戴彩姣，唐 斌，郝玉江，王克雄，龔 成，袁軍法

長江江豚健康評價體系研究

戴彩姣1，唐 斌2，郝玉江2，王克雄2，龔 成3*，袁軍法3*

(1. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，湖北省水生動物病害防控工程技術(shù)研究中心，武漢 430070；2. 中國科學(xué)院水生生物研究所，武漢 430072；3. 長江天鵝洲白鱀豚國家級自然保護區(qū)，石首 434400)

長江江豚（）是目前生活在我國長江流域中僅有的鯨類動物，了解其種群的生理和健康狀況對于該物種的保護具有重要指導(dǎo)意義。利用2002—2015年湖北長江天鵝洲白鱀豚國家級自然保護區(qū)與鄱陽湖長江江豚省級自然保護區(qū)共計136頭次長江江豚的體檢數(shù)據(jù)，統(tǒng)計分析了包括血液學(xué)和血液生化54個臨床指標(biāo)，結(jié)合行為學(xué)指標(biāo)，構(gòu)建了基于行為與生理健康兩個維度的長江江豚健康評價體系，并評估天鵝洲保護區(qū)內(nèi)圈養(yǎng)長江江豚“天天”的健康狀況。結(jié)果表明，長江江豚的白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、血小板計數(shù)（PLT）以及谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）等多個臨床指標(biāo)的生理參數(shù)區(qū)間同陸生哺乳動物及其他近緣種存在較大差別，顯示長江江豚物種的特異性?！疤焯臁钡捏w檢結(jié)果顯示其肝功能、血脂等指標(biāo)異常。研究結(jié)果為長江江豚的健康狀況評估和養(yǎng)護提供了科學(xué)依據(jù)。

長江江豚；血液學(xué)；血液生化；健康評價體系

長江江豚（）隸屬于鯨目（Cetacea）、齒鯨亞目（Odontoceti）、鼠海豚科（Phocoenidae）、江豚屬（），是長江流域僅剩的一種小型淡水鯨類動物，主要分布在長江中下游干流及洞庭湖和鄱陽湖兩大型通江湖泊中[1]。由于各種人類活動的影響，自20世紀(jì)90年代初開始，其種群數(shù)量一直呈加速下降趨勢[2]。1996 年長江江豚被世界自然保護聯(lián)盟（International union for conservation of nature， IUCN）物種紅色名錄列入“瀕危物種”[3]，2013 年被調(diào)整為“極?！蔽锓N。根據(jù)國家林業(yè)和草原局、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布了2021年第3號公告[4]，長江江豚已經(jīng)被列為國家一級保護動物，實施最嚴(yán)格的保護和管理。據(jù)2017年調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，長江江豚種群數(shù)量約1012頭，種群快速衰退趨勢得到一定遏制，但保護形勢依然嚴(yán)峻[5]。

關(guān)于長江江豚，在種群生態(tài)學(xué)[6-7]、繁殖生理 學(xué)[8-9]、生物聲學(xué)[10]、保護遺傳學(xué)以及行為學(xué)[11-14]等多個學(xué)科開展了相關(guān)研究，為長江江豚的養(yǎng)護提供了科學(xué)依據(jù)。隨著長江江豚的種群數(shù)量趨于穩(wěn)定，其健康狀況應(yīng)是下一步關(guān)注的焦點。但因缺乏長江江豚物種的健康標(biāo)準(zhǔn)，多參考陸生哺乳動物或其他近緣種的標(biāo)準(zhǔn)，給長江江豚的健康評估、疾病診斷及保育工作帶來諸多不便。血液常規(guī)檢查和生化分析一直是動物健康評價的基礎(chǔ)。Nabi等通過探究年齡、性別、季節(jié)以及位置等因素對長江江豚血液學(xué)與血液生化指標(biāo)的影響，已證實棲息地環(huán)境與生物生殖狀態(tài)對長江江豚的生理值有影響[15-16]，但長江江豚健康狀況評價體系尚未建立。

本研究利用天鵝洲遷地保護區(qū)與鄱陽湖就地保護區(qū)共計136頭次長江江豚的體檢數(shù)據(jù)，采用醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)方法計算健康長江江豚血液學(xué)與血液生化指標(biāo)生理參數(shù)區(qū)間，嘗試建立基于行為健康與生理健康的長江江豚的健康評價體系，為長江江豚的健康管理提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

利用“聲驅(qū)網(wǎng)捕法”捕撈湖北長江天鵝洲白鱀豚國家級自然保護區(qū)與江西鄱陽湖長江江豚省級保護區(qū)內(nèi)的長江江豚群體[17]，Nabi等總結(jié)了有關(guān)動物追蹤、處理和采血的詳細(xì)信息[18-20]。血樣采集后保存于4 ℃，2 h內(nèi)送醫(yī)院完成檢測。長江江豚的體檢原始數(shù)據(jù)來源于中國科學(xué)院水生生物研究所鯨類生物學(xué)課題組，原始記錄中有明顯異常的長江江豚個體數(shù)據(jù)在分析前剔除。

1.2 監(jiān)測指標(biāo)

身體質(zhì)量指標(biāo)包括體重、體長和身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）。

