陳振華，楊茂紅

（1.重慶大學(xué)附屬三峽醫(yī)院設(shè)備保障部；2.重慶三峽醫(yī)藥高等專科學(xué)校附屬人民醫(yī)院檢驗科，重慶 404000）

TEK-II 全自動血細胞分析儀采用電阻抗計數(shù)法，檢測結(jié)果包括21 項血液參數(shù)及3 個直方圖，具有檢測速度快捷，結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好等優(yōu)點。本文主要圍繞TEK-II 全自動血細胞分析儀的檢測原理、工作時序，對使用過程中出現(xiàn)的典型故障進行分析、排除介紹。

1 檢測原理

電阻抗法細胞計數(shù)原理是根據(jù)血細胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì)，以對等滲電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎(chǔ)，進行計數(shù)和體積測定。原理如圖1所示，電極間的電阻遵守Ohms 定律：V=R·I=P(L/a)（V:電極兩端的電壓；I：電流；R：寶石微孔電阻；P：電解質(zhì)阻抗；L:寶石微孔長度；a:寶石微孔橫截面積）當(dāng)細胞快速流經(jīng)寶石微孔時，由于細胞是不良導(dǎo)體，寶石微孔電阻R 加大，相當(dāng)于寶石微孔的橫截面積a 減小，在電流恒定的情況下，出現(xiàn)瞬間的電壓變化而產(chǎn)生一個電脈沖，電脈沖的數(shù)量就是流經(jīng)寶石微孔的細胞數(shù)；電脈沖的大小與細胞大小成正比，從而能計數(shù)細胞并測定細胞大小。

圖1 電阻抗法血細胞計數(shù)原理

2 液路工作時序分析

2.1 第一次吸樣

吸樣注射器（M4）下行，吸樣針從樣品管中吸取20ul全血。

2.2 吸樣針外壁清洗

吸樣針上行時，排液泵工作通過8 號閥抽吸稀釋液清洗針外壁，同時M6 開啟屏蔽蓋。

2.3 第一次稀釋

吸樣針轉(zhuǎn)至白細胞計數(shù)池，池內(nèi)液體同時排空，然后樣針下行至池底部噴出樣本，同時M7 注射器上移打入4ml 稀釋液混勻，形成白細胞計數(shù)細胞液。

2.4 第二次吸樣

吸樣注射器（M4）下行，樣針下行至白細胞計數(shù)池中部，吸取32ul 白細胞計數(shù)細胞液。

2.5 第二次稀釋

吸樣針上行轉(zhuǎn)至紅細胞計數(shù)池，噴入吸取的白細胞計數(shù)液。M5 注射器上移噴入5ml 的稀釋液，混合形成紅細胞的計數(shù)細胞液，同時溶血劑注射器(M4)上行向白細胞計數(shù)池打入1ml 溶血劑至白細胞計數(shù)液充分混勻。

2.6 計數(shù)和比色

M6 將屏蔽蓋合上，接著計數(shù)注射器(M3）緩緩下行，儀器開始計數(shù)，計數(shù)液定量為270ul 左右，計數(shù)完成后儀器對白細胞混合液進行比色。

2.7 白細胞計數(shù)池的第一次清洗

屏蔽蓋打開，白細胞計數(shù)池內(nèi)液體排空，吸樣針轉(zhuǎn)至該池內(nèi)由M7 上行噴入5ml 的稀釋液進行清洗。

2.8 紅細胞計數(shù)池的清洗

吸樣針轉(zhuǎn)至紅細胞計數(shù)池由M5 上行噴入5ml 稀釋液進行清洗。

2.9 白細胞計數(shù)池的第二次清洗

吸樣針再次轉(zhuǎn)至白細胞計數(shù)池，由M7 上行噴入5ml 的稀釋液進行清洗，過后又噴入5ml 稀釋液待機浸泡。

2.10 回到準(zhǔn)備狀態(tài)

