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        不同成熟度青花椒的品質(zhì)

        2021-08-02 11:57:48李佩洪王海峰
        貴州農(nóng)業(yè)科學 2021年5期

        李佩洪, 陳 政, 曾 攀, 龔 霞, 唐 亞, 張 艷, 溫 鏗, 王海峰

        (四川省植物工程研究院, 四川 資中 641200)

        引言

        【研究意義】青花椒植物學分類為竹葉花椒(ZanthoxylumarmatumDC.),隸屬于蕓香科(Rutaceae)花椒屬( Zanthoxylum L.)[1],因葉片狹長、狀如竹葉而得名;因鮮果碧綠、干果灰綠俗稱為青花椒或青椒[2]。其果實是我國傳統(tǒng)的食用香辛料,果皮中化學成分主要為揮發(fā)油、生物堿、酰胺、香豆素和脂肪酸等[3-4],其中揮發(fā)油是青花椒香味物質(zhì)的主要成分,酰胺是花椒麻味的主要成分[4-5],二者是花椒品質(zhì)優(yōu)劣最主要的評價指標。青花椒的采收時間與紅花椒不同,其采摘時果實綠色,并未完全成熟,不同成熟度其品質(zhì)差異較大。因此,研究不同成熟度青花椒品質(zhì)變化對不同利用方向適宜采收期的確定具有重要參考意義。【前人研究進展】青花椒采摘方式與紅花椒有很大差異,除個別地區(qū),在四川、重慶的大部分地區(qū)采取的“以剪代采”的模式,即采收的時候把結(jié)果枝從樹上剪下來摘取花椒果實,大大提高采摘效率,降低采摘成本,并且采摘時間越早,夏稍抽梢條件越好,越有利于保證第二年的花椒產(chǎn)量,但是采摘時間過早,椒皮的品質(zhì)又不能得到保證[3-6]?!狙芯壳腥朦c】青花椒的品質(zhì)主要取決于其香味和麻味物質(zhì),因此通過對不同成熟期青花椒果實揮發(fā)油和麻味素的含量測定,可得出其最適宜的采收期。目前對青花椒成熟期內(nèi)其品質(zhì)的變化過程研究較少,余曉琴等[6-7]研究江津地區(qū)青花椒的適宜采收期為6月上旬,其他區(qū)域尚未見研究報道?!緮M解決的關(guān)鍵問題】通過對川渝地區(qū)青花椒主要栽培品種九葉青果實成熟期揮發(fā)油和麻味素等主要品質(zhì)指標測定,明確不同利用方向青花椒的適宜采收期,為青花椒的精深加工利用奠定理論基礎(chǔ)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        花椒果實:花椒品種為九葉青花椒,青花椒果實采至資中縣銀山鎮(zhèn)花椒示范基地。選擇基地內(nèi)具有代表性的地塊,以S形方式選擇5株椒樹,采集不同時段果實待測。儀器與設(shè)備:電子天平、鼓風干燥機、揮發(fā)油提取器、GC-MS氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀和HPLC-MS高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

        1.2 試驗設(shè)計

        川渝地區(qū)青花椒一般在6月上旬至7月上旬采摘,因此將青花椒的采收時間分為3個階段,且分別對應花椒不同成熟度,即成熟早期(5月15日至6月5日)、成熟中期(6月5日至7月5日)和成熟晚期(7月5日至8月7日)。從5月15日至6月26日,每隔7 d采摘花椒取樣1次,7月10日采樣1次,8月7日采樣1次,共采樣9次。選擇椒樹東南西北4個方向均勻采樣,每次采樣1 kg。采集的樣本放入裝有冰袋的保溫箱迅速帶回實驗室編號并保存待測。試驗樣品委托西南大學食品學院檢測,對所有采摘樣品均進行含量及成分的測定。

        1.3 測定指標

        1.3.1 青花椒果實性狀 測定所采樣品的鮮千粒重、干千粒重、種皮千粒重,計算花椒果實含水量、出皮率。

        含水量=[(鮮重-干重)/鮮重]×100%

        出皮率=干種皮重/鮮重×100%

        1.3.2 青花椒果實揮發(fā)油化學成分及含量 揮發(fā)油含量采用水蒸氣提取法測定[8]。揮發(fā)油組分采用GC-MS氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀檢測,氣相色譜條件:Agilient DB-5MS毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);進樣口溫度250℃,柱箱溫度60℃,總流量54.0 mL/min,柱流量1.00 mL/min,吹掃流量3.0 mL/min;氣化室溫度260℃。升溫程序:60℃保持5 min,升溫速率2℃/min;升溫到135℃,保持10 min,升溫速率20℃/min;升溫到260℃,保持4 min。質(zhì)譜條件:離子源溫度200℃,接口溫度280℃,質(zhì)量掃描范圍40~550 m/z。

