劉黎明，劉淼

（湖北省第三人民醫(yī)院陽邏院區(qū)檢驗科，湖北 武漢 430000）

0 引言

呼吸道感染絕大部分由病毒引起，是兒科常見疾病，嬰幼兒呼吸系統(tǒng)發(fā)育不完善，免疫功能低下，易引發(fā)重癥，有報道稱，急性呼吸道感染是全球6歲以內(nèi)兒童死亡的首要原因[1]。為了解本地區(qū)小兒呼吸道病毒的流行特點，為臨床醫(yī)師提供優(yōu)質(zhì)、高效的診斷結(jié)果，為臨床合理用藥提供指導(dǎo)，本研究選取我院診治的呼吸道感染患兒為研究對象，采用直接免疫熒光法對其七項呼吸道病毒感染檢測，現(xiàn)根據(jù)臨床病例進行回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 對象

本次研究的對象為2019年7月26日至2020年8月31日由急性呼吸道感染在我院就診的兒科住院的1957例樣本。其中春季240例，夏季507例，秋季603例，冬季607例。1957例患兒中男1304例，女653例，年齡1天到14歲，1歲以內(nèi)1220例，1歲到3歲489例，3歲到6歲183例，6歲以上65例。本項目研究已獲得患兒及家屬知情同意，得到醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 檢測原理

熒光素（FITC）標記的單克隆抗體與病毒抗原結(jié)合，形成穩(wěn)定的抗原-抗體復(fù)合物，在E100熒光顯微鏡下觀察，呈現(xiàn)特異性綠色熒光。

1.2.2 采集標本

用鼻咽拭子從患者的鼻咽部取樣或者使用鼻腔灌洗液，將鼻咽拭子放入儲存管中（含有生理鹽水），在24h內(nèi)送檢。標本采集工作由兒科醫(yī)生完成。

1.2.3 檢測方法

本科室七項呼吸道病毒抗原檢測采用美國Diagnostic Hybrids ，Inc生產(chǎn)的試劑。呼吸道病毒有腺病毒（AD，容易侵害腸黏膜，呼吸道以及眼部）、甲型流感病毒（IA，容易導(dǎo)致肺炎、喉炎以及氣管炎）、乙型流感病毒（IB）、副流感病毒1、2、3型（P1、P2、P3）、呼吸道合胞病毒（RSV）。各項檢測操作均嚴格按相關(guān)規(guī)程進行。

1.2.4 結(jié)果判斷

在200倍E100熒光顯微鏡下每視野找到≥2個綠色熒光細胞即為陽性，否則為陰性。陰性細胞被Evans Blue染成紅色。

2 結(jié)果

2.1 七項呼吸道病毒陽性標本檢出分布

在1957例送檢標本中，共檢出陽性病例233例，單項病毒感染224例，雙重感染9例，1304例男性患者中有161例陽性（12.3%），653例女性患者中有72例陽性（11.0%），兩組陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。送檢標本中其中呼吸道合胞病毒5.2%、甲型流感病毒3.6%、副流感病毒3型2.0%，感染率位居前3位。結(jié)果分布詳見表1。

表1 2019 年7 月至2020 年8 月七項呼吸道病毒陽性率

2.2 不同季節(jié)病毒陽性的檢出分布

七項呼吸道病毒在不同的季節(jié)病例標本的陽性檢出率有差別。我院冬季檢出率最高31.0%，其次為秋季4.5%、夏季2.6%、春季2.1%。在我院兒科七項呼吸道病毒檢測中，秋冬季呼吸道合胞病毒（RSV）感染率最高，秋季陽性檢出率51.9%，冬季陽性檢出率46.8%；流感病毒A（IA）在冬季陽性檢出率為35.1%；副流感病毒3（P3）在春夏季陽性檢出率最高，分別為60.0%，92.3%；其他病毒無明顯特點散在分布。結(jié)果分布詳見表2。

表2 不同季節(jié)病毒檢測情況

2.3 不同年齡段病毒陽性的檢出分布

七項呼吸道病毒在不同的年齡段標本的陽性檢出率有差別。我院1歲以內(nèi)的患兒病毒檢出率最高13.7%，其次為3-6歲11.5%、1-3歲8.2%、6歲以上7.7%。七項呼吸道病毒在6歲以下兒童較易感染，占總陽性患者數(shù)的96.7%,以RSV感染為主，其他病毒感染次之。結(jié)果分布詳見表3。

表3 不同年齡段病毒檢測情況

3 討論

急性呼吸道感染的常見病原體中70%-80%為病毒，在兒科感染中七項呼吸道病毒和肺炎支原體、衣原體較為常見，病因較多，具有發(fā)病率高，傳播快，易流行等特點，不同地區(qū)病毒感染的種類和感染率均不同[2-4]。七項呼吸道病毒的檢測可以快速確診，對控制呼吸道病毒爆發(fā)具有重要意義。直接免疫熒光法是呼吸道病毒檢測中既簡單、快速又高效的診斷方法[5]。

本次研究選取本院2019年7月至2020年8月之間兒科門診和住院部就診的1957例病例為研究對象。共有233例陽性標本，單項病毒感染224例，雙重感染9例，總陽性檢出率為11.9%。男、女性患兒檢出率差異不明顯。單種病毒感染率從高到低是 RSA、IA、P3、IB、P2、P1、AD。病毒流行與季節(jié)變化有明顯關(guān)聯(lián)，冬季發(fā)病率最高，秋季次之，主要因為冬季溫差變化大，溫度較低，病毒在氣溶膠中更加穩(wěn)定[6]。由于地區(qū)、醫(yī)院、年份、季節(jié)及年齡的不同，七項呼吸道病毒感染病原譜存在差異[7]，RSV是我院兒科呼吸道感染最重要致病因素。呼吸道感染人群主要為免疫功能低下的嬰幼兒，嬰幼兒免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未成熟，P3常引起3歲以下嬰幼兒發(fā)生急性呼吸道病毒感染，隨著年齡的增長，日常生活中接觸多種病原體，會逐漸獲得免疫力[8-9]。呼吸道病毒對免疫功能低下的人群和未發(fā)育成熟的兒童健康危害性最大[10]，給家庭和社會都造成極大的疾病和經(jīng)濟負擔，提前預(yù)防較為關(guān)鍵。本次研究顯示，一歲以內(nèi)的嬰幼兒是七項呼吸道病毒防治的重點人群；其次為3到6歲的患兒，分析原因可能與該年齡段處于學(xué)齡前時期，群體活動較多，發(fā)生交叉感染的可能性大。

通過上述可知，嬰幼兒和兒童感染呼吸道病毒因多種因素影響而體現(xiàn)差異，通過分析當?shù)鼗純焊腥厩闆r，加深當?shù)夭《玖餍星闆r認知，為臨床診斷提供依據(jù)，給予患兒及時有效的治療，避免抗生素濫用的問題。