吸樣針歸位，屏蔽蓋合上，計數(shù)結(jié)果顯示,儀器進入準(zhǔn)備做樣狀態(tài)。

3 故障現(xiàn)象及維修

（1）開機自檢結(jié)束后，WBC、RBC 及PLT 本底報告提示超標(biāo)。①試劑中的雜質(zhì)和氣泡。試劑中的雜質(zhì)或氣泡經(jīng)過計數(shù)孔時，會引起計數(shù)電壓的變化，雜質(zhì)或氣泡越大，電壓越大，本底越高。對于不合格及有雜質(zhì)的試劑必須立即更換，更換后需要多執(zhí)行“更換試劑引導(dǎo)”程序，排除管路系統(tǒng)中的氣泡。②外界對試劑中電離子的數(shù)量與溶度的影響。溫度越高，試劑中電離出的導(dǎo)電離子越多，溶度高，其導(dǎo)電性能越好，液體通過計數(shù)孔的電壓越穩(wěn)定。反之，溫度越低，電離出的離子少，結(jié)晶多，導(dǎo)電性能低，液體通過計數(shù)孔的電壓變化大，本底高。該設(shè)備的工作溫度范圍為10～35℃，將環(huán)境溫度提升至15℃，本底歸零。外界中的電場或磁場會使試劑中的離子偏移，導(dǎo)致液體中的正負偏向。計數(shù)時，正離子會使電平拉高，負離子會使電平拉低，因為電平的變化，從而產(chǎn)生本底。所以儀器應(yīng)遠離離心機、變壓器等高頻設(shè)備。③電極線生銹或接觸不良。電極線生銹或接觸不良，導(dǎo)致電極兩端電阻增大，電極線兩端的電壓也隨著增大，當(dāng)試劑通過計數(shù)孔時，產(chǎn)生電壓的變化也變大，從而產(chǎn)生本底，更換新電極即可解決。④計數(shù)注射器M3 漏氣、電磁閥EV5 及EV7 性能不良。計數(shù)注射器M3 及電磁閥EV5、EV7 漏氣導(dǎo)致通過計數(shù)孔的流速減慢，通過計數(shù)孔的電離子數(shù)量減少，電阻變大，加載在兩端的電壓變大，從而產(chǎn)生本底，更換M3 計數(shù)注射器破損的密封圈即可。EV5、EV7 電磁閥性能不良，開合不徹底，排液不暢通，導(dǎo)致試劑從計數(shù)池溢出也會產(chǎn)生本底。如果清洗電池閥的閥芯后故障依舊，必須立即更換。⑤計數(shù)孔的孔徑變化（俗稱“堵孔”）導(dǎo)致。稀釋液中的雜質(zhì)經(jīng)過寶石孔時會引起計數(shù)孔電壓的變化，電壓的變化隨著計數(shù)孔直徑的大小改變。當(dāng)寶石孔的孔徑變小時，其電壓變大，產(chǎn)生本底。在長期使用過程中，蛋白質(zhì)粘附計數(shù)孔導(dǎo)致孔徑變小或微堵時有發(fā)生。可以選擇儀器的“清洗”功能進行正反沖清洗。或者進入“診斷”菜單，手動打開EV5、EV7 兩個電磁閥及廢液泵，排盡兩個計數(shù)池中的稀釋液，用注射器加入酶清洗液進行浸泡。對于頑固性堵孔，可以拆下計數(shù)杯底座連接M3計數(shù)注射器的硅膠管，連接50ml 注射器手工正反沖計數(shù)孔，即可解決。

（2）空白測試為0，RBC 及PLT 計數(shù)正常，WBC 和HGB顯示為“****”。①溶血素沒加入導(dǎo)致。該儀器WBC 和HGB的共用一個計數(shù)池檢測。工作時序第5 步第二次稀釋結(jié)束后，EV6 電池閥打開，溶血劑注射器M4 上行向WBC 計數(shù)池注入1ml 溶血劑。溶血素快速溶解RGB 釋放出HGB，釋放出的HGB與溶血素中的活性劑結(jié)合形成復(fù)合物進行比色，遵循朗伯—比爾定律。同時使WBC 形成規(guī)律性的變化，細胞內(nèi)物質(zhì)滲透出細胞膜，形成“膜胞核”。當(dāng)溶血劑加入不充分時，RBC破裂不完全導(dǎo)致WBC 假性升高HGB 異常。此故障可以手工加入1ml 溶血劑進一步確定。沿著管路依次檢查溶血劑噴嘴、M4 注射器、EV4 電池閥，發(fā)現(xiàn)M4 注射器漏液，更換M4 注射器活塞密封圈后恢復(fù)正常。②WBC 計數(shù)池臟導(dǎo)致。高鐵血紅蛋白衍生物覆著在WBC 計數(shù)池，影響了WBC 通道的計數(shù)。用廠家提供的探頭清洗液對杯壁進行清洗，故障解除。

4 結(jié)語

全自動血細胞分析儀是一種精密的醫(yī)學(xué)檢驗儀器，在各級醫(yī)院中廣泛使用，其故障大多分為液路故障和氣路故障兩大部分，電路故障的概率相對較小。同時，參數(shù)設(shè)置的增益范圍和人員操作的的不規(guī)范將會造成不同的故障現(xiàn)象。WBC分類不準(zhǔn)確，RGB 和PLT 計數(shù)互相干擾，直方圖異常等故障時有發(fā)生。醫(yī)學(xué)工程技術(shù)人員只有熟練掌握血細胞分析儀的檢測原理與基本結(jié)構(gòu)，聯(lián)合臨床檢驗醫(yī)師共同分析探索，并不斷提升業(yè)務(wù)水平。