黃鴻運，蔣 禮，楊貴香，汪 洋，馬 雪，潘 潔，李勇軍△

（1.貴州醫(yī)科大學民族藥與中藥開發(fā)應用教育部工程研究中心·省部共建藥用植物功效與利用國家重點實驗室，貴州 貴陽 550004； 2.貴州醫(yī)科大學藥學院，貴州 貴陽 550004； 3.貴州醫(yī)科大學貴州省藥物制劑重點實驗室，貴州 貴陽 550004）

芭蕉根是芭蕉科植物芭蕉Musa basjooSieb.et Zucc的干燥根莖，味甘、性大寒、無毒，是貴州苗族的習用藥材[1]，收載于2003年版《貴州省中藥材·民族藥材質(zhì)量標準》?！侗静輦湟分杏涊d，芭蕉根搗汁溫服可治療產(chǎn)后血脹，取其汁液可涂于瘡口。芭蕉根的化學成分豐富，含苯醌、蒽醌、香豆素等成分[2－4]。研究表明，芭蕉根在抗炎、鎮(zhèn)痛、抑菌等方面均有一定作用[5－6]。為進一步利用芭蕉根藥材，提升其質(zhì)量控制標準，探討其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，課題組在前期研究[2，7]的基礎(chǔ)上，繼續(xù)分離、鑒定了7個化學成分?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

ACQUITY－TQD型質(zhì)譜儀（美國Waters公司）；BUCHI R－200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士Buchi公司）；JEOL－ECS－400 MHz型核磁共振波譜儀（日本電子株式會社）。

1.2 試藥

D101型大孔樹脂、柱層析硅膠及硅膠GF254預制板（青島海洋化工有限公司）；Sephadex LH－20型凝膠（瑞士Pharmacia Biotech公司）；Toyopearl HW－40C型凝膠、Toyopearl HW－40F型凝膠（日本東曹株式會社）；試驗所用試劑均為分析純，水為純化水。芭蕉根藥材于2016年購自云南，經(jīng)貴州醫(yī)科大學龍慶德副教授鑒定為正品，標本保存于貴州醫(yī)科大學貴州省藥物制劑重點實驗室。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取分離

取干燥的芭蕉根藥材，粉碎成粗粉，取20 kg，用70%乙醇回流提取3次，每次1.5h，第1次、第2次用7倍量溶劑，第3次用5倍量溶劑，合并3次的提取液，減壓回收溶劑，揮至無醇味，得浸膏（1 129.2 g），過D101型大孔吸附樹脂，以水、50%乙醇、95%乙醇依次洗脫。

50%乙醇段（42.0 g）采用正相硅膠柱分離，以二氯甲烷－甲醇（15∶1→1∶1，V/V）為流動相進行梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜（TLC）分析、合并相似流分，得10個組分（Fr.1～Fr.10）。

Fr.1采用正相硅膠柱分離，以石油醚－乙酸乙酯（9∶1→5∶5，V/V）為流動相進行梯度洗脫，經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得2個組分（Fr.1.1～1.2）。Fr.1.1采用正相硅膠、Sephadex LH－20型凝膠等填料進行反復柱色譜分離；經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得化合物1（10.0 mg）。Fr.1.2采用Toyopearl HW－40F型凝膠（甲醇）、Sephadex LH－20型凝膠（氯仿－甲醇，1∶1，V/V）等填料反復柱層析，得化合物2（1.2 mg）。

Fr.4采用正相硅膠柱，以石油醚－氯仿（5∶1，V/V）洗脫，經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得3個組分（Fr.4.1～4.3）。Fr.4.2采用Toyopearl HW－40C型凝膠柱（氯仿－甲醇，1∶1，V/V），Toyopearl HW－40F型凝膠柱（甲醇）等填料進行反復柱層析，經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得化合物3（2.6 mg）。Fr.4.3采用正相硅膠、Sephadex LH－20型凝膠（甲醇）、Toyopearl HW－40F型凝膠（甲醇）等填料分離，經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得化合物4（18.3 mg）。

Fr.8采用Toyopearl HW－40 C型凝膠柱（氯仿－甲醇，1∶1，V/V），經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得2個組分（Fr.8.1～8.2）。Fr.8.2采用Sephadex LH－20型凝膠柱（氯仿－甲醇，1∶1，V/V），Toyopearl HW－40C型凝膠柱（氯仿－甲醇，1∶1，V/V），Toyopearl HW－40F型凝膠柱（甲醇）分離，經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得化合物5（68.3 mg）。