        1.3.3 青花椒麻味素成分及含量 麻味素標準曲線的繪制:準確稱取花椒麻味素標準品10 mg,用甲醇溶解并準確定容至10 mL,配制成1.0 mg/mL的標準貯備液。用甲醇逐漸稀釋,分別得到0 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL的系列標準溶液,過0.22 μm的微孔濾膜備用。樣品處理:取粉碎并過40目篩的花椒樣品約20 g,置于具塞錐形瓶中,加入100%甲醇50 mL,于55℃水浴振蕩浸提4 h,離心(500 r/min,30 min),取上清液,殘渣再加入100%甲醇40 mL,并采用同樣方法提取,合并上清液,轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中,用100%的甲醇定容至刻度,搖勻,過0.22 μm微孔濾膜,待HPLC-MS分析。HPLC-MS條件:島津LC-20A型高效液相色譜儀,色譜柱為Zebron C18柱(4.6×250 mm,5 μm);超純水為流動相A,乙腈為流動相B,梯度洗脫程序:0~30 min,35%~75%B;30~40 min,75%~100%B;40~45 min,維持100%B;45~55 min,100%~35%B,流速0.5 mL/min;進樣量10 μL。API 4000 QTrap型電噴霧質(zhì)譜(ESI)儀,正離子質(zhì)譜(ESI+/MS),霧化氣(N2)壓力30 psi,去溶劑溫度400℃,離子噴霧電壓4 500 V,去簇電壓450 V,射入電壓6 V,出口電壓10 V,掃描范圍100~1 000 m/z。

        1.3.4 青花椒品質(zhì)的綜合分析 選擇4個具有代表性的指標進行分析,麻味物質(zhì)代表味覺、揮發(fā)油含量代表風味、出皮率和皮干重代表青花椒產(chǎn)量,按 DTOPSIS (Technique for Order Preference by Similarity to an Ideal Solution)法,先進行原始數(shù)據(jù)無量綱化處理,青花椒各品質(zhì)權(quán)重比例麻味素含量0.30、揮發(fā)油含量0.30、青花椒皮千粒干重0.2、出皮率0.2,計算各采收日期花椒品質(zhì)與理想解的相對接近度(Ci),按照Ci值大小排序,最大值即為綜合性狀最優(yōu)。

        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

        采用IBM SPSS Statistics對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 青花椒不同成熟度果實性狀的變化

        從表1看出,青花椒果實鮮千粒重、干千粒重、千粒椒皮干重、千粒籽干重隨青花椒成熟度的增加而增加,從始采期至終采期各指標分別為82.50~104.50 g、20.17~40.73 g、15.54~21.21 g、4.63~19.52 g。

        表1 不同時期青花椒的果實性狀

        青花椒出皮率在青花椒果實成熟早期隨采收期推后而緩慢增加,至青花椒成熟中晚期(6月5日至8月7日)出皮率保持相對穩(wěn)定,在20%左右。含水率和皮/籽比率隨青花椒成熟度增加而減小,從始采至終采期含水率和皮/籽比率分別從76%降至61%和3.38降至1.09。

        2.2 青花椒不同成熟度果實的揮發(fā)油含量及化學成分

        2.2.1 化學成分 通過GC-MS聯(lián)用技術(shù),對各個采收時期的青花椒檢測其揮發(fā)油成分,經(jīng)過NIST標準譜庫比對,共定性分析出29種化合物,其中,含量>1%的成分有8種,分別為醇類3種、烯烴類4種、烷烴1種。揮發(fā)油中含量最高的為芳樟醇,其次是D-檸檬烯,與余曉琴等[3-7]的研究結(jié)果一致。紅花椒揮發(fā)油的主要成分為月桂烯[9-10]、萜品醇[11]和里哪醇[12]。芳樟醇具有濃青帶甜的木青氣息,兼有木香、果香氣息,D-檸檬烯有新鮮橙子香氣及檸檬樣香氣,因此,青花椒果實具有與紅花椒果實明顯區(qū)別的濃烈青香味。

        2.2.2 揮發(fā)油含量 由表2可知,在青花椒成熟早期,果實揮發(fā)油含量隨成熟度增加逐漸增加,至中期果實揮發(fā)油含量保持相對穩(wěn)定,之后含量增加,至晚期達最大。

        表2 青花椒揮發(fā)油主要化學成分的動態(tài)積累過程

        2.2.3 青花椒揮發(fā)油主要化學成分動態(tài)積累過程 芳樟醇隨果實逐漸成熟,其含量逐漸增加,青花椒成熟中晚期,其含量一直保持在50%以上。D-檸檬烯含量在5月22日達峰值后開始緩慢減少。4-亞甲基-1-(1-甲基乙基)-雙環(huán)-[3,1,0]己烷、4-甲基-1-異丙基-3-環(huán)己烯-1-醇、1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1,4-環(huán)己二烯、(E)-3,7,11三甲基-1,6,10-十二烷三烯-3-醇隨果實逐漸成熟,含量逐漸減少到基本穩(wěn)定。β-月桂烯、α-蒎烯隨果實逐漸成熟含量無明顯變化。

