丁婷婷(浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，浙江 新昌 312500)

1 清潔驗證概述

清潔驗證目的是證明生產(chǎn)設備經(jīng)過清潔，將化學殘留、微生物殘留清潔至可接受限度，避免產(chǎn)生交叉污染。清潔驗證全過程考慮其生命周期[1]，藥品生產(chǎn)過程應有一個經(jīng)驗證且受控的設備清潔程序，制定合理的接受標準，對清潔效果持續(xù)監(jiān)測，確保方法持續(xù)有效。

1.1 清潔驗證應具備的條件

1.1.1 清潔方法的開發(fā)與建立

清潔方法開發(fā)與建立的內(nèi)容包括選擇合適的清洗劑、清潔方法的設計和可操作性等。

應用風險評估[2]來確定驗證的水平及清潔規(guī)程的要求。風險評估至少包括以下內(nèi)容：活性物質(zhì)，輔料和中間體的溶解度；劑量水平/毒性/藥效；設備的設計和構造，包括產(chǎn)品直接/間接接觸的設備表面；專用/非專用設備；關鍵的設備部件；設備表面材料的吸附性；清潔的難點；清潔周期，特別是專用設備，用來預防分解物質(zhì)殘留的累積；微生物、內(nèi)毒素的風險。

1.1.2 可接收標準和分析方法的驗證

可接收標準：生產(chǎn)設備存在化學物質(zhì)(活性藥物成分、輔料、洗滌劑、消毒劑)、微生物、內(nèi)毒素污染。這些污染物限度首先應目視設備清潔無可見異物。

化學殘留可接收標準：采取以下三種計算方式進行MACO (允許最大殘留)的計算，再依據(jù)MACO計算可接受限度。第一種：據(jù)產(chǎn)品的ADE(可接受日暴露值)或PDE(允許日接觸量)計算；第二種：根據(jù)TDD(日治療劑量)計算；第三種：根據(jù)一般限度標準10～1 000 mg/L之間。對于毒性、過敏性、致畸性的產(chǎn)品限度應當根據(jù)風險評估制定，通常規(guī)定為10 mg/L。選擇這三種殘留最低限度作為清潔驗證可接受標準。

微生物可接收標準：接觸和擦拭法可根據(jù)環(huán)境監(jiān)測規(guī)程中相應的表面微生物要求。淋洗法：根據(jù)最后所用淋洗水的微生物要求。

內(nèi)毒素可接收標準：有內(nèi)毒素要求的產(chǎn)品設備清潔后一般需考慮內(nèi)毒素殘留，如果已清潔設備后續(xù)還有去除內(nèi)毒素的方法，則不需要考慮內(nèi)毒素殘留。選擇產(chǎn)品內(nèi)毒素標準作為可接受標準。

分析方法驗證：不同設備的材質(zhì)應經(jīng)過回收率驗證，樣品的回收率和重現(xiàn)性必須通過實驗進行測試，按照不同的材料類型和表面處理情況來進行取樣以表明設備表面的污染物具有重現(xiàn)性，擦拭取樣的回收率必須大于或等于50%。分析方法應考慮專屬性或非專屬性來顯示清潔方法的有效性。

1.1.3 強化人員培訓

關鍵區(qū)域手動清潔的設備，應借助高壓噴頭的專用工具進行清潔，這些特定設備有不同的清潔程序。人是最不確定因素，手動清潔因操作人員不同而有差異性，為了證明清潔方法的可靠性，清潔驗證時應包括不同的員工，且由經(jīng)過培訓的人員來執(zhí)行。

2 制藥企業(yè)需要重視的問題與應對

2.1 忽視法律法規(guī)對設備清潔的要求

設備清潔是一個非常重要的內(nèi)容，有很多公司都忽視了法律法規(guī)中對設備清潔的要求，曾經(jīng)收到過“警告信”。圖1中列出了從2002年到2006年5年間發(fā)生的483缺陷的統(tǒng)計情況。值得注意的是，將近95%的“警告信”都是因企業(yè)沒有制訂出有效防止?jié)撛诮徊嫖廴镜脑O備清潔程序而產(chǎn)生的。沒有定期對設備和器具進行清潔與維護，有可能造成交叉污染，并對藥品的安全性、鑒別特性、濃度/效價、質(zhì)量和純度造成影響，違反聯(lián)邦法規(guī)21第211.67a。

圖1 2002年到2006年483缺陷的統(tǒng)計

生產(chǎn)中所用設備(包括器具)的清潔維護沒有建立適當?shù)囊?guī)程。違反聯(lián)邦法規(guī)21第211.67b。

沒有保存藥品生產(chǎn)中所用設備的維護、清潔、消毒和檢查的記錄，無設備清潔、維護、使用的記錄，包括日期及使用時間。違反聯(lián)邦法規(guī)21第211.67c。

