湯勇才，黃小媛，廖 軍

廣州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東廣州 510180

慢性心力衰竭(CHF)為各類原因所致的心臟病的末期階段，是一種全球性的嚴(yán)重威脅人類生命健康的心血管疾病，且其發(fā)生率隨著年齡增長而增長，預(yù)計(jì)未來15年內(nèi)CHF 的5年內(nèi)病死率將增至50.00%[1]。隨著我國人口老齡化的加快，CHF已成為中國心血管疾病與老年病防治領(lǐng)域的巨大難題之一[2]。目前，臨床除彩色超聲多普勒診斷CHF外，生物標(biāo)志物測定也逐漸成為一種普遍的診斷方式，且對早期診斷和預(yù)后評估具有較好的指導(dǎo)意義[3-4]。紅細(xì)胞膜脂肪酸為紅細(xì)胞膜上脂肪酸的總稱，能反映飲食中脂肪酸的變化，可提供機(jī)體脂質(zhì)平衡與代謝的信息，其組成變化與多種代謝性疾病相關(guān)[5]。CHF患者常伴有嚴(yán)重能量代謝障礙，其中脂肪酸代謝異常作為底物代謝重構(gòu)的主要表現(xiàn)之一，可直接導(dǎo)致心臟三磷酸腺苷(ATP)產(chǎn)生的減少及代謝產(chǎn)物的過度堆積，繼而促進(jìn)CHF疾病的進(jìn)展[6]。紅細(xì)胞膜脂肪酸尤其是多不飽和脂肪酸(PUFA)如二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)等，對心臟細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞功能均可產(chǎn)生廣泛的作用。據(jù)相關(guān)報(bào)道[7-8]，血漿中的Omega-3脂肪酸有助于減少心血管事件，而飽和脂肪酸(SFA)的攝入可能會增加心血管疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)。目前，國內(nèi)關(guān)于紅細(xì)胞膜脂肪酸與CHF疾病之間關(guān)系的臨床報(bào)道較少，本文旨在探討紅細(xì)胞膜脂肪酸與CHF疾病的關(guān)系，分析紅細(xì)胞膜脂肪酸各成分與CHF之間的相關(guān)性，為CHF的臨床早期診斷提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年5月至2020年4月本院收治的CHF患者308例為CHF組。根據(jù)美國紐約心臟病學(xué)會(NYHA)的分級標(biāo)準(zhǔn)[9]，將CHF組患者分為Ⅱ級組101例、Ⅲ級組107例、Ⅳ級組100例。各組的CHF患者性別、年齡、疾病構(gòu)成、飲酒史與吸煙史等臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。選擇同期在本院進(jìn)行體檢的體檢健康者100例為對照組，其中男49例，女51例，年齡35～86歲，平均(58.76±8.73)歲。CHF組與對照組在性別、年齡上比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有受試者均為自愿參與本次研究并已簽署知情同意書。

表1 CHF組各級患者的一般資料比較[n(%)]

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)CHF患者均符合《中國心力衰竭診斷和治療指南2018》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]；(2)CHF患者心功能符合NYHA分級標(biāo)準(zhǔn)；(3)無精神系統(tǒng)疾病或重要器官器質(zhì)性損傷者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)急性心肌梗死；(2)既往存在血液系統(tǒng)疾病者；(3)合并糖尿病或其他代謝性疾病者；(4)先天性心臟病者；(5)合并惡性腫瘤、全身嚴(yán)重感染等重大疾病者。

1.3檢測方法 CHF組患者于入院次日凌晨空腹抽取靜脈血5.0 mL，對照組于體檢當(dāng)日凌晨空腹抽取靜脈5.0 mL，所有受試者在采血前24 h內(nèi)禁食乙醇類食物?？鼓獦颖居?～8 ℃冷藏運(yùn)輸送檢，3 000 r/min離心15 min，吸取20 μL紅細(xì)胞樣本，加入內(nèi)標(biāo)正十七酸，甲酯化后加入萃取溶液振蕩萃取，吸取上清液，以氮?dú)獯蹈?，定容?60 μL后采用美國安捷倫科技公司的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行紅細(xì)胞膜上20種脂肪酸的含量測定。

