任寶恒 袁章安 周慶元

肺癌是患病率和病死率均高居首位的惡性腫瘤，其中最常見的為非小細(xì)胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)，其惡性程度高，研究與NSCLC有關(guān)的分子指標(biāo)對患者治療及預(yù)后評估具有重要意義[1-2]。腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞和宿主細(xì)胞間復(fù)雜的作用的結(jié)果，而細(xì)胞黏附是其中重要的環(huán)節(jié)，其中細(xì)胞粘附分子是黏附功能的基礎(chǔ)，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)是一種特異性的血管內(nèi)皮細(xì)胞刺激因子，影響NSCLC血管的形成，與有關(guān)的受體結(jié)合刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，也可以促進血管內(nèi)物質(zhì)的滲出，為腫瘤的發(fā)生發(fā)展提供基質(zhì)[3-4]?；|(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase，MMP)中的MMP-2是機體中主要的Ⅳ型膠原降解酶，在腫瘤的形成過程中起重要作用[5-6]。IL-17是一種前炎性細(xì)胞因子，由Th17細(xì)胞分泌，具有很強的募集中性粒細(xì)胞、促進炎性因子釋放作用，通過與IL-17受體的結(jié)合，使下游基因表達細(xì)胞因子，且可通過TH17參與細(xì)胞免疫，IL-17與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[7-8]。因此本研究對NSCLC患者血清MMP-2、VEGF、IL-17的水平進行檢測并分析其相關(guān)性，具體如下。

資料與方法

一、一般資料

以80例2016年12月-2019年11月就診于我院并確診的NSCLC患者為研究對象，所有患者于手術(shù)前均未進行過放、化療。按WHO組織學(xué)分類、分期標(biāo)準(zhǔn)，鱗癌46例，腺癌34例，高中分化41例，低分化39例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例；根據(jù)TNM分期，Ⅰ～Ⅱ期51例，Ⅲ～Ⅳ期29例。

以上述NSCLC患者為研究組，另選取同期80例健康體檢者為對照組，兩組研究對象性別構(gòu)成比和年齡比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)(見表1)，具有可比性?；颊呒凹覍倬浞至私庋芯績?nèi)容并簽署知情同意書，本研究已獲得醫(yī)院倫理委員會的準(zhǔn)許。

表1 一般資料

二、納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1 納入標(biāo)準(zhǔn)：

(1)通過纖維支氣管鏡活檢、經(jīng)皮肺針吸活檢及術(shù)后經(jīng)病理組織學(xué)等手段檢查后確診為NSCLC；(2)術(shù)前未進行過任何肺癌的特異性治療，如放化療、生物治療及靶向藥物治療等；(3)年齡范圍為18～80歲；(4)依從性好，能配合檢測者。

2 排除標(biāo)準(zhǔn)：

(1)進行過NSCLC系統(tǒng)治療者；(2)既往有其他惡性腫瘤病史者；(3)伴有嚴(yán)重其他器官功能障礙患者；(4)檢測前攝入高劑量利尿劑者。

三、研究方法

試驗方法：兩組研究對象均于采集前8～12 h內(nèi)禁食禁水，清晨抽取肘靜脈血5 mL于非抗凝管，待凝固后予4 000 r/min高速離心分離5 min，取上層血清于Eppendorf管中，-80 ℃儲存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附法(ELISA)測定所有樣本的MMP-2、VEGF和IL-17水平，試劑盒均購自eBiosciences公司，嚴(yán)格按照說明書進行操作。

四、數(shù)據(jù)處理

結(jié) 果

一、兩組MMP-2、VEGF、IL-17水平比較

本研究對NSCLC患者和健康者血清MMP-2、VEGF及IL-17水平進行檢測比較，結(jié)果所示，研究組MMP-2、VEGF、IL-17水平均顯著高于對照組(P<0.05)(見表2)。

表2 兩組MMP-2、VEGF、IL-17水平比較

二、 MMP和VEGF與病理特征的關(guān)系

本研究對NSCLC患者不同病理特征(性別、年齡、病理類型、有無淋巴轉(zhuǎn)移和TNM分期)與MMP-2、VEGF水平的關(guān)系進行分析，不同性別和不同年齡階段NSCLC患者血清MMP-2和VEGF水平無明顯差異(P>0.05)，鱗癌和腺癌患者血清VEGF水平無顯著差異(P>0.05)，而鱗癌患者血清MMP-2水平顯著低于腺癌患者(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者MMP-2、VEGF水平均顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)(見表3)。