血液指標(biāo)包括長江江豚血液白細(xì)胞數(shù)（WBC）、中性粒細(xì)胞數(shù)（Neut）、淋巴細(xì)胞數(shù)（Lymph）、嗜酸細(xì)胞數(shù)（Eosino）、單核細(xì)胞數(shù)（Mono）、嗜堿細(xì)胞數(shù)（Baso）、紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均血紅蛋白含量（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）、紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）、血小板數(shù)（PLT）、血小板分布寬度（PDW）、血小板平均體積（MPV）、血小板積壓（PCT）、中性粒細(xì)胞百分比（Neut%）、淋巴細(xì)胞百分比（Lymph%）、嗜酸細(xì)胞百分比（Eosino%）、單核細(xì)胞百分比（Mono%）和嗜堿細(xì)胞百分比（Baso%），共23項指標(biāo)。

血液生化指標(biāo)包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總膽紅素（T-BILI）、直接膽紅素（D-BILI）、間接膽紅素（I-BILI）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白蛋白/球蛋白（ALB/GLB）、總膽汁酸（TBA）、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、血清肌酐（Cr）、總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工（CK-MB）、乳酸脫氫酶（LDH）、血清α羥丁酸脫氫酶（a-HBDH）、血糖（Glu）以及電解質(zhì)：鉀（K）、鈉（Na）、氯（Cl）、鈣（Ca）、磷（P）、鎂（Mg）和鐵（Fe）等。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 19.0（SPSS Inc，Chicago）統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計及檢驗分析。參照王文琪等血液指標(biāo)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計方法對數(shù)據(jù)進行預(yù)處理：依據(jù)拉依達(dá)準(zhǔn)則，剔除每一項監(jiān)測指標(biāo)的異常值。若某個測量值d的殘差d(1≤≤n)滿足|d|>3S時，便剔除該數(shù)值[21]。

采用偏度系數(shù)和峰度系數(shù)檢驗方法，對長江江豚身體質(zhì)量指數(shù)、血常規(guī)與生化各指標(biāo)進行正態(tài)分布分析。如果數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，直接用于計算生理值范圍；若數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，但通過平方根法、對數(shù)轉(zhuǎn)換法等變換后服從正態(tài)分布，仍用正態(tài)分布法估計生理值范圍。

參考臨床醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)方法，采用正態(tài)分布法估計各指標(biāo)生理值[22]，以95％置信區(qū)間作為指標(biāo)統(tǒng)計的生理范圍[23]。根據(jù)各項指標(biāo)的生理學(xué)意義確定長江江豚各生理指標(biāo)取單側(cè)或雙側(cè)閾值。以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示各指標(biāo)的均值。針對樣本間差異性比較，先對組間數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗，滿足方差齊性條件（＞0.05 ）時采用獨立樣本t檢驗比較組間差異；否則采用Mann-Whitney U 檢驗比較組間差異。

1.4 健康評價體系構(gòu)建

參考陸生哺乳動物的健康評價體系，通過行為觀察和血液學(xué)分析，提出長江江豚基于行為健康和生理健康的健康評價體系。通過文獻(xiàn)研究歸納長江江豚的行為譜，歸納為28種本能性行為與17種社會性行為[24]。本研究將易于觀察的游泳行為、攝食行為和呼吸行為作為長江江豚的行為健康評價指標(biāo)。將身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）、血常規(guī)、肝功能、腎功能、心肌損傷、心腦血管、電解質(zhì)及血糖用于評價長江江豚的生理健康。

本研究收集了279頭次長江江豚體長與體重數(shù)據(jù)，利用長江江豚生長規(guī)律模型（♂=114.44580.1410與♀ =116.25190.0947，其中代表體長，為年齡）計算江豚年齡[8]。進而分年齡和性別統(tǒng)計長江江豚的身體質(zhì)量指數(shù)（體重/體長2，kg·m-2），以95％置信區(qū)間統(tǒng)計其生理范圍。參照《中國成人超重和肥胖癥預(yù)防控制指南》[25]，結(jié)合仝云云等對異常型窄脊江豚體型參數(shù)的設(shè)定[26]，按照BMI生理值范圍的1.3倍建立長江江豚BMI肥胖標(biāo)準(zhǔn)。以生理值為中心，低于生理值范圍則視為“偏瘦型”，生理值上限至肥胖值之間范圍定義為“超重型”，肥胖值以上個體均視為“肥胖型”。

本研究利用136頭次長江江豚血液學(xué)數(shù)據(jù)，以正態(tài)分布法統(tǒng)計血常規(guī)等指標(biāo)的生理值范圍，將偏離生理范圍值的指標(biāo)定義為異常，結(jié)合行為等指標(biāo)綜合評價長江江豚的健康狀況。

1.5 圈養(yǎng)江豚“天天”的健康評估

“天天”為雄性14齡豚，自2008年起，以網(wǎng)箱（=225 m2，=7 m）圈養(yǎng)于長江天鵝洲故道中，人工定時定點投喂。于2019年12月實施常規(guī)體檢，檢查指標(biāo)同前所述。

2 結(jié)果與分析

通過對長江江豚日常行為的監(jiān)測和已有體況檢查數(shù)據(jù)的統(tǒng)計，結(jié)合文獻(xiàn)研究，從行為健康與生理健康兩個維度出發(fā)，建立了長江江豚的健康評價指標(biāo)體系，并初步評價了保護區(qū)內(nèi)圈養(yǎng)長江江豚的健康狀況。