清潔驗證中產(chǎn)品接觸的表面材質(zhì)如不銹鋼、搪玻璃、硅膠、有機玻璃、聚四氟乙烯驗證沒有涵蓋全面，擦拭面積、擦拭方法沒有與驗證一致等。

2.2 化學殘留限度很低及應對

當計算所得的化學殘留限度低于標準限度時，有以下方法應對：

(1)使用靈敏度高的檢驗方法。分析方法多種多樣，有特定的分析方法(如：HPLC、UPLC等)、非特定的分析方法(如：TOC、UV、電導率或pH等)，多功能車間精制步驟一般選擇特定的分析方法。檢測清潔劑可以采用選擇性的方法或者非選擇性的方法，例如TOC。

(2)提高清潔驗證時的取樣樣品濃度或其他辦法，更改取樣參數(shù)。例如擦拭取樣中，通過增大取樣面積或者減少拭子萃取的溶劑量。

(3)提高清潔驗證時的取樣樣品濃度或其他辦法。

(4)減少淋洗量。

(5)增大后續(xù)產(chǎn)品的最小批量會提高限度。

(6)限制生產(chǎn)順序，如果已清潔的產(chǎn)品殘留限度較低，則下一生產(chǎn)產(chǎn)品不能為限度更低的產(chǎn)品。

(7)利用“ICH M7基因毒性雜質(zhì)限度確定”提高TTC。

2.3 取樣不具代表性及應對

清潔驗證中常見的取樣僅為淋洗液或僅為擦拭法。兩種方法各有優(yōu)缺點。淋洗的優(yōu)點是它能測量整個設備的表面區(qū)域。然而，選擇的溶劑必須確保污染物的高回收率。但弱點是污染物可能不會溶解或可能遇到稀釋問題，因此不能確保檢測的準確性。

擦拭法的優(yōu)點是提供了一個表面的直接處理方法，但它不適用在大型設備的完整表面取樣，所以必須選取有代表性的取樣部位。這個方法也有技術局限性，不適用于那些無法取樣的設備。擦拭適用于無法進行淋洗取樣或回流溶劑時的取樣，如：打粉和篩網(wǎng)、包裝袋、托盤干燥器。

擦拭法應對取樣部位最難清潔[3]的部位進行評估，通過驗證證明哪個部位最難清洗，取樣點選取應堅持以下原則：最有代表性的部位、關鍵部位、各類最差點(難清潔的部位)、與產(chǎn)品直接接觸的表面、氣流型導致的最差點、活動頻繁的地方、靠近產(chǎn)品的地方、結構材料不同的部位、取樣點的方便性和重現(xiàn)性。

2.4 取樣污染及應對

取樣時先取空白棉簽，空白棉簽先用相應的溶劑潤洗，與樣品隔離；同一個取樣點應該先取微生物，再取化學殘留，取微生物時不能在同一點取化學殘留的樣品，但必須在同等水平的點上取樣，微生物取樣后應清潔該取樣點；取樣容器如用于微生物殘留測定，應選用已經(jīng)過滅菌的取樣瓶；如用于化學殘留，應確保取樣容器的清潔；對于所有清潔驗證的設備如反應釜，過濾器和干燥器等應在淋洗之后取擦拭樣；如果僅擦拭樣或僅淋洗取樣，需要給出充分的理由，證明取樣具有有效性和代表性；取樣擦拭方法應與驗證方法一致。

2.5 手動清潔的差異及應對

對手動清潔的設備建議每年進行一次隨機檢查。由車間啟動隨機檢查，由質(zhì)管部批準。在檢查過程中，最好檢查被認為是“難以清潔”設備的部分，必要時檢測化學殘留或微生物殘留，每年年初初次驗證時和有新員工參與時，可用產(chǎn)品進行模擬污染、模擬清洗。

3 實施成功的清潔驗證總策略

在設備方面，確認設備不存在清洗死角，具備合適的噴淋、干燥功能，CIP程序等。

在確認清潔方法方面，確認清潔方法合理，具有重復性、可操作性，若設備共線，應確認最難清洗產(chǎn)品、最差條件(如：溶解性、毒性)，確認下一產(chǎn)品劑量最大、批量最小。

在文件準備方面，查閱清潔驗證SOP，計算面積、統(tǒng)計材質(zhì)、計算限度、分析方法開發(fā)和分析方法驗證。

4 結語

清潔驗證既是保證患者用藥安全的一個重要要素，通常也是FDA檢查中的關鍵項。本文闡述了清潔驗證實施過程中遇到的常見問題，制藥企業(yè)應結合自身情況采取相應策略，不斷完善和改進清潔驗證工作。