3）

圖13 漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌SW620細(xì)胞BLVRA 蛋白的影響（， n＝3）

4 討論

結(jié)直腸癌是我國(guó)乃至全世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，隨著飲食習(xí)慣及生活環(huán)境的變化，在我國(guó)結(jié)腸癌的發(fā)病率及死亡率逐年升高，且發(fā)病年齡呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)［9］。雖然越來越多的新型抗腫瘤藥及免疫治療藥物問世，但結(jié)直腸癌的治療效果仍不理想。近年來，多種中藥活性提取物在多種惡性腫瘤的進(jìn)展中顯現(xiàn)出明顯的抗腫瘤作用，成為腫瘤治療的研究熱點(diǎn)。本課題組成員前期研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)半枝蓮提取物及其含藥血清可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和血管生成［10］。腫瘤細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡以及腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲是結(jié)直腸癌進(jìn)展的關(guān)鍵步驟。漢黃芩素是從傳統(tǒng)中藥黃芩中提取的一種黃酮類化合物，研究表明其可以通過調(diào)節(jié)肝臟干細(xì)胞的增殖和凋亡來減輕肝纖維化［11］，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)漢黃芩素具有廣譜的抗腫瘤活性，能夠誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、減少腫瘤新生血管形成，同時(shí)還可以增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性［12?14］。本研究結(jié)果顯示漢黃芩素能夠抑制結(jié)腸癌細(xì)胞系HT?29 及SW620細(xì)胞的增殖，且呈現(xiàn)出濃度和時(shí)間依賴性，同時(shí)漢黃芩素能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力，且呈現(xiàn)出劑量濃度依賴性，這一研究結(jié)果與李瑤瑤等［15］及樊帥君等［16］研究結(jié)果類似。由此可見，漢黃芩素對(duì)在結(jié)直腸癌細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展中起著重要的抑制作用。Bcl?2 和BAX 是細(xì)胞凋亡通路的必需因子，BAX 存在于細(xì)胞質(zhì)中，能轉(zhuǎn)入到線粒體外膜，從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而Bcl?2 能抑制BAX 的轉(zhuǎn)入從而抑制細(xì)胞凋亡［17］，因此BAX 扮演著促凋亡角色，而Bcl?2 則起著相反的作用，兩者的比例決定著細(xì)胞凋亡的方向。本研究顯示隨著漢黃芩素濃度的提升，BAX 的表達(dá)水平呈上升趨勢(shì)，而Bcl?2 的表達(dá)水平則呈下降趨勢(shì)，明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。上皮?間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）在腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移中也起著重要作用，所有的EMT 亞組都顯現(xiàn)出相似的促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的能力［18］。E?cadherin 在細(xì)胞與細(xì)胞之間的粘附過程中起著重要作用，其表達(dá)水平的下降是EMT 進(jìn)程和細(xì)胞遷移的基本因素。Vimentin 被認(rèn)為是細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化的一個(gè)典型標(biāo)志，snail 是惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過程中誘導(dǎo)EMT 過程的關(guān)鍵作用因子之一，在腫瘤EMT 進(jìn)程中Vimentin 及snail 的表達(dá)是上調(diào)的［19］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，漢黃芩素能夠促進(jìn)E?cadherin 的表達(dá)，抑制Vimentin 及snail的表達(dá)水平，且隨著劑量濃度的提高其作用更明顯，提示漢黃芩素可抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的EMT 進(jìn)程，從而抑制結(jié)腸癌進(jìn)展。

膽綠素還原酶A（Biliverdin reductase A，BLVRA）是膽綠素還原酶（Biliverdin reductase，BVR）的一個(gè)主要亞型，是一種有效的抗氧化劑，能夠促進(jìn)膽綠素向膽紅素轉(zhuǎn)化［20］，能作為細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。其在多種腫瘤如肝癌、肺癌、乳腺癌、食管癌等腫瘤中呈現(xiàn)過表達(dá)水平［21?23］，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。BLVRA 的過表達(dá)能夠影響上千種基因、信號(hào)通路、細(xì)胞凋亡及免疫分子水平的表達(dá)，但是BLVRA 在結(jié)直腸癌中的作用尚未被研究，且漢黃芩素對(duì)其作用亦未得到研究。本研究結(jié)果顯示漢黃芩素作用結(jié)腸癌細(xì)胞24 h 后能夠抑制BLVRA 的表達(dá)，且顯現(xiàn)出劑量濃度依耐性。隨著BLVRA表達(dá)水平的下降，細(xì)胞增殖及細(xì)胞侵襲和遷移能力下降，細(xì)胞凋亡作用提高，而腫瘤的EMT 進(jìn)程也明顯被抑制，表明漢黃芩素通過調(diào)控BLVRA 的表達(dá)水平可能是其發(fā)揮抑制結(jié)腸癌進(jìn)展的作用機(jī)制之一。

綜上所述，漢黃芩素能夠通過調(diào)控BLVRA 的表達(dá)來有效抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的進(jìn)展，在結(jié)腸癌的防治中有一定療效，但其是否可通過其他信號(hào)通路及靶點(diǎn)來發(fā)揮抑制作用，且在體內(nèi)是否有相似的抗腫瘤作用仍需進(jìn)一步深入研究。