2.1 行為健康

2.1.1 游泳行為 長江江豚是一種喜近岸分布的小型鯨類動物，其主要棲息于離岸100～300 m的近岸帶，棲息于水深3～9 m的水域，分布密度隨水深的增加而減小，長江江豚對于流速和透明度無明顯的選擇性[27]。長江江豚好集群，往往2～3頭以上個體聚集在一起。長江江豚生性活潑、膽小[28]。異常游泳行為包括離群獨游、活躍性顯著降低，亦或是其他異常行為，如主動撞擊漁船等。

2.1.2 攝食行為 長江江豚主要以小型淡水魚類為食。在攝食過程中，其典型的動作發(fā)生為集群個體分開行動，以不同的方向出水并潛入，呼吸間隔較短，響聲較大。異常攝食行為包括食欲與捕食能力顯著降低、體重下降超過10%等[29-30]。

2.1.3 呼吸行為 長江江豚呼吸行為是指頭露出水面，打開呼吸孔吸進空氣，閉合呼吸孔進入水中的過程。環(huán)境、活動水平和生理狀態(tài)可影響長江江豚呼吸頻率。通常長江江豚平均呼吸間隔為12～20 s[31-32]。異常呼吸行為包括呼吸間隔時間異常、呼吸有雜音、呼吸音粗礪、“點頭”呼吸和“垂直上浮”呼吸等[33-34]。

圖1 各年齡段江豚出現(xiàn)頻率

Figure 1 Frequency of estimated age in collected Yangtze finless porpoise

2.2 生理健康

2.2.1 身體質(zhì)量指數(shù) 按照長江江豚生長模型推算279頭次長江江豚的年齡分布，結(jié)果如圖1所示。通過SPSS單因素協(xié)方差分析，發(fā)現(xiàn)0～4齡、即性成熟前，雌雄個體間的BMI無顯著差異（=0.401>0.05），性成熟后雌雄個體的BMI則存在顯著性差異（=0<0.05）。因此按性成熟前個體、性成熟后雌性個體和雄性個體分組，分別計算其BMI的生理值范圍。結(jié)果顯示，性成熟前，長江江豚BMI的生理值范圍為16.33～25.66 kg·m-2，BMI≤16.32 kg·m-2視為偏廋，25.67～27.29 kg·m-2視為超重，BMI≥27.30 kg·m-2為肥胖。性成熟后，雌性長江江豚BMI的生理值范圍為18.04～29.51 kg·m-2，BMI≤18.04 kg·m-2為偏瘦，BMI 在29.52～30.90 kg·m-2為超重，BMI≥30.91 kg·m-2屬于肥胖。雄性長江江豚BMI的生理值范圍為16.13～26.18 kg·m-2，BMI≤16.12 kg·m-2則被認(rèn)為過輕，26.19～27.40 kg·m-2為超重，BMI≥27.5 kg·m-2屬于肥胖（表1）。

表1 長江江豚肥胖標(biāo)準(zhǔn)

表2 長江江豚與其他哺乳類血常規(guī)指標(biāo)生理值范圍

注： *表示長江江豚與其他哺乳類動物存在明顯差異。下同。

2.2.2 血常規(guī) 長江江豚血常規(guī)共涉及23項指標(biāo)，包括白細(xì)胞計數(shù)及分類、紅細(xì)胞計數(shù)與血紅蛋白和血小板計數(shù)等（表2）。白細(xì)胞及分類常用于監(jiān)測機體的各種感染及其危害程度。長江江豚WBC的生理值范圍為3.39～12.34×109·L-1。WBC分類檢查結(jié)果與 WBC 計數(shù)有同等重要作用。從計數(shù)來看，中性粒細(xì)胞生理值范圍為1.17～7.01×109·L-1，淋巴細(xì)胞為0.29～3.03×109·L-1，單核、嗜酸與嗜堿細(xì)胞均在0～1×109·L-1之間。RBC及HGB測定常用來判斷貧血及其嚴(yán)重程度。長江江豚RBC生理值范圍為4.11～6.19×1012·L-1，HGB為138.82～192.98 g·L-1。MCV、MCH與MCHC是3項鑒別貧血性質(zhì)的篩選指標(biāo)，MCV在79.02～112.73 fL之間；MCH在28.65～36.82 pg之間；MCHC在295.44～398.06 g·L-1之間。紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）是反映紅細(xì)胞體積大小以及均勻程度的參數(shù)，統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)長江江豚紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）與紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）生理值范圍分別為40.16～60.15 fL與11.76%～17.23%。血小板（PLT）對機體的止血功能極為重要，長江江豚血小板計數(shù)變動范圍為68.07～219.29×109·L-1。血小板積壓PCT受血小板平均體積（MPV）與血小板分布寬度（PDW）的影響，長江江豚PCT在0.1%～0.23%之間，與人無明顯差異。