Fr.10采用Sephadex LH－20型凝膠柱（甲醇）、Toyopearl HW－40F型凝膠柱（甲醇）、ODS反相（甲醇－水）分離，經(jīng)TLC分析、合并后濃縮，得化合物6（11.8 mg）、化合物7（9.8 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.2.1 化合物1

C31H50O。白色粉末。1H－NMR（400 MHz，CDCl3）δ：4.63（2H，brs，H－27），2.38（2H，m，H－2），2.20（1H，m，H－4），0.96（3H，s，H－18），0.87（3H，s，H－30），0.84（3H，dd，J=6.5 Hz，H－21），0.58（1H，d，J=4.2 Hz，H－19），0.36（1H，d，J=4.2 Hz，H－19）；13C－NMR（100MHz，CDCl3）δ：32.8（C－1），41.0（C－2），213.4（C－3），50.0（C－4），47.1（C－5），25.9（C－6），25.2（C－7），46.0（C－8），24.9（C－9），29.2（C－10），27.0（C－11），32.7（C－12），45.3（C－13），48.7（C－14），35.4（C－15），27.1（C－16），52.1（C－17），18.3（C－18），28.0（C－19），36.0（C－20），17.9（C－21），33.8（C－22），31.4（C－23），41.6（C－24），150.1（C－25），19.1（C－26），109.4（C－27），10.7（C－28），18.6（C－29），20.2（C－30）。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]的報道基本一致，故鑒定該化合物1為cyclomusalenone。

2.2.2 化合物2

C32H52O5。無色針狀。1H－NMR（400 MHz，pyridined5）δ：4.69（1H，dt，J=11.5，4.0 Hz，H－3），3.38（1H，td，J=14.41，3.0 Hz，H－19），2.58（1H，dd，J=14.0，3.4 Hz，H－7），1.83（3H，d，J=3.4 Hz，H－6），1.37（2H，m，H－22），1.21（2H，m，H－21）；13C－NMR（100 MHz，pyridine－d5）δ：38.3（C－1），23.9（C－2），80.5（C－3），37.9（C－4），55.1（C－5），18.6（C－6），38.1（C－7），44.8（C－8），46.1（C－9），37.8（C－10），39.1（C－11），210.5（C－12），85.8（C－13），51.0（C－14），66.6（C－15），43.9（C－16），35.0（C－17），51.5（C－18），35.1（C－19），31.7（C－20），34.5（C－21），39.5（C－22），27.9（C－23），16.7（C－24），15.9（C－25），20.4（C－26），14.4（C－27），31.9（C－28），32.2（C－29），25.8（C－30），21.1（Ac－Me），170.6（Ac－CO）。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]的報道基本一致，故鑒定化合物2為rubiprasin A。

2.2.3 化合物3

C6H10。淡黃色固體。1H－NMR中δH1.66（3H，s，H－6）為甲基質(zhì)子信號；δH1.23（2H，s，H－4），2.02（4H，s，H－3，5）為亞甲基質(zhì)子；δH5.07（1H，s，H－2）為雙鍵質(zhì)子信號。13C－NMR中δC26.4（C－3），29.7（C－4），32.2（C－5）為亞甲基碳信號；δC23.4（C－6）為甲基碳信號；δC125.0（C－2）和135.2（C－1）為雙鍵碳信號；由于未找到化合物的核磁數(shù)據(jù)，根據(jù)二維波譜數(shù)據(jù)（HMQC，HMBC）歸屬該化合物各碳氫信號（見表1），在HMBC重要相關(guān)中，δH1.66（3H，s，H－6）甲基氫信號與δC135.2（C－1），125.0（C－2），32.2（C－5）碳信號存在遠程相關(guān)和δH5.07（1H，s，H－2）雙鍵質(zhì)子信號與δC26.4（C－3），32.2（C－5），可見甲基連接在C－1碳上。再由分子量和已知的結(jié)構(gòu)片段可知該化合物除以上所述片段外再無其他結(jié)構(gòu)片段，由此將各基團進行連接。綜合上述分析，化合物3的結(jié)構(gòu)鑒定為1－甲基－環(huán)戊烯。化合物3的重要相關(guān)HMBC圖見圖1。

表1 化合物3的1H-NMR（400 MHz，CDCl3）和13C-NMR（100 MHz，CDCl3）數(shù)據(jù)Tab.1 1H-NMR（400 MHz，CDCl3）data and 13C-NMR（100 MHz，CDCl3）data of compound 3