1.4檢測指標(biāo) (1)記錄并比較各組受試者紅細(xì)胞中以下8種脂肪酸水平：月桂酸(C12:0)、EPA、DHA、花生四烯酸(AA)、亞油酸(C18:2)、軟脂酸(C16:0)、油酸(C18:1)、硬脂酸(C18:0)。(2)將測定的紅細(xì)胞脂肪酸分為飽和脂肪酸(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)、Omega-3脂肪酸、Omega-6脂肪酸4類，對比各組受試者4類脂肪酸的水平。①SFA包括C12:0、C16:0、C18:0、十四烷酸、二十烷酸、二十二烷酸、二十四烷酸；②MUFA包括C18:1、十四碳一烯酸、十六碳一烯酸、二十碳一烯酸；③Omega-3脂肪酸包括EPA、DHA、α-亞麻酸；④Omega-6脂肪酸包括AA、C18:2、γ-亞麻酸。(3)計(jì)算并比較各組Omega-3指數(shù)的差異，Omega-3指數(shù)=(EPA+DHA)/總脂肪酸×100.00%。

2 結(jié) 果

2.1各組受試者的8種紅細(xì)胞膜脂肪酸水平比較 CHF患者Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組與對照組的紅細(xì)胞膜EPA、DHA、AA、C18:1水平比較，經(jīng)方差分析，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)一步兩兩組間SNK-q檢驗(yàn)結(jié)果顯示：與Ⅲ級組對比，Ⅳ級組患者的EPA、DHA水平均較低，AA、C18:1水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與Ⅱ級組比較，Ⅲ級組患者的EPA、DHA水平均較低，AA、C18:1水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，Ⅱ級組患者的EPA、DHA水平均較低，AA、C18:1水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組紅細(xì)胞膜C12:0、C18:2、C16:0、C18:0水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 各組受試者8種紅細(xì)胞脂肪酸水平比較

2.2各組受試者的4類紅細(xì)胞膜脂肪酸及Omega-3指數(shù)水平比較 CHF患者Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組與對照組的紅細(xì)胞膜MUFA、Omega-3脂肪酸、Omega-6脂肪酸、Omega-3指數(shù)比較，經(jīng)方差分析，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。與Ⅲ級組比較，Ⅳ級組患者的Omega-3脂肪酸、Omega-3指數(shù)均較低，MUFA、Omega-6脂肪酸水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與Ⅱ級組比較，Ⅲ級組患者的Omega-3脂肪酸、Omega-3指數(shù)均較低，MUFA、Omega-6脂肪酸水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，Ⅱ級組患者的Omega-3脂肪酸、Omega-3指數(shù)均較低，MUFA、Omega-6脂肪酸水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組紅細(xì)胞膜SFA總量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 各組受試者4類紅細(xì)胞脂肪酸及Omega-3指數(shù)水平比較

2.3CHF與各項(xiàng)紅細(xì)胞脂肪酸指標(biāo)的相關(guān)性 以CHF分級為因變量，以EPA、DHA、AA、C18:1、MUFA、Omega-3脂肪酸、Omega-6脂肪酸、Omega-3指數(shù)為自變量，進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，CHF分級與EPA、DHA、Omega-3脂肪酸、Omega-3指數(shù)呈負(fù)相關(guān)，與AA、C18:1、Omega-6脂肪酸呈正相關(guān)(P<0.01)。

3 討 論

CHF是指心臟結(jié)構(gòu)或功能異常，使心肌收縮力減弱，心排血量無法維持而導(dǎo)致的一系列綜合征，臨床癥狀表現(xiàn)為呼吸困難、咳嗽、乏力和尿量減少等，是大部分心血管系統(tǒng)疾病患者的最終發(fā)展歸宿和造成死亡的最主要原因之一。而隨著CHF病情發(fā)展，機(jī)體炎性反應(yīng)、神經(jīng)內(nèi)分泌激活、細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡等改變又會反過來推進(jìn)CHF病情加劇進(jìn)展，形成惡性循環(huán)[11-12]。有研究報(bào)道[13]，細(xì)胞膜脂肪酸種類的含量變化與細(xì)胞膜的抗炎癥、抗氧化能力、細(xì)胞免疫等的關(guān)系密切相關(guān)，且飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸均對心血管健康存在不同程度的影響，而CHF作為各心血管疾病的末期階段，其與紅細(xì)胞膜脂肪酸的相關(guān)性可為臨床早期診斷CHF提供參考。