2.2.3 肝功能 肝功能包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）等十二項指標(biāo)（表3）。ALT與AST水平是肝細(xì)胞損傷的重要評價指標(biāo)，長江江豚ALT變動范圍為21.37～53.88 U·L-1，AST 則在167.93～235.43 U·L-1之間。膽紅素（BILI）通常在實質(zhì)肝病和膽道梗阻狀態(tài)下會升高，長江江豚T-BILI生理值范圍為0～5.81 μmol·L-1?？偰懼幔═BA）是膽固醇在肝臟中代謝的最終產(chǎn)物，能特異性反映肝臟排泄情況。長江江豚TBA的范圍為0～11.25 μmol·L-1。長江江豚總蛋白（TP）在58.97～86.65 g·L-1之間。長江江豚白蛋白（ALB）的范圍為35.60～49.60 g·L-1，濃度升高常見于嚴(yán)重失水，濃度降低可見于肝和腎疾病。球蛋白（GLB）是由機體免疫器官產(chǎn)生，血清球蛋白水平能反映肝臟部分功能。15.34～41.00 g·L-1為長江江豚GLB的生理值范圍，肝臟炎癥時可導(dǎo)致GLB偏高。谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）廣泛分布于肝細(xì)胞漿和肝內(nèi)膽管上皮中，當(dāng)肝臟過度合成或膽汁排出受阻時，血清中的GGT升高。長江江豚GGT在18.13～62.30 U·L-1之間波動。此外，堿性磷酸酶（ALP）也常用于肝膽系統(tǒng)疾病的診斷，長江江豚ALP的生理值范圍為18.18～292.58 U·L-1。

表3 長江江豚與其他哺乳類肝功能指標(biāo)生理值范圍

表4 長江江豚與其他哺乳類腎功能指標(biāo)生理值范圍

表5 長江江豚與其他哺乳類心肌損傷指標(biāo)生理值范圍

2.2.4 腎功能指標(biāo) 一般以尿素氮（BUN）、尿酸（UA）與血清肌酐（Cr）3項作為腎功能監(jiān)測指標(biāo)，用于急慢性腎炎、腎病、尿毒癥和腎衰竭等疾病的檢查（表4）。BUN是機體蛋白質(zhì)代謝的主要產(chǎn)物，由肝臟產(chǎn)生，經(jīng)腎臟排出，長江江豚BUN范圍為9.49～25.00 mmol·L-1。長江江豚的UA存在明顯的雌性差異（<0.05），雌性長江江豚UA的均值為（48.35±12.23） μmol·L-1，變動范圍在20.63～93.30 μmol·L-1之間；雄性均值為（73.12±26.91） μmol·L-1，范圍為20.36～125.89 μmol·L-1。血清肌酐（Cr）則與腎小球濾過功能的損害程度有關(guān)，Cr升高意味著腎功能的損害。長江江豚的均值為（73.73±22.50 ）μmol·L-1，變動范圍為29.61～117.84 μmol·L-1。

表6 長江江豚與其他哺乳類心腦血管健康指標(biāo)生理值范圍

表7 長江江豚與其他哺乳類血清電解質(zhì)指標(biāo)生理值范圍

表8 江豚“天天”健康評估表

2.2.5 心肌損傷 臨床中一般以谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK-MB）、乳酸脫氫酶（LDH）與血清α羥丁酸脫氫酶（a-HBDH）等作為心肌損失的監(jiān)測指標(biāo)（表5）。長江江豚AST的生理值范圍在167.93～235.43 U·L-1之間，心肌細(xì)胞受損時其血清濃度可升高。臨床上常測定CK用于判斷骨骼肌和心肌細(xì)胞是否損傷，肌酸激酶同工酶（CK-MB）更具特異性與敏感性。長江江豚CK與CK-MB的生理值范圍分別為75.49～186.35 U·L-1、42.16～219.50 U·L-1，同人和其他陸生哺乳類接近。LDH增高主要見于心肌梗死，長江江豚LDH的變動范圍為98.84～345.50 U·L-1。血清α羥丁酸脫氫酶（a-HBDH）作為LDH輔助指標(biāo)，范圍在47.28～378.27 U·L-1之間。

2.2.6 心腦血管健康 總膽固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇，是心腦血管健康的重要指標(biāo)（表6）。血脂異常可導(dǎo)致冠心病等動脈粥樣硬化性心血管疾病。長江江豚總膽固醇（TC）的生理值范圍為3.51～8.37 mmol·L-1，TC升高，動脈中易形成硬化的斑塊，造成動脈迅速堵塞，致使急性心肌梗塞。甘油三脂（TG）偏高易造成血液粘稠，血脂在血管壁沉積，增加動脈粥樣硬化、冠心病和心肌梗死等疾病的風(fēng)險。長江江豚TG范圍在0～1.27 mmol·L-1之間。高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）能促進外周組織中膽固醇的消除，防止動脈粥樣硬化，其含量與動脈管腔狹窄程度呈顯著的負(fù)相關(guān)。長江江豚HDL-C的變動范圍為1.90～3.93 mmol·L-1。低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）是運輸膽固醇到肝外組織的主要運載工具，長江江豚LDL-C在0～1.93 mmol·L-1之間。