圖1 化合物3的重要相關(guān)HMBC圖Fig.1 Important related HMBC spectra of compound 3

2.2.4 化合物4

C14H20O9。白色粉末。1H－NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.11（2H，s，H－3，5），4.66（1H，d，J=6.8 Hz，H－1′），3.84（1H，m，H－5′），3.78（6H，s，2，6－OCH3），3.66（1H，dd，J=12.0，5.2 Hz，H－6′），3.19（1H，m，H－3′）；13C－NMR（100 MHz，CD3OD）δ：129.5（C－1），154.7（C－2，6），94.3（C－3，5），156.0（C－4），106.1（C－1′），75.7（C－2′），78.2（C－3′），71.2（C－4′），77.7（C－5′），62.5（C－6′），56.7（2，6－OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[10]的報道基本一致，故鑒定化合物4為leonuriside A。

2.2.5 化合物5

C19H12O2。紅色針狀。1H－NMR（400 MHz，CDCl3）δ：8.23（1H，d，J=8.3 Hz，H－7），7.94（1H，dd，J=8.0，1.2 Hz，H－6），7.73（1H，dd，J=7.3，1.0 Hz，H－4），7.60（1H，m，H－5），7.59（1H，d，J=8.3 Hz，H－8），7.48（3H，m，H－3′，5′，4′），7.36（2H，m，H－2′，6′），7.12（1H，s，H－3）；13C－NMR（100 MHz，CDCl3）δ：180.5（C－1），150.0（C－2），113.0（C－3），131.8（C－3a），131.0（C－4），131.3（C－5），130.0（C－6），129.0（C－6a），135.9（C－7），127.2（C－8），149.3（C－9），125.2（C－9a），123.8（C－9b），142.6（C－1′），128.5（C－2′，6′），128.0（C－3′，5′），127.8（C－4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[11]的報道基本一致，故鑒定化合物5為2－h(huán)ydroxy－9－phenyl－phenalen－1－one。

2.2.6 化合物6

C15H12O5。紫紅色固體。1H－NMR（400 MHz，CD3OD）δ：9.65（1H，s，H－10），6.28（2H，m，H－4，6），6.90（1H，d，J=8.0 Hz，H－7），6.87（1H，s，H－2′），6.74（2H，d，J=8.0 Hz，H－5′，6′），5.19（1H，s，H－2）；13C－NMR（100 MHz，CD3OD）δ：104.7（C－2），115.2（C－4），130.6（C－5），126.6（C－6），116.2（C－7），147.0（C－8），153.6（C－9），193.2（C－10），146.5（C－1′），114.7（C－2′），145.9（C－3′），131.0（C－4′），115.8（C－5′），119.5（C－6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[12]的報道基本一致，故鑒定化合物6為2－（3′，4′－二羥基苯基）－1，3－苯并二茂惡－5－甲醛。

2.2.7化合物7

C13H8O2。橘黃色粉末。1H－NMR（400 MHz，CD3COCD3）δ：8.65（d，J=7.6 Hz，H－9），8.44（d，J=8.0 Hz，H－7），8.07（d，J=7.6 Hz，H－6），7.89（1H，t，dd，J=8.0，7.6 Hz，H－8），7.85（1H，d，J=7.2 Hz，H－4），7.66（1H，t，dd，J=7.6，7.2 Hz，H－5），7.20（1H，s，H－3）；13C－NMR（100 MHz，CD3COCD3）δ：180.4（C－1），149.5（C－2），136.6（C－7），132（C－6a），131.1（C－9），130.5（C－4），129.8（C－6），128.3（C－3a），127.4（C－9a），127.2（C－5），126.8（C－8），124.4（C－9b），113.9（C－3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[13]的報道基本一致，故鑒定化合物7為2－h(huán)ydroxy－1Hphenalen－1－one。

3 討論

芭蕉可藥食兩用。研究發(fā)現(xiàn)，芭蕉花石油醚提取物中石油醚和乙酸乙酯萃取部位可抑制肝癌細胞的增殖[14]；芭蕉莖中羽扇豆酮的含量明顯高于芭蕉根莖和葉，故可以芭蕉莖替代根莖作為羽扇豆酮的原材料來源[15]。將芭蕉根與酢漿草、補骨脂等藥材配伍，研發(fā)了“骨康膠囊”“腫痛舒噴霧劑”等中成藥制劑[16]，用于治療骨質(zhì)疏松和骨折[17]及化腫消瘀等[16－17]。目前，對于芭蕉發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確，對其作用機制研究較少，本研究中在課題組前期研究的基礎(chǔ)上，繼續(xù)分離得到7個化合物，其中化合物4，7為首次從芭蕉根中分離得到，化合物2，3，6為首次從該屬植物中分離得到，化合物3首次歸屬了其碳氫波譜數(shù)據(jù)。

綜上所述，本研究豐富了芭蕉根化學成分，可為芭蕉根的進一步研究提供參考。