表3 MMP和VEGF與病理特征的關(guān)系

三、IL-17與病理特征的關(guān)系

本研究對NSCLC患者不同病理特征(性別、年齡、病理類型、有無淋巴轉(zhuǎn)移和TNM分期)與血清IL-17水平的關(guān)系進行分析，不同性別、不同年齡階段和病理類型NSCLC患者血清IL-17水平無明顯差異(P>0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者IL-17水平顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清IL-17水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清IL-17水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)(見表4)。

表4 IL-17與病理特征的關(guān)系

四、MMP-2、VEGF與IL-17相關(guān)性

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，NSCLC患者血清MMP-2和IL-17呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.618,P<0.05)，VEGF與IL-17呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.548,P<0.05)。

討 論

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是一種臨床常見的肺部惡性腫瘤，占所有肺癌的75%～80%，有很高的發(fā)病率和病死率，且近年來呈升高趨勢，嚴(yán)重影響患者生命安全。但是NSCLC早期發(fā)病隱匿、臨床體征不明顯，對及時有效的開展臨床治療有很大的影響，因此及早的診斷對降低NSCLC病死率至關(guān)重要[9]。目前的診斷方法主要有影像學(xué)、組織病理、臨床癥狀檢查等，但由于多數(shù)患者的早期臨床癥狀不明顯，臨床癥狀和影像學(xué)檢查對于微小病灶等的檢出效果較一般，病理學(xué)檢查為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但有一定創(chuàng)傷性，在早期診斷中具有局限性[10]。因此尋找NSCLC診斷的腫瘤標(biāo)志物為目前的臨床研究的熱點。本研究對NSCLC患者和健康者血清MMP-2、VEGF及IL-17水平進行檢測比較，結(jié)果顯示研究組MMP-2、VEGF、IL-17水平均顯著高于對照組(P<0.05)，即NSCLC患者血清MMP-2、VEGF、IL-17水平顯著升高。

研究表明，MMP-2與NSCLC的浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，MMP-2由腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞分泌，參與降解Ⅳ型膠原、纖維黏連蛋白等胞外基質(zhì)成分[11-12]。NSCLC腫瘤細(xì)胞的持續(xù)性生長和轉(zhuǎn)移均有新生血管的形成，VEGF是腫瘤新生血管形成因素中最有效的促血管形成因子，可促進血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，使血管通透性增加，使血管內(nèi)皮細(xì)胞外基質(zhì)降解，進而為血管生長及延伸提供基礎(chǔ)[13]。腫瘤進展和轉(zhuǎn)移均伴隨著VEGF的異常，VEGF在NSCLC患者血清和組織中呈高表達狀態(tài)[14]，與本研究結(jié)果一致。本研究進一步對NSCLC患者不同病理特征(性別、年齡、病理類型、有無淋巴轉(zhuǎn)移和TNM分期)與MMP-2、VEGF水平的關(guān)系進行分析，結(jié)果顯示，不同性別和不同年齡階段NSCLC患者血清MMP-2和VEGF水平無明顯差異(P>0.05)，鱗癌和腺癌患者血清VEGF水平無顯著差異(P>0.05)，而鱗癌患者血清MMP-2水平顯著低于腺癌患者(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者MMP-2、VEGF水平均顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)。

IL-17與炎性反應(yīng)和免疫活動有密切關(guān)系，有學(xué)者認(rèn)為IL-17可能通過趨炎反應(yīng)促進局部腫瘤的血管生成及侵襲轉(zhuǎn)移，IL-17也可誘導(dǎo)IL-6活化Stat3通路，使抗凋亡、促血管生成等基因的表達上調(diào)，促腫瘤發(fā)生發(fā)展[15]。本研究對NSCLC患者不同病理特征與血清IL-17水平的關(guān)系進行分析，結(jié)果表明不同性別、不同年齡階段和病理類型NSCLC患者血清IL-17水平無明顯差異(P>0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者IL-17水平顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清IL-17水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清IL-17水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)。經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，NSCLC患者血清MMP-2和VEGF均與IL-17呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.618、0.548, P均<0.05)。表明NSCLC患者的發(fā)病過程中MMP-2和VEGF均與IL-17具有顯著正協(xié)同作用，從而可能對該癌癥發(fā)病機制及治療靶標(biāo)關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的深入探究具有重要意義。

綜上所述，NSCLC患者血清MMP-2、VEGF、IL-17的水平顯著升高，且MMP-2和VEGF均與IL-17呈顯著正相關(guān)關(guān)系，對NSCLC的早期確診和治療有一定的支持作用。