2.2.7 血清電解質(zhì) 血清電解質(zhì)共7個指標(biāo)（表7），長江江豚血清鉀（K）的生理值范圍為2.87～5.19 mmol·L-1，長期攝入不足、嘔吐或腹瀉可導(dǎo)致血鉀偏低，易出現(xiàn)肌無力、消化功能障礙等現(xiàn)象，血鉀偏高可使心動過緩、心律不齊，嚴(yán)重時可造成心臟驟停。長江江豚血鈉（Na）的變動范圍為146.31～160.24 mmol·L-1，低于146 mmol·L-1可認(rèn)為該豚有低血鈉危險，極易出現(xiàn)軟弱無力、游動過緩等癥狀。血清氯（Cl）在調(diào)節(jié)酸堿平衡、滲透壓和水分布方面起重要作用，長江江豚Cl的生理值范圍為101.55～117.31 mmol·L-1。長江江豚血清鈣（Ca）的范圍為2.08～2.81 mmol·L-1，參與肌肉收縮、凝血過程，組成骨骼和牙齒等重要生理功能。長江江豚血清磷（P）在0.53～1.96 mmol·L-1之間，其異常同橫紋肌溶解、磷攝入過多、溶骨性疾病、甲狀旁腺功能低下或高鈣血癥相關(guān)。血清鎂（Mg）的生理值范圍為0.54～0.96 mmol·L-1，Mg增高可能存在慢性腎炎、尿毒癥隱患。血清鐵（Fe）變動范圍為13.51～45.35 μmol·L-1，缺鐵性貧血或感染等可降低其濃度，但機體患有肝炎時，肝臟貯存鐵釋放和轉(zhuǎn)運鐵蛋白合成障礙，F(xiàn)e升高。

2.2.8 血糖 血糖（Glu）是機體能量的重要來源，機體血糖產(chǎn)生與消耗處于動態(tài)平衡的狀態(tài)，并維持在一個相對穩(wěn)定的水平。在糖尿病、慢性胰腺炎、心肌梗塞、甲狀腺和腎上腺功能亢進中常見Glu病理性升高。葡萄糖代謝異常、嚴(yán)重肝病、腎上腺、甲狀腺功能減退和慢性營養(yǎng)不良時均可使Glu濃度降低。統(tǒng)計分析顯示長江江豚血糖的均值為（7.35±1.20）mmol·L-1，血糖生理值范圍在4.98～9.72 mmol·L-1之間。

2.3 圈養(yǎng)江豚的健康評估結(jié)果

應(yīng)用上述指標(biāo)體系，初步評估了圈養(yǎng)長江江豚“天天”的健康狀況。“天天”為雄性14齡豚，觀察發(fā)現(xiàn)其活躍度較高且行為無異常。日食量占體重的11%左右，攝食狀態(tài)較佳。平均呼吸間隔為18 s，符合正常水平。

生理健康方面，BMI為26.40 kg·m-2，屬于超重型。血常規(guī)檢測中單核細(xì)胞百分比為6.7%，明顯超出正常范圍（0.62%～3.23%）。肝功能監(jiān)測指標(biāo)中，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）為84.00 U·L-1，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）為249.00 U·L-1，均高于長江江豚正常值范圍。膽紅素（BILI）三項則均低于正常水平。腎功能監(jiān)測指標(biāo)中的尿酸（UA）為18 μmol U·L-1，低于正常范圍?？偰懝檀迹═C）與高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）均高于正常水平（表8）。其他檢測指標(biāo)正常。

3 討論與結(jié)論

世界衛(wèi)生組織（WHO）關(guān)于人類健康的定義是：“健康不僅是沒有疾病或病痛，而且是一種軀體上、心理上和社會上的完好狀態(tài)”，包括生理健康、心理健康和社會適應(yīng)良好3個方面[35]。動物健康是指動物機體生理機能正常，即各功能器官發(fā)育良好、功能正常且具有良好的生產(chǎn)效能[36]。本研究基于行為健康和生理健康，建立長江江豚的健康評價體系，可用于長江江豚的健康評估和管理，反映種群的健康水平，為長江江豚的養(yǎng)護提供依據(jù)。

身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）是人群健康評價常用的指標(biāo)，可反應(yīng)個體健康狀況。BMI過高，罹患癌癥、心臟病、呼吸道疾病和糖尿病的風(fēng)險會增加[37]。2017年仝云云等將BMI列為長江江豚體型參數(shù)，并參照人類 BMI等判斷肥胖的方法和標(biāo)準(zhǔn)，判定某異常型窄脊江豚屬肥胖體型[26]。本研究嘗試將BMI指標(biāo)引入長江江豚的健康評估體系，統(tǒng)計分析顯示性成熟前后的個體存在顯著差異（表1）。按照人體肥胖與正常BMI的比值1.3倍建立長江江豚BMI肥胖標(biāo)準(zhǔn)。食物攝入過多和營養(yǎng)攝入失衡是長江江豚肥胖的重要原因，圈養(yǎng)長江江豚易發(fā)生。長江江豚偏瘦則可能與漁業(yè)資源不足和環(huán)境質(zhì)量下降造成的江豚食物短缺有關(guān)[38]。監(jiān)測長江江豚BMI指標(biāo)不僅能反映豚類個體的健康狀況，其群體水平也可反映長江江豚食物安全與環(huán)境安全等問題。