        2.3 青花椒不同成熟度果實的麻味素變化

        2.3.1 青花椒麻味素的主要成分 從表3看出,青花椒麻味物質(zhì)主要是羥基-ε-山椒素、羥基-α-山椒素、羥基-β-山椒素和羥基-γ-山椒素,在整個成熟期內(nèi)均以羥基-α-山椒素含量最高。

        2.3.2 不同成熟度青花椒麻味素含量 青花椒麻味素總量隨青花椒果實成熟度增加呈先增后減趨勢,其中,以成熟中期(6月12日)的青花椒麻味素含量最高,達19.61 mg/g(表3)。

        2.3.3 青花椒麻味素主要成分的動態(tài)積累過程 由表3可知,羥基-ε-山椒素含量隨青花椒成熟度增加而增加,羥基-α-山椒素含量在青花椒成熟早期隨青花椒成熟度增加而增加,在青花椒成熟中晚期保持相對穩(wěn)定,羥基-β-山椒素含量隨青花椒成熟度的增加呈先增后減趨勢,羥基-γ-山椒素含量隨青花椒成熟度增加無顯著變化。5月29日至6月12日青花椒麻味素總量增加較多,其主要原因是此階段青花椒體內(nèi)羥基-β-山椒素合成較多。

        表3 青花椒麻味素成分及其動態(tài)積累過程

        2.4 不同成熟度青花椒的品質(zhì)

        從表4看出,青花椒6月12日(成熟中期)采摘的綜合性狀最優(yōu),其次是6月5日采摘的。青花椒成熟早期(5月29日)和成熟晚期(8月7日)采摘的青花椒綜合性狀表現(xiàn)良好。因此,在5月底到6月上旬是青花椒集中采摘綜合性狀表現(xiàn)比較好的時期,即青花椒經(jīng)過揮發(fā)油和麻味素的快速積累達到相對穩(wěn)定狀態(tài)即可進行青花椒采摘,此時采摘也有利于第2年結(jié)果枝培育;8月7日采摘青花椒雖然綜合性狀表現(xiàn)也較好,但是此時的青花椒表皮開始著色泛紅,商品性降低,且此時采摘會影響第2年青花椒產(chǎn)量。

        表4 不同采收時期青花椒的綜合評價

        3 討論

        青花椒最重要的品質(zhì)性狀包括麻味素含量、揮發(fā)油含量、椒皮干重和出皮率4個方面,其中揮發(fā)油含量和麻味素含量代表青花椒的風味成分,是區(qū)別其他調(diào)味料的關(guān)鍵;椒皮干重和出皮率是青花椒產(chǎn)量的關(guān)鍵指標。

        青花椒麻味素成分主要為羥基-ε-山椒素、羥基-α-山椒素、羥基-β-山椒素和羥基-γ-山椒素,其中以羥基-α-山椒素為主,青花椒麻味素含量隨果實成熟度增加呈先增后減趨勢,在果實成熟中期達峰值后開始降低。說明在成熟前期,青花椒的麻味素含量與果實成熟正相關(guān),即成熟度越高麻味素含量越高,果實成熟中晚期(6月中旬至8月),青花椒麻味素含量較峰值有明顯的降低。本研究在青花椒揮發(fā)油中共定性鑒定出29種化合物,其中百分含量>1%的有8種,這8種化合物共占青花椒揮發(fā)油總量的90%以上。隨著青花椒成熟度的增加,其揮發(fā)油主要成分的百分含量主要表現(xiàn)3種變化趨勢,以芳樟醇為代表的隨成熟度增加而增加,以D-檸檬烯為代表的隨成熟度增加而減少,以β-月桂烯為代表的隨成熟度增加無明顯變化趨勢。

        青花椒揮發(fā)油含量隨果實成熟度增加逐漸增加至相對穩(wěn)定。國標中規(guī)定揮發(fā)油含量≥3.0 mL/100g的鮮花椒為Ⅰ級,揮發(fā)油含量≥2.5 mL/100g的鮮花椒為Ⅱ級,重慶地方標準規(guī)定鮮青花椒揮發(fā)油含量不低于2.5 mL/100g。研究顯示,青花椒在果實成熟中晚期其揮發(fā)油含量均高于2.5 mL/100g,達到國標和重慶地方標準規(guī)定。

        4 結(jié)論

        在青花椒果實成熟早期到成熟中期(川渝地區(qū)對應時間為5月底至6月上旬)這一過渡時期即青花椒經(jīng)過揮發(fā)油和麻味素的快速積累達到相對穩(wěn)定狀態(tài)時進行采摘,在保證品質(zhì)的同時促進椒樹夏稍抽梢,有利于保證第2年的花椒產(chǎn)量。根據(jù)利用方向確定青花椒最適采收時期,若以揮發(fā)油為指標,青花椒成熟中晚期均可進行采摘(川渝地區(qū)對應采收時間為6月上旬到7月下旬);若是提取青花椒麻味素,采摘時間應控制在成熟早期與成熟中期銜接的這一時間段(川渝地區(qū)對應采收時間為5月底至6月中旬)。

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