研究結(jié)果顯示，隨著CHF患者的NYHA等級提高，CHF患者紅細(xì)胞膜脂肪酸EPA、DHA、Omega-3脂肪酸比例及Omega-3指數(shù)降低，而AA、C18:1、MUFA及Omega-6脂肪酸比例升高，提示CHF患者的心功能越差，機(jī)體中EPA、DHA、Omega-3脂肪酸含量及Omega-3指數(shù)越低，AA、C18:1、MUFA及Omega-6脂肪酸含量越高，則患者病情越嚴(yán)重。且CHF與EPA、DHA、Omega-3脂肪酸、Omega-3指數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，與AA、C18:1、Omega-6脂肪酸呈正相關(guān)關(guān)系，提示機(jī)體中EPA、DHA、Omega-3脂肪酸對CHF存在預(yù)防和保護(hù)作用，Omega-3指數(shù)降低反映CHF患者機(jī)體的心功能減弱，而CHF患者病情加劇進(jìn)展會使機(jī)體AA、C18:1、MUFA、Omega-6脂肪酸比例異常升高。

脂肪酸主要分為SFA、MUFA及PUFA 3類，其中Omega-3脂肪酸、Omega-6脂肪酸同屬PUFA[14]。PUFA、MUFA均可作用于血管，降低高血脂、高血壓、冠心病等心血管疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)，而高血壓、肥胖、冠心病作為CHF的第一階段，尤其冠狀動脈疾病為CHF的首要危險(xiǎn)因素[15-16]。PUFA中的Omega-6脂肪酸、Omega-3脂肪酸均不能在人體合成，只能通過食物獲取，二者在體內(nèi)需保持比例平衡。國際流行病學(xué)資料調(diào)查顯示[17]，一定比例的心血管疾病與Omega-3、Omega-6飲食比例平衡失調(diào)有關(guān)，故CHF患者應(yīng)注意平衡飲食，合理攝入營養(yǎng)。Omega-3脂肪酸可有效降低血脂，通過其代謝產(chǎn)物明顯減弱炎性反應(yīng)、抑制血小板活化、增強(qiáng)相關(guān)藥物的抗血小板集聚作用而顯著改善動脈粥樣硬化。研究發(fā)現(xiàn)[18-19]，每日攝入約1 g的Omega-3脂肪酸可降低8.00%的CHF病死率，故Omega-3脂肪酸是治療CHF的潛在方式之一。Omega-6脂肪酸可通過消除三酰甘油，降低膽固醇及其內(nèi)源合成，降低低密度脂蛋白等而調(diào)節(jié)血脂，擴(kuò)張血管，增強(qiáng)血管彈性，抑制血小板凝聚，調(diào)節(jié)血壓。但攝入過量的Omega-6脂肪酸對人體有害，其與Omega-3脂肪酸在體內(nèi)的代謝具有競爭性抑制作用。如亞油酸通過與α-亞麻酸競爭去飽和酶等生成AA，使EPA、DHA合成受阻。EPA、DHA在Omega-3脂肪酸的抗炎功能中作用最為顯著，且均可發(fā)揮防止血小板凝聚、降低膽固醇等作用，是Omega-3脂肪酸的主要活性成分，通過計(jì)算EPA、DHA的Omega-3指數(shù)可更準(zhǔn)確直觀地反映機(jī)體Omega-3脂肪酸的含量變化情況。

MUFA脂肪酸只含有一個(gè)雙鍵，性質(zhì)穩(wěn)定，其通過阻止腹部脂肪的重新分布而在一定程度上預(yù)防中心型肥胖；而應(yīng)用等能量的MUFA較碳水化合物更能有效地降低舒張壓與收縮壓；且MUFA可在凝血、纖溶系統(tǒng)發(fā)揮良性作用，通過抑制血小板的聚集以抗血栓形成，從而有效避免血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，減小冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[20]。因此MUFA脂肪酸對CHF具有防護(hù)作用。目前關(guān)于SFA對心血管疾病的作用依然存在爭議，傳統(tǒng)認(rèn)為過量攝入SFA會增加患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，但也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，攝入SFA并不會增加心血管疾病患病風(fēng)險(xiǎn)[21]。本研究中，各組紅細(xì)胞膜C12:0、C16:0、C18:0及SFA總量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說明SFA的攝入對CFA的影響較小或無影響。

綜上所述，EPA、DHA、Omega-3脂肪酸及Omega-3指數(shù)在CHF患者紅細(xì)胞膜中表達(dá)降低，而AA、C18:2、Omega-6脂肪酸及MUFA表達(dá)升高；且Omega-3脂肪酸、Omega-3指數(shù)與CHF的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，其低表達(dá)可能預(yù)示CHF程度增高，可為臨床早期診治及護(hù)理提供參考依據(jù)。