先前研究顯示，血液學(xué)和血液生化指標(biāo)受到動物營養(yǎng)健康、生殖周期、漁業(yè)資源和棲息地利用等影響[39-40]。在鯨豚類動物中，如瓶鼻海豚（）、白鯨（）、斑點海豚（）和長江江豚，棲息地都可通過飲食影響其血脂[41-42]。本研究按照獨立樣本t檢驗分析發(fā)現(xiàn)，鄱陽湖保護區(qū)（PL）與天鵝洲保護區(qū)（TZO）兩處江豚膽固醇（TC）存在顯著性差異（=0.001<0.05），其生理值范圍分別為4.00～6.56 mmol·L-1（TCPL）和4.05～8.31 mmol·L-1（TCTZO），但兩者均在本研究設(shè)定的生理范圍內(nèi)（3.51～8.37 mmol·L-1）。這些結(jié)果說明棲息地會造成血脂等相關(guān)指標(biāo)的波動，但不會影響其健康狀況的評價。Nabi等認(rèn)為長江江豚的HCT和MCHC受性別影響[15-16]（<0.05），本研究的t檢驗分析結(jié)果也證實兩者具有顯著性差異（<0.05）。但從范圍分布來看，HCT%（♀）為33.43%～63.44% ，HCT%（♂）為38.19%～58.67%，整體為35.88%～61.06%；MCHC（♀）為282.19～391.02 g·L-1，MCHC（♂）為289.22～400.64 g·L-1，整體為295.44～398.06 g·L-1。雌雄群體的HCT和MCHC生理值范圍有交叉，且差別較小。為簡化長江江豚的健康評價體系，長江江豚的HCT和MCHC未按性別分組統(tǒng)計。在其他鯨類中，年齡會顯著影響電解質(zhì)[43]，長江江豚Ca 和P濃度受年齡影響顯著[15-16]，統(tǒng)計分析不同年齡段江豚Ca和P濃度，發(fā)現(xiàn)0～4齡與4～8齡江豚Ca濃度具有顯著性差異（=0.017<0.05），0～4齡和4～8齡的血清Ca生理值范圍分別為2.18～2.84 mmol·L-1和2.06～2.77 mmol·L-1，兩者均與整體范圍2.08～2.81 mmol·L-1相差無幾，無需按年齡分組計算。指標(biāo)亦如此。

比較長江江豚、成人及其他水生哺乳動物的血液學(xué)臨床指標(biāo)的生理值范圍發(fā)現(xiàn)，長江江豚同其他鯨豚類動物雖有著或遠(yuǎn)或近的親緣關(guān)系，但生理值范圍具有物種的特異性。如長江江豚白細(xì)胞計數(shù)（WBC）略低于斑海豹，但明顯高于成人，并且其嗜酸細(xì)胞百分比（Eosino%）生理值范圍明顯高于斑海豹與成人。斑海豹血紅蛋白（HGB）生理值分布范圍最廣，長江江豚次之，成人最小。肝功能監(jiān)測指標(biāo)中，長江江豚AST濃度范圍為167.93～235.43 U·L-1，遠(yuǎn)高于成人（4～40 U·L-1）以及親緣關(guān)系更近的斑海豹（24.26～139.47 U·L-1），可能與AST的器官分布有關(guān)。與陸生哺乳動物不同，部分水生哺乳動物AST也存在于肌肉、腎臟和其他器官中[44]。此外，長江江豚T-BILI（0～5.81μmol·L-1）與斑海豹（0.51～5.24μmol·L-1）持平，但與成人（3.4～20.5 μmol·L-1）存在較大差異，長江江豚與斑海豹的尿素氮（BUN）正常范圍明顯高于成人，尿酸（UA）則較低。

人和動物健康體系是由影響人和動物健康的多種因素相互作用、相互影響而構(gòu)成的復(fù)雜多維系統(tǒng)。目前已提出基于生理健康、心理健康、行為健康和社會健康4個維度的人體健康評價體系。麋鹿、大熊貓等保護動物已建立基于營養(yǎng)狀況指標(biāo)、免疫學(xué)指標(biāo)、內(nèi)分泌指標(biāo)以及寄生蟲感染為主要內(nèi)容的健康評價體系。本研究從行為健康與生理健康兩個維度出發(fā)，構(gòu)建了長江江豚的健康指標(biāo)評級體系，可較好反映長江江豚個體的健康狀態(tài)。食物豐度是影響長江江豚種群數(shù)量的最主要因素，完整的腸黏膜組織、平衡的腸道菌群及健全的腸道免疫功能是長江江豚健康生長的重要保障，有必要在長江江豚的健康評價體現(xiàn)中增加胃腸道健康相關(guān)的指標(biāo)，如通過ELISA等方法測定血清中腸脂肪酸結(jié)合蛋白、脂多糖的含量來反映腸粘膜的完整性。

總而言之，本研究構(gòu)建了基于行為健康與生理健康兩個維度的長江江豚健康評估體系，可為長江江豚的健康管理及養(yǎng)護提供科學(xué)依據(jù)。

[1] 張先鋒, 劉仁俊, 趙慶中, 等. 長江中下游江豚種群現(xiàn)狀評價[J]. 獸類學(xué)報, 1993, 13 (4): 260-270.

[2] MEI Z G, ZHANG X Q, HUANG S L, et al. The Yangtze finless porpoise: On an accelerating path to extinction?[J]. Biol Conserv , 2014, 172: 117-123.

[3] BAILLIE J , GROOMBRIDGE B , GIMENEZ D M , et al. 1996 IUCN red list of threatened animals[M]. Gland, Switzerland, International Union for Conservation of Nature and Natural Resources IUCN, 1996.

[4] 國家林業(yè)和草原局,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部. 國家林業(yè)和草原局農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告(2021年第3號)(國家重點保護野生動物名錄) [EB/OL].[2021-02-01] http://www. forestry.gov. cn/ main/3457/20210205/122612568723707.html.

