常靜霞，張麗，朱旖清，沈敏，王冰，汪俊軍

原發(fā)性肝癌（PHC）是臨床常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)病率位居我國常見腫瘤的第4位，死亡率位居第2位[1]。肝癌的預(yù)后極差，早期診斷困難，患者生存率低。血清腫瘤標(biāo)志物檢測是肝癌早發(fā)現(xiàn)、早診斷的重要手段，臨床最常用的血清標(biāo)志物為甲胎蛋白（AFP）[2]。但AFP診斷肝癌的敏感性和特異性均不夠理想，因此當(dāng)前亟待尋求其他標(biāo)志物或能與之聯(lián)合檢測的標(biāo)志物，以期提高肝癌早期診斷的敏感性和特異性。隨著臨床檢驗技術(shù)的不斷進步，異常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）和高爾基體蛋白73（GP-73）被為用于肝癌早期診斷。PIVKA-Ⅱ為肝

1 資料與方法

細(xì)胞合成凝血酶原過程中的異常產(chǎn)物[3]。GP-73，又稱高爾基體Ⅱ型跨膜蛋白，是一種新發(fā)現(xiàn)的與肝癌密切相關(guān)的巖藻糖基化蛋白[4]。本研究通過檢測患者血清PIVKA-Ⅱ、AFP及GP-73的水平，探討3項指標(biāo)在診斷PHC中的價值，報道如下。

1.1 一般資料 選取2017年1―12月在東部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院（原八一醫(yī)院）全軍肝病中心住院期間檢查PIVKA-II、AFP和GP-73的肝病患者134例。PHC組52例，其中男43例，女9例；平均年齡（60.3±9.8）歲。肝硬化組40例，其中男32例，女8例；平均年齡（55.6±11.5）歲。慢性乙型肝炎（慢乙肝）組42例，其中男36例，女6例；平均年齡（45.6±12.6）歲。另選同期收治的非肝病組50例，其中男27例，女23例；平均年齡（47.6±13.9）歲。PHC、乙型肝炎肝硬化、慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》（2019年版）[1]和《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）[5]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 血清PIVKA-II、AFP和GP-73的測定 血清PIVKA-II檢測采用雅培Abbot公司的ARCHITECT-i2000全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套PIVKA-II檢測試劑盒。血清AFP檢測采用雅培Abbot公司的ARCHITECT-i1000全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套AFP檢測試劑盒。血清GP-73檢測采用北京熱景生物公司的UPT-3A上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀及配套的GP-73檢測試劑盒。各項操作（含診斷結(jié)果判斷）嚴(yán)格遵照相關(guān)儀器和配套試劑盒使用說明書。診斷標(biāo)準(zhǔn)：PIVKA-II≥40 mAU/ml、AFP≥10 g/L、GP-73≥150 ng/ml為陽性。采用GEPIA2數(shù)據(jù)庫（http://gepia2.cancer-pku.cn/#analysis）分析PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73在原發(fā)性肝癌和相應(yīng)正常組織中的表達(dá)，并分析3項指標(biāo)的表達(dá)水平與肝癌總生存期關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計方法 用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析。非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)（最小值～最大值）表示，多組比較運用Cruskal-Wallis H檢驗，兩組比較運用Mann-Whitney U檢驗；計數(shù)資料比較用2檢驗；制作受試者工作特征（ROC）曲線，計算曲線下面積，用以評價診斷的靈敏性和特異性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平比較 4組PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），其中PHC組PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平高于肝硬化組、慢乙肝組及非肝病組（均P＜0.05），肝硬化組與慢乙肝組及非肝病組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。而慢乙肝組與非肝病組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。見表1。

表1 各組血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平比較

2.2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73單獨及聯(lián)合檢測對診斷PHC的價值 3項指標(biāo)ROC曲線下面積分別為0.936、0.886和0.861，見圖1。進一步分析發(fā)現(xiàn)，PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73的靈敏性差異無統(tǒng)計學(xué)意義（2=0.083，P＞0.05）。但是PIVKA-Ⅱ單獨檢測的特異性高于AFP及GP-73（2=12.736，P＜0.05）。并聯(lián)聯(lián)檢PHC的靈敏性為92.31%，串聯(lián)聯(lián)檢時PHC特異性可高達(dá)97.15%，見表2。

圖1 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73單獨診斷PHC的ROC曲線

表2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73單獨及聯(lián)合鑒別PHC的靈敏性和特異性 %

2.3 PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73在PHC和正常組織中的表達(dá)及與PHC總生存期關(guān)系 3項指標(biāo)在PHC中的表達(dá)水平均高于正常組織（圖2）。進一步分析發(fā)現(xiàn)，PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73表達(dá)水平高的患者預(yù)后不良（圖3）。

圖2 PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73在PHC和正常組織中的表達(dá)

圖3 PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73與肝癌總生存期關(guān)系

3 討論

近年P(guān)HC的病死率和發(fā)病率均呈逐漸上升趨勢[6]。血清AFP一直被認(rèn)為是診斷肝癌的首選指標(biāo)。但由于血液中AFP水平與癌腫直徑、分化、生長及變性壞死有密切關(guān)系，故有些肝癌患者血清AFP水平較低或處于正常水平。這些因素導(dǎo)致采用AFP作為肝癌診斷的獨立指標(biāo)，可能存在假陰性的問題，從而限制了其在肝癌早期診斷中的臨床價值[7]。

PIVKA-II是一種異常脫羧基凝血酶原，其產(chǎn)生與肝癌細(xì)胞內(nèi)凝血酶原前體異常羧基化密切相關(guān)，可作為診斷肝癌的高度特異的血清標(biāo)志物[8]。定位于高爾基體的Ⅱ型跨膜蛋白GP-73，是一個巖藻糖基化蛋白，其與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。血清GP73在PHC診斷方面具有較高的特異性和靈敏性[9]。

本研究發(fā)現(xiàn)，PHC患者的PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73血清水平高于其他組（均P＜0.05），且肝硬化組3項指標(biāo)水平高于慢乙肝組和對照組。單項檢測中PIVKA-II的靈敏性最高，為76.92%，特異性達(dá)到了85.11%，均高于AFP，與謝芳等[10]結(jié)果相符。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，PIVKA-II的曲線下面積最大，為0.936（作獨立指標(biāo)診斷PHC）。這表明PIVKA-Ⅱ可明顯提高PHC診斷的準(zhǔn)確度，具有較高的單項診斷價值。本研究進一步分析發(fā)現(xiàn)，并聯(lián)試驗將靈敏性提高至92.31%，串聯(lián)試驗可提高肝癌診斷的特異性，至97.15%。通過相關(guān)數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)，PIVKA-Ⅱ、AFP、GP-73在PHC組織中的表達(dá)均高于正常組織，且表達(dá)水平越高的患者愈后越差。

綜上所述，PIVKA-Ⅱ、AFP、GP-73聯(lián)合檢測可以提高PHC的診斷效能，彌補單項檢測的不足，為肝癌的早診早治提供幫助，具有廣泛的應(yīng)用價值。