[5] HUANG J, MEI Z G, CHEN M, et al. Population survey showing hope for population recovery of the critically endangered Yangtze finless porpoise[J]. Biol Conserv, 2020, 241: 108315.

[6] 張曉可,劉凱,萬安,等.安慶西江浮游動物群落結(jié)構(gòu)及江豚生存狀況評估[J].水生生物學(xué)報,2018,42(2):392-399.

[7] 楊光,周開亞,高安利,等.江豚生命表和種群動態(tài)的研究[J].獸類學(xué)報,1998,18(1):2-8.

[8] 張先鋒. 江豚的年齡鑒定、生長和生殖的研究[J]. 水生生物學(xué)報, 1992, 16(4): 289-298.

[9] 張長群, 鄭楊, S PLATTO, 等. 人工飼養(yǎng)長江江豚的同性性行為和自慰行為[J]. 獸類學(xué)報, 2015,35(3): 241-252.

[10] 王丁. 長江江豚聲信號及其聲行為的初步研究[J]. 水生生物學(xué)報, 1996, 20 (2):127-133.

[11] 徐信榮, 陳炳耀, 王煉, 等. 北部灣沙田水域中華白海豚和江豚的同域分布格局及時空變化[J]. 獸類學(xué)報, 2012,32(4): 325-329.

[12] 高安利, 周開亞. 中國水域江豚外形的地理變異和江豚的三亞種[J]. 獸類學(xué)報, 1995,15(2):81-92.

[13] 裴麗麗, 章緯菁, 盧佳, 等. 長江江豚TRAIL基因的克隆、體外表達(dá)及生物學(xué)功能分析[J]. 生物工程學(xué)報, 2016,32(5): 610-620.

[14] JIA K T, LIN W Z, GUI D, et al. Molecular evidence reveals the distinctiveness of Indo-Pacific finless porpoises () in the Pearl River Estuary and insights into genus Neophocaena's origin[J]. Mar Biol , 2014, 161(8): 1919-1930.

[15] NABI G, HAO Y J, ROBECK T R, et al. Physiological consequences of biologic state and habitat dynamics on the critically endangered Yangtze finless porpoises (ssp.) dwelling in the wild and semi-natural environment[J]. Conserv Physiol, 2018, 6(1): coy072.

[16] NABI G, ROBECK T R, HAO Y J, et al. Hematologic and biochemical reference interval development and the effect of age, sex, season, and location on hematologic analyte concentrations in critically endangered Yangtze finless porpoise (ssp.)[J]. Front Physiol, 2019, 10: 792.

[17] HUA Y. Live capture of the Chinese river dolphin lipotes by the noise of small motor boats and the seine [J]. Acta Hydrobiologica Sinica,1987,11(1):99-100.

[18] NABI G, HAO Y, ZENG X, et al. Hematologic and biochemical differences between two free ranging Yangtze finless porpoise populations: The implications of habitat[J]. PLoS One, 2017, 12(11): e0188570.

[19] NABI G, HAO Y J, ZENG X Y, et al. Assessment of Yangtze finless porpoises () through biochemical and hematological parameters[J]. Zoological Studies,2017, 56(31):1-11.

[20] NABI G, HAO Y J, MCLAUGHLIN R W, et al. The possible effects of high vessel traffic on the physiological parameters of the critically endangered Yangtze finless porpoise (ssp.)[J]. Front Physiol, 2018, 9: 1665.

[21] 王文琪.館養(yǎng)海豚的飼養(yǎng)、疾病防治研究及海洋哺乳動物環(huán)境標(biāo)本庫的建立[D].青島:中國科學(xué)院海洋研究所, 2001.

[22] 馬斌容, 醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)[M].5版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1990:267.

[23] DE SWART R L, ROSS P S, VEDDER L J, et al. Haematology and clinical chemistry values for harbour seals () fed environmentally contaminated herring remain within normal ranges[J]. Can J Zool, 1995, 73(11): 2035-2043.

[24] 陳燃, 魏垚麟, 吳亮, 等. 基于PAE編碼系統(tǒng)構(gòu)建的半自然條件下長江江豚行為譜[J]. 獸類學(xué)報, 2015,35(1): 40-47.

[25] 中華人民共和國衛(wèi)生部疾病控制司. 中國成人超重和肥胖癥預(yù)防控制指南[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社, 2006.

[26] 仝云云,唐斌,唐文喬,等. 異常型窄脊江豚的體型參數(shù)及肝臟組織學(xué)分析[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報, 2017, 26(6): 21-30.

[27] 肖建強, 王丁. 人工飼養(yǎng)環(huán)境下長江江豚的行為譜的構(gòu)建[J]. 水生生物學(xué)報, 2005, 29 (3): 253-258.

[28] 蔣文華, 于道平. 半自然水域中母仔長江江豚呼吸行為的初步觀察[J]. 動物學(xué)雜志, 2006, 41 (4): 97-99.

[29] 游立新, 何虎, 張曉可, 等. 匯流區(qū)投放魚餌對江豚覓食行為的影響[J]. 水生態(tài)學(xué)雜志, 2015,36(6): 66-71.

[30] 于道平, 蔣文華, 韓德民. 長江江豚對人工投食適應(yīng)過程的觀察[J]. 獸類學(xué)報, 2007, 27 (4): 365-369.

[31] 王丁, 趙慶中, 王克雄, 等. 長江圈養(yǎng)和飼養(yǎng)池中江豚行為的幾點觀察[J]. 水生生物學(xué)報, 1997, 21(4): 306-311.

[32] XIAO J Q, WANG K X, WANG D. Diurnal changes of behavior and respiration of Yangtze finless porpoises (asiaeorientalis) in captivity[J]. Zoo Biol , 2005, 24(6): 531-541.

[33] 郭政, 趙慶中, 張先鋒. 長江江豚感染銅綠假單胞菌肺炎的診治[J]. 獸類學(xué)報, 2007, 27(1): 86-91.

[34] 劉振國, 董金海, 李魯, 等. 寬吻海豚急性銅綠假單胞菌感染的治療研究[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2000, 7(2): 123-125.

[35] 劉勇.人類健康層次性新觀點的提出及亞健康的歸屬和WHO健康定義的缺陷[J].慢性病學(xué)雜志,2010,12(1):4-6.

[36] DIERAUF L, GULLAND F. CRC handbook of marine mammal medicine (health, disease, and rehabilitation, second edition) U.S. federal legislation governing marine mammals[J]. Immunology, 2001,16(37):741-766.

[37] 劉玉璽. BMI指數(shù)應(yīng)用進展[J]. 科學(xué)大眾, 2009, 5(1): 152.

[38] 樊明寧, 張亞, 唐文喬, 等. 長江江豚一例腹壁肌間巨型囊腫的組織學(xué)分析[J]. 水生生物學(xué)報, 2016,40(1): 198-202.

[39] PETHYBRIDGE H, DALEY R K, NICHOLS P D. Diet of demersal sharks and chimaeras inferred by fatty acid profiles and stomach content analysis[J]. J Exp Mar Biol Ecol , 2011, 409(1/2): 290-299.

[40] KIM S L, TINKER M T, ESTES J A, et al. Ontogenetic and among-individual variation in foraging strategies of northeast Pacific white sharks based on stable isotope analysis[J]. PLoS One, 2012, 7(9): e45068.

[41] ASPER E D, CORNELL L H, DUFFIELD D A, et al. Hematology and serum chemistry values in bottlenose dolphins[M]//The Bottlenose Dolphin. Amsterdam: Elsevier, 1990: 479-486.

[42] COOK R A, MICHAEL K S, ELLEN S D. Circulating levels of vitamin E,cholesterol, and selected minerals in captive and Wild BelugaWhales ()[J]. J Zoo Wildlife Med,1990,21(7): 65-69.

[43] KASAMATSU M, HASEGAWA K, WAKABAYASHI I, et al. Hematology and Serum Biochemistry Values in Five Captive Finless Porpoises () [J]. J Vet Med SCI, 2012,74(10):1319-1322.

[44] WOJICK K R, ERICMILLERMURRAY E. FowlerFowler's zoo and wild animal medicine, current therapy, volume 7, elsevier, St. Louis[J]. J Exot Pet Med , 2012, 21(2): 190-191.

Study on the health evaluation system of Yangtze finless porpoise ()

DAI Caijiao1, TANG Bin2, HAO Yujiang2, WANG Kexiong2, GONG Cheng3,YUAN Junfa3

(1. College of Fisheries, Huazhong Agricultural University, Hubei Engineering Research Center for Aquatic Animal Diseases Control and Prevention, Wuhan 430070; 2. Institute of Hydrobiology, the Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430072; 3. Tian-e-zhou National Reserve for Lipotes Vexillifer, Shishou 434400)

The Yangtze finless porpoise () is the only cetaceans that lives in the Yangtze River. Understanding the physiology and health of Yangtze finless porpoise may provide important information for the protection of this species. In this study, we statistically analyzed 54 hematology parameters and blood chemistry parameters from total of 136 Yangtze finless porpoises in the Tian-e-zhou Baiji National Nature Reserve in Hubei Province and the Poyang Lake Provincial Reserve in Jiangxi Province. The health evaluation system of Yangtze finless porpoise was constructed based on the behavioral and physiological health, and was further used to assess the physical condition of "Tiantian", a captive Yangtze finless porpoise maintained in the net cage in Tian-e-zhou National Reserves. The results showed that the blood parameters of WBC, Blood platelet (PLT), and aspartate aminotransferase (AST) of Yangtze finless porpoise were significantly different from those of terrestrial mammals and other related species. And Tiantian presented with abnormalities of hepatic indices and hyperlipidemia. These results provide scientific basis for assessment and conservation of Yangtze finless porpoise.

Yangtze finless porpoise; hematologic test; blood biochemical indices; health evaluation system

S941; S966.8

A

1672-352X (2021)03-0403-09

10.13610/j.cnki.1672-352x.20210706.009

2021-7-7 10:45:05

[URL] https://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1162.S.20210706.1642.018.html

2020-08-23

香港海洋公園保育基金項目(AW03-1819)資助。

戴彩姣，碩士研究生。E-mail：2118572414@qq.com 唐 斌，博士研究生。E-mail：tangbin@ihb.ac.cn

袁軍法，博士，副教授。E-mail：jfyuan@mail.hzau.edu.cn 龔 成，高級工程師。E-mail：tianezhou @sohu.com